固始鸡中枢免疫器官细胞和自然凋亡细胞超微结构研究

应用透射电子显微镜技术,对固始鸡17日龄胚胎、4周龄和19周龄固始鸡正常发育的中枢免疫器官超微结构进行了研究。结果表明,固始鸡胚胎胸腺和法氏囊超微结构不同于4周龄和19周龄固始鸡;在中枢免疫器官内免疫细胞存在着自然凋亡现象,主要表现为细胞核的变化,其次是线粒体增生。核质凝集为新月形、C字形、圆环形、花瓣状等多种形态,凋亡细胞裂解为凋亡小体,最后被巨噬细胞吞噬。     

CRISPR/Cas9介导的猪IPEC-J2细胞CD13基因敲除细胞系的建立

旨在利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术制备CD13基因敲除的IPEC-J2(猪空肠上皮细胞系)细胞,揭示细胞表面分化抗原13(cluster of differentiation 13, CD13)在肠道病原微生物感染肠道细胞中所起的作用。本研究在猪CD13基因第2外显子区域设计2个向导RNA(guide RNA, gRNA),命名为g3、g5,然后分别将g3和g5克隆到pX330-GFP和pX330-RFP载体骨架上,电转染IPEC-J2细胞,48 h后通过流式细胞术分选具有双荧光标记的细胞,培养并获得单克隆细胞,PCR扩增、测序,从而获得CD13基因纯合敲除的阳性细胞系。对获得的20个细胞单克隆进行PCR,并挑取部分克隆PCR产物测序,发现共有7个克隆发生了基因片段缺失,其中1个克隆为单等位基因片段缺失,3个克隆为双等位基因杂合片段缺失,3个克隆为双等位基因纯合片段敲除。本研究检测双等位基因纯合片段敲除细胞的蛋白表达水平,其结果显示,在该纯合敲除细胞中CD13蛋白几乎不表达,表明成功构建了CD13敲除的IPEC-J2细胞系。本研究获得的CD13基因敲除细胞系为探究CD13在猪肠道病原微生物感染肠道细胞中所起的作用奠定了基础。     

固始鸡免疫器官内细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的动态表达

应用免疫组织化学技术和Leica 显微图像处理系统,对细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2在固始鸡免疫器官内的动态表达进行了研究。结果：Bax蛋白在不同发育阶段固始鸡免疫器官内均有表达,但表达量不同;Bax蛋白表达于固始鸡免疫器官内淋巴细胞细胞膜、细胞质和细胞核;Bax蛋白表达阳性细胞在固始鸡不同免疫器官内分布位置不同,呈散在或簇团状分布：脾脏内不同部位均有分布,主要在动脉周围淋巴鞘、红髓、淋巴小结边缘、边缘区,很少出现在淋巴小结内;胸腺内主要分布于胸腺小叶的皮质与髓质交界处,其次是胸腺小叶髓质,极少出现于皮质;法氏囊内阳性细胞主要分布于黏膜靠近上皮细胞的固有膜层内、淋巴滤泡间的区域,在淋巴滤泡边缘的少量淋巴细胞也有Bax蛋白表达,淋巴滤泡内极少有阳性细胞。Bcl-2蛋白在固始鸡免疫器官内的表达与Bax相似,但表达量与Bax相比较少。以上结果表明,细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2参与了固始鸡免疫器官内淋巴细胞发育分化过程中的凋亡调控,对免疫器官的稳定发挥重要作用。     

组织芯片及其应用的研究进展

组织芯片(tissue microarray,TMA)是用于同步分析基因在多个组织样本中表达的高通量技术。作者综述了组织芯片的原理特点、发展历史及制作方法,概括了其应用领域,提出了目前存在的一些问题及其发展前景。     

基因编辑技术及其应用的研究进展

基因编辑技术是一项对生物体内源基因进行精准定点修饰的技术,极大地推动了生命科学的发展进程,是目前生物科学研究领域应用最广泛的技术。基因编辑技术主要包括锌指核酸酶（ZFN）、类转录激活因子效应物核酸酶（TALEN）和规律性重复短回文序列簇（CRISPR/Cas）。基因编辑技术可以特异性识别靶向序列,定点修饰靶向基因,进而深入研究目标基因的功能。基因编辑技术具有操作简便、作用效率高和脱靶率低等优势,因此广泛应用于生命科学研究、疾病模型的构建、药物研发以及农业生产等领域。作者主要介绍了ZFN、TALEN、CRISPR/Cas 3种新型基因编辑技术,综述了基因编辑技术在基因治疗、品种研发和改良、研究功能基因以及构建疾病动物模型等方面的应用,简要讨论了基因编辑技术与传统转基因技术之间的区别,并对基因编辑技术的应用前景进行了展望。     

对虾白斑综合症(WSSV)的诊断与防治

对虾白斑综合症杆状病毒(WSSV)于20世纪90年代初首先在中国台北发现，是1993年以来导致我国沿海人工养殖对虾暴发性流行病大规模频繁发生的主要病毒、病原。随后在泰国、印度尼西亚、日本、韩国以及太平洋海岸国家相继也有类似的报道。此病毒先后被命名为中国对虾无包涵体杆状病毒(CNBV)，传染性皮下及     

巴中动物卫生全域监督巡查实践

正为将动物卫生日常监督延伸到生产一线,促进监督职能前移、监督机构下沉、监督人员下行,四川省巴中市开展了"动物卫生全域监督巡查"探索,初步形成了"六化联动、全域覆盖、全员监督、违法必究"的动物卫生监督模式,将动物卫生日常监督逐步制度化、规范化、常态化,基本实现了动物卫生监督"全覆盖、高质量、零事故"目标。一、监督巡查责任区域化继续深入推进畜牧兽医综合执法,强化区域性动物卫生监督分所的机     

有机微量元素的研究及应用进展

对氨基酸有机微量元素的定义、合成、生物学功能、作用机制及在实际生产中的应用进行综述,并对其应用前景进行探讨。     

二价染色体上黄鳝SRY盒基因的高分辨区域定位↑（*）

黄鳝是合鳃目、合鳃科、黄鳝亚科的唯一代表种，主要分布于东印度、东南亚、日本和中国，具有较重要的经济价值。因其是雌雄同体，具有先雌后雄的天然性逆转生理规律，对于其染色体组中是否存在异形性染色体，历来就有截然相反的２种观点，所以，黄鳝的性别决定机制一直是...