凡纳滨对虾Arf6基因的克隆及表达分析

通过电子克隆所得序列设计引物,采用PCR扩增方法首次克隆得到长695bp的凡纳滨对虾Arf6基因序列,其中包括96bp的5'非翻译区(Untranslated region,UTR)、71bp的3'非翻译区和528bp的开放阅读框.编码175个氨基酸残基,推算分子量约为20kDa,理论等电点为8.82,分子式为C896H1426N252O255S8.氨基酸序列分析表明,Arf6基因编码的氨基酸序列中具有保守的GTP结合区域,总的带负电荷的残基(Asp+Glu)为21,总的带正电荷的残基(Arg+Lys)为25.与其他物种的Arf6基因进行同源比对发现,该基因的氨基酸序列具有较高的保守性,基于氨基酸序列的聚类分析表明,凡纳滨对虾与果蝇属种类亲缘关系最近.半定量RT-PCR的结果显示,该基因在组织中广泛表达且在肝胰腺中表达量最高,在眼柄中表达最低;其在经桃拉综合征病毒(TSV)感染后的凡纳滨对虾肝胰腺中的表达量显著高于在无特定病原(SPF)凡纳滨对虾;加之ProtFun在线预测蛋白质的功能分类,表明Arf6基因可能是一免疫应答因子参与凡纳滨对虾免疫防御反应.     

绵羊骨形态发生蛋白受体IB(BMPR-IB)基因部分3'非翻译区的多态性分析

根据绵羊骨形态发生蛋白受体IB(bone morphogenetic protein receptor IB,BMPR-IB)基因部分调控区的mRNA序列设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测BMPR-IB基因部分3'非翻译区序列在绵羊(Ovis aries)高繁殖力品种(小尾寒羊和湖羊)和低繁殖力品种(特克塞尔和中国美利奴绵羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊和湖羊高繁殖力的影响.结果发现,引物P1扩增片段存在多态性,其余2对引物的扩增片段均不存在多态性.对于引物P1,只在湖羊中发现AA和BB两种基因型,其余3个品种均为AA型;测序表明BB型与AA型相比有2个碱基突变(121T→C和195T→C);湖羊AA和BB基因型频率分别为0.575和0.425,湖羊AA和BB基因型之间产羔数的最小二乘均值差异不显著(P>0.05).研究结果初步表明,检测的BMPR-IB基因位点对小尾寒羊和湖羊高繁殖力都没有显著影响.     

五指山小型猪生长激素及其受体基因的克隆与序列分析

动物生长发育调控是一个高度复杂而精细的生理过程,受多种因素如神经、体液、遗传、营养及环境等的影响。其中,动物神经内分泌生长轴各因子(激素、受体、结合蛋白等)及其基因对动物的生长发育起着关键的作用。正常情况下,下丘脑接受体内外的信息,生长激素释放激素(grow thhorm one releasing horm one,GHRH)和生长抑素(som atostatin,SS),调节垂体生长激素(grow thhorm one,GH)的分泌,GH通过与生长激素结合蛋白(grow th horm one b ind ing protein,GHBP)结合而运输,与靶器官上的生长激素受体(grow th horm one receptor,GHR)结合,促使类胰岛素生长因子(insu lin-like grow th factors,IGFs)的产生并进入血液循环,IGFs再通过其结合蛋白(insu lin-likegrow th factor b ind ing protein,IGFBP)转运到全身组织细胞,促使组织细胞的生长与分化。五指山猪(Wuzhishan Pig,WZSP)是一种原产于中国海南省山区的小型猪。五指山猪成年体重仅为35 kg,是正常猪体重的15%~30%,是一种频临灭绝的珍稀物种。五指山猪具有以下特征:体型小,性成熟早,肉质好,耐近交和遗传稳定。为了开发和应用这一珍稀猪种的遗传资源,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所从1989年就已经开始对五指山猪进行近交系培育,现在已经获得五指山猪近交系18代(近交系数为0.974),但五指山猪的矮小机理至今不明。为了探讨五指山猪矮小的分子机理,对五指山猪生长激素及其受体基因进行了克隆和序列分析。从纯种近交16代五指山猪的垂体和肝组织提取总RNA,根据GenBank中猪生长激素及其受体基因的序列(登录号分别为X53325,NM214254)设计特异性引物,对五指山猪生长激素及其受体基因进行扩增,然后对PCR产物进行回收、克隆测序。测序结果表明,五指山猪生长激素基因开放阅读框长651 bp,编码216个氨基酸,其中包含26个氨基酸的信号肽;生长激素受体基因编码区编码639个氨基酸,其中包含18个氨基酸的信号肽。运用生物学软件DNAssist 2.2将五指山猪和普通猪的生长激素基因编码区进行比对发现,五指山猪生长激素基因的编码区有4个突变:26号位置发生C→T突变,该突变导致缬氨酸代替丙氨酸;65号位置发生G→A突变,该突变导致谷氨酰胺替换精氨酸;114号位置发生T→C突变,252号位置发生A→G突变,但是这两个突变都未引起所编码氨基酸的变化。五指山猪和普通猪生长激素受体基因比对发现,1143号位置的G→T突变引起天冬氨酸替换谷氨酸;1225号位置的G→T突变导致丝氨酸替换丙氨酸;1666号位置C→G突变导致缬氨酸替换亮氨酸;1739号位置C→G突变导致丙氨酸被甘氨酸所代替;1801号位置G→A突变导致缬氨酸被异亮氨酸代替;1248号位置G→A突变,1287号位置G→A突变和1827号位置G→C突变均为同义突变,未引起相应编码氨基酸的变化。五指山猪生长激素基因有两处氨基酸替换,这两处替换发生在信号肽区,对成熟蛋白的结构和功能没有影响,但是有可能会影响蛋白的运输。五指山猪生长激素受体基因突变都发生在生长激素受体的胞内结构域,这些突变可能改变生长激素受体的空间构像,从而对生长激素受体的胞内信号转导产生一定的影响,影响生长激素-生长激素受体-胰岛素样生长因子轴的信号级联,削弱生长激素的促生长作用。     

猪-仓鼠杂种细胞中猪染色体鉴定

对猪与仓鼠细胞融合形成的一稳定的杂种细胞系进行染色体分析,Ｇ１１染色显示该杂种细胞中具有１条猪的染色体和２１条仓鼠染色体,经ＰＣＲ检测确证该杂种细胞中含有猪１２号染色体。     

种公鸡精液品质性状与表型性状相关性研究进展

在现代家禽生产中,种公鸡的选择和高效利用对于鸡产业的发展和良种品系的建立至关重要。精液品质是种公鸡重要的繁殖性状,是选择良种公鸡的重要指标。精液品质的测定费时费力,研究精液品质与表型性状的相关性,可为精液品质的间接选择提供理论依据。文章综述了家禽精液品质与表型性状相关性的研究进展,并对其实际应用进行了展望,以期为家禽生产需要和遗传改良提供参考。     

太湖猪及毗邻地区猪品种的主成分地理分布研究

利用太湖猪5个类群(二花脸、中梅山、小梅山、米猪和沙头乌)及姜曲海猪、东串猪在25个微卫星DNA座位上的等位基因频率,进行主成分分析,绘制地理分布图。结果表明,第一主成分地理分布图反映太湖猪类群与其它两品种遗传结构的差异;第二主成分地理分布图反映太湖猪各类群遗传结构的差异,并将其分为两类;第三和第四主成分地理分布图初步揭示华北型与华中型猪品种的基因交流。本研究为进一步开展全国性地方猪品种的主成分地理分布分析奠定基础。     

氨基酸铁在养猪生产中的应用

铁在猪饲料营养中是必需的微量元素之一,而氨基酸铁是第三代新型饲料添加剂,具有生物利用率高、化学结构稳定、增强免疫力、吸收率高和利于环保等特点,是当前国内外研制和开发的热点.     

猪Y染色体上存在人PY3.4同源顺序的初步证据

猪Ｙ染色体上存在人ＰＹ３．４同源顺序的初步证据ＴＨＥＰＲＩＭＡＲＹＥＶＩＤＥＮＣＥＯＮＴＨＥＨＯＭＯＬＧＵＥＴＯＰＹ３．４ＤＮＡＦＲＡＧＭＥＮＴＳＲＥＳＩＤＩＮＧＩＮＴＨＥＹＣＨＲＯＭＯＳＯＭＥＯＦＰＬＧＳ李奎，蒋建桥，沈亦平，张木先，张锡元ＬｉＫｕ...     

狗肾上腺交感节前神经元在脊髓内的定位及节段性分布──HBP法

用ＨＲＰ技术对８只狗肾上腺交感节前神经元位置及节段性分布进行了研究。将ＣＢ－ＨＲＰ注入一侧肾上腺，标记的交感节前神经元胞体分布于注射侧脊髓Ｔ３－Ｌ３节段，高峰在Ｔ６－Ｔ９，占标记细胞总数５８．７４％。标记细胞主要位于注射侧脊髓中间外侧核主部（ＩＬｐ，９０．８２％），其次是中介核（ＩＣ，６．２８％）、中间外侧核索部（ＩＬｆ，２．０３％）、中介核室管膜旁部（ＩＣｐｅ，０．８７％）；以卵圆形、梭形、多边形的中小型细胞为主，平均直径为２３μｍ。标记细胞树突野广阔，横向伸廷于同侧侧索、中间带区，还有少数至中央管室管膜层或沿灰质背联合伸至对侧中间带区。     

3个中国实验用小型猪品种血液生化指标分析

用全自动生化分析仪检测了五指山小型猪近交系、贵州小型猪和广西巴马小型猪封闭群25个血液生化指标，统计分析结果显示，3个品种间无差异的指标有1项，差异极显著（P＜0.01）的指标有7项；3个品种中所有指标的变异系数平均值依次为：0.18、0.21和0.17。通过3个小型猪品种间同一指标的比较，以及与人类参考值、国外著名的哥廷根小型猪、地方猪品种和引进大型猪品种比较，为小型猪用于人类医学研究应用提供参考。