富含ω-3多不饱和脂肪酸克隆猪制备的关键技术研究

作者综述了制备富含ω-3多不饱和脂肪酸克隆猪的研究意义和国内外的研究现状，并介绍了自己的研究进展。用化学合成的方法获得了C briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1，并构建了哺乳动物细胞表达载体。通过显微注射的方法制备了转基因小鼠，sFat-1基因能够在转基因小鼠中产生更多更长链的而且更有价值的DHA以及DPA。在确认sFat-1基因功能的基础上，将载体转染到猪胎儿成纤维细胞，利用阳性的细胞克隆通过核移植方式制备富含ω-3多不饱和脂肪酸克隆猪。     

精子载体法获得转人her2基因猪

将带有外源基因的载体酶切纯化后与去精清的猪新鲜精液按比例混合，17℃静置处理使外源DNA进入精子头部，通过人工授精使受体母猪怀孕后产下20头仔猪，经PCR特异性片段扩增，特异片段序列测定和比对，共4头PCR结果为阳性。初步证明人her2基因已在猪染色体上整合，其整合率约为20％。本研究利用精子载体法成功获得了转基因阳性猪，为大动物的转基因研究提供了理论与实践的参考。     

遵义县番茄晚疫病发生及防治方法浅析

遵义县番茄蔬菜种植面积较大，番茄晚疫病发生重、损失大、不易防治、防治效果差，针对遵义县番茄晚疫病的发生及防治进行调查与研究，提出农业防治与药剂防治相结合的方法，为种植户防治番茄晚疫病提供参考。     

鸡胸肌中特异表达的基因-Tx-TnT

鸡的快骨骼肌Ｔｘ－ＴｎＴ基因特异性地在胸肌中表达Ｔｘ－ＴｎＴ异构体，本文对Ｔｘ－ＴｎＴ的结构组成、特异性的及生理功能的研究现状进行了综述，并且讨论了对Ｔｘ－ＴｎＴ基因作进一步研究的必要性。     

枯草芽孢杆菌制剂对仔猪生长及免疫的影响

试验旨在通过研究枯草芽孢杆菌制剂对断奶仔猪生长和免疫指标的影响,探明枯草芽孢杆菌制剂在仔猪上的应用效果和适宜添加量。试验选用240头同批断奶及体质量和日龄相近的(杜×长×大)三元杂交断奶仔猪,随机分为4个处理组,每处理3个重复,每重复20头猪,公母各半。对照组饲喂基础饲粮,试验组Ⅰ、试验组Ⅱ和试验组Ⅲ在饲喂基础饲粮的基础上分别添加0.5%、1.0%和1.5%的枯草芽孢杆菌制剂(等量的沸石粉被替换),试验期30 d。结果表明:与对照组相比,试验组Ⅱ和试验组Ⅲ平均末质量和平均日增质量分别提高10.73%和11.27%及19.58%和22.13%,均差异显著(P0.05);料重比、病死率和腹泻率则分别降低0.16和0.17、5.00%和5.00%及4.32%和4.05%,均差异显著(P0.05)。以上指标试验组Ⅱ和试验组Ⅲ间均差异不显著(P0.05)。与对照组相比,试验组Ⅱ和试验组Ⅲ的血清免疫球蛋白A(Ig A)、免疫球蛋白G(Ig G)、补体C3和补体C4分别提高了18.23%和22.05%、6.69%和5.95%、23.94%和22.18%及62.96%和85.19%,均差异显著(P0.05)。试验组Ⅱ和试验组Ⅲ间除补体C4外,其他免疫指标均差异不显著(P0.05)。枯草芽孢杆菌制剂可显著提高仔猪的生长性能和免疫力,且适宜添加剂量为1.0%。     

我国重点国有林区森林旅游发展现状与政策建议

重点国有林区是我国最重要的森林生态功能区之一,在维护国家生态安全、应对气候变化、保障国家木材供给等方面发挥了重要作用,而森林旅游是重点国有林区转型发展的重要方向。文中基于重点国有林区森林旅游发展现状,对5个森工(林业)集团,以及100个国家级森林公园、湿地公园和自然保护区森林旅游发展情况进行了调查研究。结果表明,重点国有林区森林旅游发展的主要问题体现在自身投入能力弱、可游季短、林地审批困难、专业人才匮乏、资源同质性严重等多个方面;此外,区域发展水平不平衡不充分仍然突出,优势与短板长期共存,顶层设计和政策缺位。研究提出了推动重点国有林区森林旅游发展的政策建议,包括优化重点国有林区森林旅游空间布局、扩大森林旅游产品供给能力、拓展森林旅游客源市场、提升森林旅游人才培养能力、做好森林旅游发展政策支撑,以期为新时代重点国有林区森林旅游高质量发展提供参考。     

基于CRISPR/Cas9技术建立IGF2R基因修饰PK-15细胞

作为我国特色的地方种质资源,藏猪对高海拔、低氧、强紫外线辐射等恶劣环境具有良好的适应性,前期研究发现藏猪的IGF2R（insulin-like growth factor 2 receptor,IGF2R）基因在其内含子上有1段274 bp的缺失,且该缺失为藏猪独有的变异,关于IGF2R是否参与藏猪对低氧等恶劣环境的适应性调节的相关研究尚未报道。为了建立IGF2R基因274 bp修饰的猪细胞系,研究IGF2R基因对藏猪低氧耐受特性的影响,通过CRISPR/Cas9技术建立基因修饰PK-15细胞系,并通过PCR、实时荧光定量PCR（real time quantitative PCR,RT-qPCR）、蛋白免疫印迹（Western-blot）、免疫荧光（immunofluorescence,IF）等方法鉴定其分子特征,随后分别利用CCK-8和RT-qPCR 、Western-blot对基因修饰细胞进行活力和凋亡基因检测。结果显示,已成功构建IGF2R基因274 bp修饰的猪细胞系,IGF2R基因表达量极显著下调（P < 0.01）。基因修饰细胞活力在72 h时极显著上升（P < 0.01）,并且含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9 （cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase9）和BCL-2关联 X （BCL2-associated X,BAX） 蛋白的水平显著下调（P < 0.05）,并且B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,BCL2）基因的mRNA水平极显著上升（P < 0.01）。成功构建了IGF2R基因精确修饰的PK-15细胞系,并初步进行了功能研究,为研究IGF2R基因功能提供细胞模型,并为后续基因编辑猪的制备奠定基础。     

关中地区近50年来降水量变化的特征分析

基于关中地区44个气象站1960~2007年逐月降水资料,通过Mann-Kendall突变检验、小波分析及其它数理统计方法,对关中地区降雨量进行多时间尺度分析。研究发现关中地区在近50 a内降水序列是呈现减少趋势,降水倾向率是-11.51 mm·10 a-1:在1968~1988年间降水量变化不稳定,降水量趋势出现10个突变点;降水量呈丰枯交替出现;关中地区年降水量主要存在两个是尺度的变化周期18 a和8 a,其中18 a尺度存在近50年内,8 a的尺度主要集中在20世纪70年代中期至90年代中期。在时间上18 a尺度上经历了5个枯丰交替变化;8 a的经历了12个枯丰交替变化。     

济宁青山羊高繁殖力候选基因类固醇21-羟化酶基因(CYP21)的研究

采用PCR-SSCP和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术检测类固醇21-羟化酶基因(steroid 21-hydroxylase,CYP21)10个外显子在山羊(Capra hircus)低繁殖力品种(安哥拉山羊和内蒙古绒山羊)、中等繁殖力品种(波尔山羊)和高繁殖力品种(济宁青山羊)中的碱基变异,同时研究该基因对济宁青山羊高繁殖力的影响.结果表明,10对引物中仅引物P10扩增片段存在多态性.对于P10扩增产物,在内蒙古绒山羊、波尔山羊和济宁青山羊中检测到AA、AB和BB基因型,在安哥拉山羊中检测到AA和AB基因型;测序分析发现,BB与AA基因型相比发生了A2789C、C2791A、G2818A、G2851C、G2852T和G2854A的突变,在第2821与2 822位发生了两个碱基CG的缺失突变,导致426～448位共有19个氨基酸发生改变;济宁青山羊BB和AB基因型产羔数最小二乘均值分别比AA基因型的多0.81只(P＜0.05)和0.47只(P＜0.05),BB和AB基因型之间差异不显著(P＜0.05).研究结果初步表明CYP21基因的B等位基因是提高山羊产羔数的一个潜在有效的DNA标记.     

不同锌源对断奶仔猪生长性能及皮毛的影响

试验主要研究不同结合形式的有机锌对断奶仔猪生长性能和皮毛的影响.试验选取144头28日龄和断奶体质量相近(7.5±0.5) kg的仔猪,随机分为4个组,每组设6个重复,每重复6头仔猪.试验A、B和C组分别添加0.028％、0.039％和0.057％不同形式的有机锌(以锌计60 mg/kg),D组为对照组添加硫酸锌(以锌计100mg/kg),饲养时间28 d.结果表明:在日粮中添加不同形式的有机锌可以提高断奶仔猪的日增质量,降低料肉比,可显著改善仔猪的皮毛状况.以试验组A猪只毛色状况最佳,试验组C次之,试验组B较差,但均优于对照组.