缩短苹果实生树童期的栽培技术

苹果育种周期漫长，从采花授粉到品系区试需要20多年的时间。为了提高育种效率，缩短育种周期，我所进行了大量杂交育种工作，总结出一套缩短苹果实生树童期的栽培技术。     

苹果叶片蛋白质双向电泳样品制备方法的比较

为探索适用于苹果叶片蛋白质组学研究的样品制备方法,比较了三氯乙酸/丙酮沉淀法（TCA）、酚-甲醇/醋酸铵沉淀法和Tris-HCl提取法等3种总蛋白质的提取方法。制备的样品经双向电泳分离采用银染显色。结果3种方法分别得到450、374和1032个蛋白质点。认为Tris-HCl提取法为最适方法,所得图谱背景清晰,蛋白质信息量最大。     

生长调节剂促进苹果实生树提早成花的研究

为了提早苹果实生树成花,缩短育种周期,于苹果花芽分化期选择了苯脲类细胞分裂素（KT30）、6-苄氨基嘌呤（6-BA）、多效唑（PP333）、烯效唑（Uni）、矮壮素（ccc）和乙烯利（Eth）6种生长调节物质,设置23组69个处理,采用喷雾法,对红玉×金冠和金冠实生2个组合实生树进行了2～3a的促花试验。结果表明：3a生实生树已经通过童期,喷施生长调节剂处理后可以成花,最低成花节位为77节;有12组处理对苹果实生树提早成花有效果,其中BA50mg／kg＋乙烯利1000mg／kg进行2次叶面喷施效果最佳。     

苹果实生树阶段转变过程中内源多胺含量的动态变化

利用高效液相色谱,测定了苹果杂交实生树不同节位叶片和韧皮部中的多胺含量。结果表明:叶片中多胺含量明显高于韧皮部;第81-85节和第116-120节韧皮部中的多胺总量、腐胺含量和亚精胺含量都达到最高值,说明第81-85节和第116-120节是苹果实生树的生理转变点。     

甜樱桃SSR体系的建立、优化及应用

为摸索适宜甜樱桃的SSR反应体系,利用正交设计对Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶和模板DNA等5种因素4个水平进行筛选和优化,20μL反应体系中,Mg2+、dNTPs和引物的最适浓度为1.5mmol/L、0.2mmol/L、0.4μmol/L,Taq酶宜加入1U,模板DNA应加入10～40ng;引物的最佳退火温度为56.0～62.8℃。用10对引物及建成的反应体系对10个供试品种扩增,6%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,品种间DNA谱带多态性丰富,共有29个等位位点,证实该体系稳定可靠。     

大久保桃实生树不同节位内源多胺含量的动态变化

用高效液相色谱法对2年生大久保桃自然实生树不同节位叶片、韧皮部中内源多胺含量的测定结果表明:随着实生树节位升高,桃叶片和韧皮部两种组织中的腐胺含量同步出现2次高峰,分别是46~50节和81~85节;叶片中亚精胺含量随节位升高而呈上升趋势,自46~50节起含量陡增;韧皮部中精胺含量随节位升高出现双峰曲线,在46~50节形成第1个拐点,之后在81~85节形成第2个拐点。说明46节和81节可能是桃实生树阶段转变的2个临界点。     

李矮缩病毒RT-PCR方法建立及检测应用

 以感病和健康指示植物GF305的总RNA为模板，进行cDNA的合成和PCR 扩增，结果从感病材料中扩增出与预期的172 bp大小一致的目的片段，而健康的材料无此扩增产物。对此PCR 扩增产物克隆测序，进一步佐证了RT-PCR检测结果。经过多次试验验证该检测体系，都可得到很好的重演性，从而建立了李矮缩病毒快速、灵敏、准确的RT-PCR检测技术，并进行了实际应用。