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1999年 6月中旬 ,我区二道江乡三道江村三组养奶牛专业户高××所养奶牛发生一起以高热、贫血、血红蛋白尿为特征的疾病。根据流行病学调查、临床症状、剖检变化和实验室检验 ,诊断为牛巴贝斯虫病。报告如下。1 发病情况及流行病学调查 该养奶牛专业户为新成立的专业户 ,共饲养奶牛 1 3头 ,其中成年母牛9头 ,犊牛 4头。平时以放牧为主 ,舍饲为辅。此次发病 ,具有明显症状的牛有 8头 ,均为成年母牛 ,发病率 61 .5% ,死亡 2头 ,死亡率 1 5.4%。2 症状 病牛精神沉郁 ,喜欢卧地。体温明显升高 ,达 40~ 42℃ ,呈稽留热型。心跳、呼吸加快。… 相似文献
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采用RT-PCR方法扩增出马动脉炎病毒核衣壳蛋白基因0RF7,并将其克隆到pMDl8-T载体,构建成重组质粒pMDl8-N,在上海生物工程公司测序。结果表明,所克隆的核衣壳蛋白基因序列与EAVNC-002532株的同源性为99%。表明0RF7是EAV基因组内的保守序列,将0RF7亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建成重组质粒pGEX-6P-N,用pGEX-6P-N转化表达菌株BL21(DE3),诱导表达后SDS-PAGE和Westernblotting分析表明,克隆在谷胱苷肽硫转移酶(GST)下游的核衣壳蛋白基因与GST获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-N分子质量约为40ku,为马动脉炎病毒病血清学诊断方法的建立奠定了基础。 相似文献
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应用反向遗传技术对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)LaSota株感染性克隆PBRN-FL质粒进行操作,构建插入欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)ORF5基因的重组质粒LaSota-ORF5并进行病毒拯救及鉴定。依据GenBank所发表的欧洲型PRRSV LV株ORF5序列,设计引物扩增ORF5片段,通过PBRN-FL质粒上P和M基因间的PmeⅠ酶切位点插入目的片段,构建重组质粒LaSota-ORF5。采用磷酸钙转染法将重组质粒和PCI-NP、PCI-P、PCI-L等3种辅助质粒共转染BSR-T7/5/细胞拯救病毒并对其分别进行RT-PCR、间接免疫荧光(IFA)和Western blot(WB)试验鉴定。结果显示:拯救病毒的RT-PCR产物测序结果正确,IFA出现绿色荧光,WB试验条带大小符合预期,证明GP5蛋白有效表达。结果表明:成功构建并拯救得到重组病毒rLaSota-GP5,为制备表达PRRSV GP5蛋白的重组NDV疫苗奠定基础。 相似文献
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H5亚型禽流感病毒HA基因在重组杆状病毒中的表达及检测 总被引:6,自引:3,他引:6
利用杆状病毒表达系统对H5亚型禽流感病毒HA基因在sf9细胞中的表达进行了研究。首先将pUCm—T—H5HA质粒用BamHⅠ及NotⅠ酶切,获得HA基因片段,同时杆状病毒转座载体质粒pFastBacⅠ也用BamHⅠ及NotⅠ酶切,然后用T4DNA连接酶连接,构建了重组质粒pFastBac—H5HA。再将该重组质粒转化DH10Bac感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid—H5HA。将Bacmid—H5HA转染sf9细胞,获得重组杆状病毒,经SDS—PAGE和Western blotting检测表明,HA蛋白在重组杆状病毒中获得表达。 相似文献
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广西独特的地理位置使得广西成为全国野生动物贸易的集散地之一。为了解广西野生动物的走私种类及其季节性变化,作者统计了广西2007~2008年已破获的非法利用和走私野生动物案件涉及的种类及其季节性变化。结果表明2007和2008年分别查获案件54起和61起。野生动物走私和非法案件中涉及种类共有71种,隶属15目33科,其中两栖类2种,占所有种数的2.8%;爬行类27种(蜥蜴类8种、龟鳖类5种、鳄类1种、蛇类13种),占38.0%;鸟类25种,占35.2%;哺乳类17种,占23.9%。2007和2008年查获的非法利用和走私野生动物分别是56种和32种,非法利用或走私的种类主要是珍稀濒危的种类,数量大,种类多。广西的野生动物走私和非法利用需要引起关注。 相似文献
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一株新城疫病毒弱毒株的分离鉴定 总被引:7,自引:0,他引:7
于1996年8月从长春地区--养鸡场分离到一株新城疫病毒,该毒株经过鸡胚传代培养,病毒形态学观察,血凝谱测定、鸡胚平均致死时间试验、鸡脑内致病指数试验、脉致病指数试验及1入毒试验等生物学特性结果表明该新城商株为弱毒株。 相似文献
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