草莓psy、pds和zds基因克隆及植物表达载体的构建

设计特异引物,分别克隆草莓类胡萝卜素合成关键基因psy、pds和zds开放阅读框,将psy和pds基因开放阅读框分别插入植物表达载体pBI121的CaMV 35S启动子和Nos终止子之间,构建了植物表达载体pBI121psy和pBI121pds.将psy和zds基因开放阅读框分别插入植物表达载体pCAMBIA1301的CaMV 35S启动子和Nos终止子之间,构建植物表达载体pCAMBIA1301psy和pCAMBIA1301zds.将带有完整启动子和终止子的pds基因引入pCAMBIA1301psy中,最终获得psy和pds的双价植物表达载体pCAMBIA1301psy-pds.经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定后,成功将pBI121psy、pBI121pds、pCAMBIA1301psy、pCAMBIA1301zds和pCAMBIA1301psy-pds 5个重组表达质粒导入农杆菌EHA105中.该研究结果为进一步研究草莓psy、pds和zds基因的功能奠定基础.     

一例犬细小病毒病的诊治及分析

正犬细小病毒是一种具有高度接触性感染的烈性传染病,病床以急性出血性肠炎和心肌炎为特征,死亡率和感染率都较高,一经流行则大批感染,顺速蔓延。犬细小病毒病是危害我国养犬业最为严重的传染病之一,可造成严重的经济损失。1案例3月25日上午,本诊所接收一只病犬。据犬主人描述说,此犬约3月龄,是松狮犬,犬主人发现犬精神不佳且     

茄子不同阶段花朵植物激素QQQ LC-MS质谱联用分析

为阐明茄子不同花期花朵植物激素含量的变化,采用超高效液相色谱-质谱(QQQ LC-MS)联用技术对植物激素进行分析鉴定。ABA在开花前期含量较高,随着开花期的临近开始降低,尤其是开花当天含量极低,且此后不再增加。IAA、iPR、iP、t Z、tzR、cz R等6种激素在开花前后均有增有减,其中,iPR和iP在开花前含量较少,但两种激素均在开花当天含量骤增,且其含量水平远高于其他激素含量,而在花后又骤减。结果表明：ABA在茄子开花过程中起到负调控的作用,其通过在开花时含量降低来调控下游促进植株衰老进程的基因表达降低,以此来降低植株落花的风险。其余6种激素(IAA, iPR, iP, tZ, tzR, czR)在茄子开花过程中起到正调控的作用,均是在开花时含量增加,以此来调控下游基因出现较高表达,从而达到促进植株开花的目的。     

黄秋葵实时荧光定量PCR内参基因的克隆与筛选评价

为筛选黄秋葵实时荧光定量PCR的稳定内参基因,本研究以绿白1号为试验材料,根据黄秋葵RNA-seq数据库,筛选并验证获得18SrRNA、ACT、EF-1α、TUA、TUB、GAPDH等6个内参基因ORF序列;以黄秋葵不同组织、不同发育时期果实、不同发育时期叶片和低温、高温、干旱胁迫处理的叶片为材料,利用实时荧光定量PCR技术分析测定基因表达量,并结合GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件评价6个内参基因的稳定性。结果表明,6个基因在不同组织、各发育阶段及不同胁迫下均有表达,但表达稳定性不尽相同,其中,EF-1α在黄秋葵果荚发育、高温胁迫下表达稳定性最好;18SrRNA在黄秋葵各组织、叶发育和干旱胁迫下表达稳定性最优;ACT在低温胁迫下表现最稳定。此外,在29个处理中,18SrRNA、EF-1α、ACT表达均较稳定,可以用于荧光定量表达分析。本研究结果为黄秋葵基因功能分析和调控机理研究提供了基础。     

丝瓜18S rRNA基因克隆及其作为内参基因的应用

选择合适的内参基因是提高实时荧光定量PCR分析(q RT-PCR)准确性的重要条件。18S r RNA基因表达范围广、表达量恒定,常作为内参基因应用于实时荧光定量PCR中。为了获得丝瓜18S r RNA基因,并设计合适的荧光定量PCR内参引物,解决丝瓜实时荧光定量PCR检测中无内参基因的现状,通过PCR和序列测定,首次克隆到了丝瓜的18S r RNA基因序列,其长度为1 862 bp,Gen Bank登录号为KM656452。在此基础上设计1对荧光定量PCR引物,该引物特异性强,扩增效率高,在丝瓜各生长发育阶段及各种非生物胁迫条件下均能稳定表达,适合在丝瓜基因表达研究中作为内参基因。该研究结果可为开展丝瓜重要功能基因的表达模式和调控机制的研究奠定基础。     

不同来源苦瓜遗传亲缘关系RAPD分析

利用12个随机引物对24份苦瓜材料进行RAPD分析,共扩增出的79条谱带,有56条为多态性带,比例为70.89%;聚类分析结果,在遗传距离为0.343时,供试的24份苦瓜材料可聚成三大类群.     

有机肥施用对土壤养分和重金属含量的影响

为了研究有机肥的施用对三峡库区土壤养分和重金属含量变化的影响,试验通过施用牛粪有机肥种植牧草,重点研究有机肥施肥量对土壤质量和安全的影响。结果表明:土壤中氮、磷和钾含量随着有机肥施用量的增加而升高,与施用化肥相比,施用有机肥后土壤氮含量增幅较大;土壤中铜、锌、铅、镉、砷含量随着有机肥施用量的增加而升高,但符合《GB 15618—1995土壤环境质量标准》的要求。说明施用有机肥可以提高土壤养分含量,未造成土壤重金属污染;但施用的长期影响需要进一步研究。     

覆盖材料和厚度对堆存牛粪氨气和温室气体排放的影响

为了研究锯末和稻草2种材料覆盖以及不同厚度的锯末覆盖对牛粪堆存过程中氨气(NH3)和温室气体(N2O、CH4和CO2)排放量的影响,采用静态箱的方法测试了不同覆盖厚度(1、3和5 cm)和2种材料(锯末和稻草)覆盖下牛粪NH3、N2O、CH4和CO2排放量。结果表明,在不同厚度锯末覆盖的试验中,与不覆盖处理组相比,覆盖降低了牛粪NH3和CO2累积排放量,但覆盖显著增加了牛粪N2O和CH4累积排放量(P0.05);3个覆盖处理组内,NH3、N2O和CO2排放量随着覆盖厚度的增加而下降,然而,CH4排放量随着覆盖厚度的增加而升高;1、3和5 cm厚锯末覆盖的牛粪总温室气体排放量分别为108.61、103.57和101.36 g/kg,与1 cm锯末覆盖相比,3和5 cm厚锯末覆盖的牛粪总温室气体排放量显著降低(P0.05)。在相同质量的锯末(2 cm厚)和稻草(6 cm厚)2种材料覆盖的比较试验中,2种材料覆盖都显著降低了牛粪NH3和CO2的累积排放量(P0.05),但同时也显著增加了CH4的累积排放量(P0.05);锯末覆盖增加了牛粪N2O累积排放量(P0.05),而稻草覆盖则降低了牛粪N2O累积排放量(P0.05)。与锯末覆盖相比,稻草覆盖显著增加了CH4的累积排放量(P0.05),但同时显著降低了牛粪CO2的累积排放量(P0.05);锯末覆盖和稻草覆盖牛粪总温室气体排放量分别为101.51和109.46 g/kg,与锯末覆盖相比,稻草覆盖显著增加了牛粪总的温室气体排放量。试验结果表明,较厚的锯末(3和5 cm)覆盖对牛粪NH3和温室气体的减排效果更好。     

覆盖及堆积高度对肉牛粪便温室气体排放的影响

为了研究覆盖对不同堆积高度肉牛固体粪便温室气体（N2O、CH4和 CO2）排放量的影响,试验采用静态箱的方法研究了20和40 cm堆积高度时覆盖或者不覆盖情况下肉牛粪便温室气体的排放量。结果表明,堆积40 cm的牛粪CH4的累积排放量显著高于20 cm处理,而N2O和CO2累积排放量显著降低。覆盖显著增加了牛粪N2O的排放量和40 cm高度牛粪的CH4排放量,降低了40 cm高度牛粪CO2的排放量,而对20 cm高度牛粪CH4和CO2排放无显著影响。根据CH4和N2O在100 a 尺度上相对CO2的全球增温潜势计算出综合温室效应,无覆盖处理的20和40 cm牛粪的综合温室效应分别为(101.07±6.28）和(94.67±3.29)g/kg,覆盖处理的20和40 cm牛粪的综合温室效应分别为(104.20±6.78)和(103.43±3.21)g/kg,堆积高度为40 cm且无覆盖的综合温室效应最小。     

猪舍氨气排放预测模型的研究现状

该文就氨气对环境的影响和猪舍氨气排放机制进行了简要的叙述，详细综述了氨气排放的机理模型和基于不同因素建立的经验模型。从中可以看出，国外对氨气排放的模型做了大量的研究，也取得了一定的研究成果，但是不同的研究结果有一定的差异。最后针对我国的实际情况，对我国氨气排放需进一步研究的问题进行了探讨。