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为研发一种更安全、有效的结核病疫苗,用于预防并清除结核病,本试验构建4株分别表达Ag85A、Ag85B、Ag85C、Ag85D基因的重组卡介苗,参考pMV261载体序列和Tuberculist上登录的H37Rv序列设计引物,通过PCR扩增和无缝克隆技术构建含Ag85基因片段的重组pMV261质粒。分别对重组质粒进行PCR、双酶切鉴定后,通过电击转化转染到卡介苗感受态细胞中,利用Kan耐药基因筛选获得重组卡介苗菌株。采用PCR及Western blotting鉴定Ag85A、Ag85B、Ag85C、Ag85D基因在卡介苗中的表达,再对构建成功的重组卡介苗进行培养,用于后续试验。PCR扩增结果表明,构建的重组卡介苗rBCG/Ag85A、rBCG/Ag85B、rBCG/Ag85C和rBCG/Ag85D目的基因片段大小分别为1 447、1 402、1 453和1 330 bp,与预期大小一致,表明目的基因已成功整合到卡介苗中;Western blotting结果表明,Ag85A、Ag85B、Ag85C、Ag85D基因均可在卡介苗细胞内成功表达。本试验利用基因工程技术成功获得4株分别表达Ag85A、Ag85B、Ag85C、Ag85D基因的重组卡介苗,将其分别命名为rBCG/Ag85A、rBCG/Ag85B、rBCG/Ag85C、rBCG/Ag85D。本研究可为进一步将其他抗原基因插入卡介苗细胞构建重组疫苗及疫苗研究提供材料。 相似文献
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本研究旨在对新型鸭呼肠孤病毒(NDRV) QY株σB蛋白的遗传变异规律和结构及功能进行分析。从GenBank数据库中获取QY株和25株参考株的σB蛋白编码序列,通过Mega 6.0软件进行序列比对分析和系统进化树构建;使用Datamonkey软件进行选择压力分析;运用生物信息学软件预测QY株σB蛋白二级结构功能及B细胞和T细胞抗原表位。相似性分析结果显示,NDRV QY株与国内其他地区分离的鸭呼肠孤病毒(DRV)氨基酸相似性达到94.9%~98.9%,与禽呼肠孤病毒(ARV)及番鸭呼肠孤病毒(MDRV)的相似性仅为66.5%~68.4%和67.6%~68.4%;选择压力分析显示,σB蛋白承受净化选择压力,但存在一个正向选择位点;σB蛋白属于亲水蛋白,不具有信号肽和跨膜区,含有潜在的O-糖基化位点;结构预测分析显示,σB蛋白具有α-螺旋、β-折叠、β-转角及无规则卷曲等丰富的二级结构;表位分析显示,σB蛋白含有潜在的B细胞和T细胞抗原表位。本研究成功进行了QY株σB蛋白的基因特征和结构功能预测及其细胞表位分析,为深入了解该蛋白的免疫学特性及研发NDRV新型疫苗奠定了基础。 相似文献
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当水轮发电机组处于飞逸状态时,水轮机内部会出现严重的不稳定现象,容易引起机组的振动。贯流式水轮机因为水头低、流量大、通道短等特点,其过渡过程与常规的立式水轮机有许多不同之处。基于此,该文通过CFX16.0和Fortran程序的二次开发建立了水轮机飞逸过程的数值计算方法,对贯流式水轮机的飞逸过程进行了数值模拟,获得了转速、流量、力矩、轴向力等外特性参数在飞逸过程中的变化历程以及水轮机内部流场的动态特性。结果表明:计算得到的最大飞逸转速为2 190 r/min与试验测得的结果较为接近,误差不超过2.5%,验证了该数值方法的可靠性;飞逸过程中其余外特性参数的变化规律均符合高比转速水轮机飞逸过程的流动规律;在飞逸过程中,由于转速和流量的增加使得水轮机转轮进口相对液流角降低,水流在叶片吸力面进水侧靠近叶缘处发生撞击形成高压,在叶片压力面进水侧叶缘处出现脱流产生负压,并随着转速的升高,高压区和低压区逐渐增大,转轮叶片受力变得极为不均匀容易引起疲劳破坏;同时,转速的增加使得转轮出口环量增加,在尾水管内部将会形成偏心的螺旋涡带,引起了强烈的低频压力脉动,振幅最大可达到试验水头的104%,不利于机组的安全稳定运行。 相似文献
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广宁红花油茶树体性状遗传变异特征 总被引:1,自引:0,他引:1
为了选育广宁红花油茶优良品种,采用林分样地调查和标准株法,对广宁红花油茶集中分布区内树体各性状的遗传变异特征进行了系统研究。结果表明:广宁红花油茶树体各性状表型变异十分丰富。在个体间,各营养器官性状按照变动系数由大到小排列依次为分枝数、枝梢长、新枝数、胸径、枝叶间距、叶缘锯齿、树高、叶柄长、枝叶数量、叶宽、叶厚、叶长、叶长宽比,枝条和叶片性状在个体间的差异达到极显著水平。在个体内,按照变动系数由大到小排列其顺序依次为新枝数、枝长、枝叶间距、枝叶数量、叶柄长、叶缘锯齿、叶宽、叶长宽比、叶长、叶厚。在个体间,花器官性状按照变动系数从大到小排列依次为花冠幅、雄蕊数、花瓣宽、花瓣长、花萼数、雄蕊群直径、花柱长、柱头裂数、雄蕊群总长、花瓣数;在个体内,其顺序依次为花冠幅、花瓣宽、花瓣长、花萼数、雄蕊数、柱头裂数、花瓣数、雄蕊群直径、花柱长、雄蕊群总长。 相似文献
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轨道交通通信系统中的集中告警系统不判定每个子系统故障数据是否正确,也不判定某一子系统故障与另一子系统故障的关联性,对系统故障的智能识别不起作用.为了实现对系统故障的智能识别,在对Apriori算法的最小支持度和最小置信度进行改进的基础上,实现了动态生成最小支持度和最小置信度;对子系统的故障和子系统间的故障进行分析,挖掘... 相似文献
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~(60)Co-γ辐照对广宁红花油茶种子发芽及幼苗生长的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】给广宁红花油茶Camellia semiserrata辐射诱变育种提供理论和技术参考,以便进一步改良广宁红花油茶种质资源.【方法】用不同剂量的60Co-γ射线辐照广宁红花油茶干种子,对种子萌发和幼苗生长受到的影响进行研究.【结果和结论】辐照处理后种子发芽率和幼苗成活率降低,10~90 Gy的辐照剂量与幼苗死亡率呈极显著正相关,广宁红花油茶的辐射半致死剂量为47 Gy.辐照后幼苗苗高、地径生长也受到不同程度的抑制作用,并有部分幼苗产生了少量分枝,但幼苗还没有出现明显的畸形形态. 相似文献