茶树脱落酸β-葡萄糖基转移酶基因CsAOG的克隆和表达分析

脱落酸（ABA）β-葡萄糖基转移酶（abscisate beta-glucosyltransferase）是ABA分解代谢途径中的关键酶,在维持植物体内ABA正常生理水平上发挥着重要作用。通过RACE法克隆了茶树中ABA β-葡萄糖基转移酶基因CsAOG,NCBI登录号为MF370238。CsAOG全长为2 108 bp,ORF大小为1 443 bp,无内含子,该基因编码480个氨基酸,分子量约为53.26 kDa,等电点为5.58,亚细胞定位于细胞质。CsAOG蛋白具有葡萄糖基转移酶（UDPGT）保守结构域。通过MEME分析工具在CsAOG序列中获得了9个保守元件。由系统进化和蛋白互作分析可知,CsAOG位于UGT73分支,且UGT73B4与UGT73B5的互作最强。实时荧光定量结果表明,叶中CsAOG表达水平最高,根部次之,茎中最低;在越冬期间,乌牛早CsAOG表达量先上调后下调,最后维持在较低水平;舒茶早和黄山早芽CsAOG表达量呈下调趋势。赤霉素处理后,乌牛早CsAOG表达量上调;高温胁迫后CsAOG表达量呈先升后降的趋势,12 h时表达量最高,而低温胁迫时表达量变化不大。通过对CsAOG基因的研究,为理解ABA在调控茶树生长发育和抗逆机制中的作用提供了理论基础。     

茶树可溶性糖含量的HPLC-ELSD检测及其与茶树抗寒性的相关分析

建立了茶树叶片中可溶性糖的高效液相色谱一蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)的测定方法。以AgilentZorbax carbohydrate柱为分离柱,流动相为乙腈-水(75:25,V/V),流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,上样量10μL。蒸发光散射检测器漂移管温度85℃,雾化器温度36℃。通过该方法测定越冬期间皖茶91、乌牛早、平阳特早和龙井43叶片中果糖、葡萄糖和蔗糖的含量变化。结果表明,越冬期间3种可溶性糖含量的变化幅度一致:皖茶91龙井43平阳特早乌牛早。在茶树叶片中的含量均随着气温的降低呈现增长趋势,且具有较好的规律性。蔗糖作为茶树叶片中可溶性糖的主要成分,用HPLC-ELSD法可以方便、快速、准确的检测出来。因此低温胁迫下通过HPLC-ELSD法测定茶树叶片中蔗糖含量的变化,可作为鉴定茶树品种抗寒性的一种新方法。     

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 不同芽叶中β-半乳糖苷酶活性存在差异，嫩芽叶>老叶>嫩茎。芽叶中的β-半乳糖苷酶活性在摊放2h后上升到最高峰，为鲜叶酶活性的1.2倍；随着摊放时间的延长，酶活性又逐渐下降，8h后酶活性降至鲜叶酶活的85%。揉捻及发酵过程中β-半乳糖苷酶活性呈大幅度下降。微波杀青处理后，β-半乳糖苷酶快速失活，摊放冷却后没有复性。     

祁门红茶滋味品质评价模型的构建

为探究祁门红茶不同等级之间的差异，建立滋味品质评价模型，对6个不同等级祁门红茶（特茗、特级、二级、三级、五级和六级）的水浸出物含量、多酚类、氨基酸、咖啡碱、茶黄素类等品质相关化学成分进行测定，运用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析对其品质进行综合评价。结果表明：6个等级的祁门红茶茶多酚含量范围在11.60%～15.63%之间，咖啡碱含量在2.28%～3.45%之间，水浸出物含量在34.74%～41.97%之间，氨基酸含量在1.99%～2.72%之间，其中高等级茶样的茶多酚、咖啡碱、水浸出物、氨基酸含量高于低等级茶样。经分析发现，茶多酚、水浸出物、咖啡碱和茶黄素这4类化合物是评价祁门红茶等级的重要指标，利用主成分分析法建立滋味品质评价模型，评价结果与感官审评结果一致，研究结果可为祁门红茶品质的评价提供初步参考。     

外源硒对茶树叶片硒含量、抗氧化酶及光合色素的影响

本文以一年生‘舒茶早’和‘龙井43’盆栽扦插苗为材料，根际和叶面分别施入亚硒酸钠，测定不同叶位硒含量、抗氧化酶活性和叶片光合色素含量。结果表明：‘舒茶早’第1、2叶总硒含量根施比清水对照高5.2倍，叶施比对照高482倍；‘龙井43’根施比对照高13.68倍，叶施高706.5倍。总硒含量不同叶位差异显著，1—2叶>第3—4叶>第5—6叶>第7—8叶>第9—10叶。根施和叶施两种施硒方式均可提高茶树叶片中SOD、POD、CAT、APX活性。根际施硒后‘舒茶早’叶片叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量分别比清水对照高20.20%、17.73%、22.99%，叶施后高29.48%、29.78%、32.53%。‘龙井43’的叶绿素a，叶绿素b，类胡萝卜素含量根施分别比对照高1.18%、2.17%、0.86%，叶施比对照降低19.44%、19.15%、13.33%。