花椰菜中器官早期发育调控相关的miRNA(Bra-miR07)的克隆及功能研究

在前期通过高通量小RNA测序获得若干在花椰菜器官早期发育过程中呈现差异表达的未知功能miRNA基础上,重点对其中1个在花椰菜下胚轴和子叶中表现为显著差异表达的miRNA(命名为Bra-miR07)进行克隆鉴定及功能分析。研究表明,Bra-miR07前体序列全长为270 bp,可形成稳定的二级发夹结构。Bra-miR07在花椰菜子叶中呈现显著高表达。进一步构建了Bra-miR07的过表达载体并采用浸花法转化拟南芥,获得Bra-miR07过表达的转基因拟南芥株系。表型分析显示,Bra-miR07过表达可显著影响拟南芥植株生长。与野生型相比,过表达Bra-miR07株系表现为生长缓慢,植株矮小,育性降低等发育受阻特征。因此,上述结果预示着Bra-miR07可能也在花椰菜器官发育过程中发挥重要作用。     

新疆土地资源可持续利用问题剖析及对策探讨

新疆土地资源丰富,发展潜力很大,发展优势很强,但也存在许多问题:绿洲面积小,利用结构不合理,耕地质量差,水土不平衡,利用程度低,退化严重,规划不完善等,根据新疆土地详查资料,基于土地资源利用的现状特点,主要剖析了新疆土地资源可持续利用的障碍因素,并在此基础上提出了实现土地资源可持续利用的主要对策.     

屏边大围山原鸡染色体核型分析

采用直接骨髓法制备云南屏边大围山原鸡染色体,并对其进行核型研究,结果表明,屏边大围山原鸡染色体数目2n=78, 前10对为大染色体,后29对为微小染色体,性染色体为ZZ(♂)／ZW(♀)型;根据前5对染色体相对长度、臂比值及着丝点指数的测量结果,各染色体的形态为：1号、2号和Z染色体为中央着丝粒（m）染色体,3号为端着丝粒（t）染色体,4号为亚中央着丝粒（sm）染色体。     

国有贫困林场脱贫发展规划问题初探

通过浙江省淳安县林业总场脱贫发展规划的实践,对编制国有贫困林场脱贫发展规划的重要性和必要性、指导思想、规划原则、建设重点、保障措施等几个问题进行了探讨。     

禽的甲型流感病毒感染

禽的甲型流感病毒感染已给世界的禽的养殖业带来了巨大的经济损失,目前,已经证实高致病性的禽流感病毒(H5、H7亚型)可直接感染人类,给人类的健康和公共卫生事业带来巨大的影响。流感病毒的发生与其形态、结构、病毒的生态学与流行特征、病毒的复制与致病力以及病毒的抗原性变异与进化有密切的关系。     

浅谈语文教师课堂提问的艺术

课堂提问是教师授课过程中普遍采用的一种方式、手段.课堂提问的问题要讲究发问方式,使问题提得巧,提得好,激发情趣,给学生带来思考的快乐,思维的提高.作为语文教师,要善于从教学的实际出发,随机而变,以"问"助"教",启迪学生的思维,获得最佳的教学效果.     

不同施氮量对旅游景观早熟禾生长的影响

在城市环境条件下,设置4个氮用量处理,研究施用氮肥对早熟禾生长的影响。结果表明:早熟禾株高B3和B4处理之间无显著差异,但均显著高于对照;观赏叶长度B3、B4处理均显著高于对照,B2处理与对照之间无显著差异;7—9月份B3和B4处理叶片宽度显著高于对照,B2处理仅7月份显著高于对照;施用氮肥可以较好的促进早熟禾叶绿素含量提高,其中B3和B4处理显著高于对照;施用氮肥还可以改变早熟禾植株含水量,但是各处理之间无显著差异。综合分析认为,氮肥施用量为41.90kg·hm-2为佳。     

毛果杨半胱氨酸蛋白酶基因PtCP2和PtCP4原核表达及蛋白纯化

【目的】对毛果杨半胱氨酸蛋白酶基因Pt CP_2和Pt CP4进行原核表达及重组蛋白纯化,为进一步研究该基因的酶学特征和生理功能打下基础。【方法】从毛果杨中克隆两个半胱氨酸蛋白酶基因Pt CP_2和Pt CP4,构建其原核表达载体p ET-30a-Pt CP_2及p ET-30a-Pt CP4,并在转入大肠杆菌后在体外诱导表达重组蛋白,采用包涵体洗涤法对目的蛋白进行纯化。【结果】Pt CP_2基因CDS序列全长1107 bp,编码368个氨基酸;Pt CP4基因CDS序列全长1104 bp,编码367个氨基酸。Pt CP_2和Pt CP4基因编码的蛋白均属于RD19A-like类型木瓜蛋白酶。Pt CP_2和Pt CP4基因在毛果杨根、茎、叶中均有表达,其中Pt CP_2在叶中表达量最高,Pt CP4在根中表达量最高。通过包涵体洗涤法在体外得到了高表达量、单一的重组蛋白Pt CP_2和Pt CP4,切除信号肽后蛋白酶大小分别为38.151和38.069 k D。【结论】原核表达获得的纯化重组蛋白Pt CP_2和Pt CP4可用于进一步研究毛果杨半胱氨酸蛋白酶的酶学特征和生理功能。     

95-1葡萄高产优质栽培技术

95 1葡萄是云和县 2 0 0 2年引进的新品种。在试种初期 ,改以往的棚式栽培为双十字“V”形栽培 ,用石灰氮破眠方法提高枝条萌芽率 ,缩短萌芽时期 ,取得较好效果 ,栽后第 2年每 6 6 7m2 产量达15 0 0kg。1　品种简介　　 95 1为巨峰芽变。果穗圆锥形 ,果粒紫黑色 ,穗重 4 0 0～ 5 0 0g。果粒圆形 ,粒重 12g,经膨大剂处理后粒重达 18g左右。果味甘甜多汁 ,含糖量 18%左右 ,风味好。中熟偏早 ,比巨峰早上市 1周左右。长势中等 ,枝条成熟早。平均每株结果 16穗 ,最多单株结果 2 5穗。果穗多数着生在结果枝的第 6节上。不易裂果。 3月上旬萌芽…     

利用ISSR与SRAP分子标记分析金线莲种质资源遗传多样性

  目的  研究浙江与福建等地引种、杂交与野生的金线莲Anoectochilus roxburghii样品间遗传多样性和亲缘关系,为金线莲种质资源鉴定及优良新品种(系)选育提供科学依据。  方法  以48份新鲜金线莲叶片为材料,分别采用简单重复序列扩增多态性(ISSR)与序列相关扩增多态性(SRAP)分子标记技术,各挑选11条(对)多态性好、扩增条带清晰的引物。经琼脂糖凝胶电泳成像后,统计其扩增条带数,运用NTSYS-PC 2.1和POPGENE 32软件进行非加权组平均法(UPGMA)聚类分析。  结果  ISSR分子标记技术共扩增出86条条带,其中多态性条带84条,多态位点百分率为97.67%;SRAP分子标记技术共扩增出88条条带,其中多态性条带86条,多态位点百分率为97.73%,ISSR和SRAP标记均表现出较高的多态性。不同样本间的遗传距离和遗传一致度表明:浙江省与福建省的金线莲种质混杂严重,而遗传多样性结果显示:福建省的金线莲种群遗传多样性更高。此外,基于ISSR和SRAP标记的UPGMA聚类结果显示:48份不同种源的金线莲依亲缘关系的远近可分为四大类,聚类的划分受到一定地域性的影响,但各地域的金线莲品种在这四大类中均互有混杂。  结论  金线莲在物种水平上遗传多样性较高,在各地区、各品种(系)间遗传交流频繁,ISSR与SRAP分子标记技术可以从分子水平上揭示浙江与福建等地金线莲的遗传多样性,且结合ISSR标记与SRAP标记的分析结果要优于单一的分子标记结果。图4表3参24