新城疫病毒疫苗株F蛋白裂解位点改造对诱导HepG2细胞发生自噬的影响

新城疫病毒(NDV)通过启动不依赖p53的内源性凋亡通路特异性诱导肿瘤细胞凋亡.最新研究表明NDV可以引起U251肿瘤细胞发生自噬,并在后期导致细胞凋亡,但其机理尚不清楚.本研究通过反向遗传操作技术对NDV Clone30疫苗株F蛋白的碱性裂解位点进行突变,将F蛋白的裂解位点由弱毒株的GGRQGR ↓ L突变为强毒株的GRRQRR ↓ F基序,并成功拯救出突变改造病毒rC30-FmF.分别将Clone30野生型病毒株rC30-wt与rC30-FmF感染HepG2肝癌细胞,通过透射电镜检测细胞超微结构显示,rC30-FmF感染4h后细胞内出现大量自噬小体及自噬溶酶体.通过westem blot检测自噬标志蛋白LC-3 Ⅱ表明,rC30-FmF感染4h后LC3Ⅱ表达量显著上调,与rC30-wt对照组相比差异极显著(p＜0.01).研究表明,rC30-FmF可以在感染早期增加HepG2细胞自噬程度.从而初步证明F蛋白的裂解位点在诱导HepG2细胞自噬过程中具有关键作用.     

实时荧光定量PCR检测鸭疫里默氏杆菌方法的建立和应用

根据我们实验室发现的鸭疫里默氏杆菌（RA）荚膜多糖蛋白基因序列（DQ151838）,设计和合成荧光定量PCR引物和探针,建立了检测RA的实时荧光定量PCR方法。该法的表达式Y=-3.416X＋39.492,相关系数1.000,PCR循环效率96.2%,DNA拷贝数在10^0～10^8范围内检测曲线有良好的线性关系。该法的最适Mg^2＋、引物和探针浓度分别为4～5mmol/L、0.16～0.2μmol/L和0.16μmol/L,最低能够检测到RA的DNA模板为2.0copies/μL。1/10半数致死量的RA人工皮下注射感染7日龄樱桃谷鸭后2h即可在心、肝、肺、胸腺、食管中检测到RA核酸;感染后8h即可在心、肝、脾、肺、肾、脑、胰、食管、气管、胸腺、法氏囊、十二指肠、直肠、血液和咽喉拭子检测到RA核酸,36～120h是RA在感染雏鸭除了咽喉、食管和气管各个组织器官繁殖数量最高峰期,其后逐渐下降。RA人工感染致死雏鸭的心、肝、脑RA分离和FQ-PCR检测符合率为100%。对临床送检具有典型鸭疫里默氏杆菌病临床症状和病理变化的死亡雏鸭的肝脏、心血和脑组织的FQ-PCR检测的阳性率均为100%,而RA分离的阳性率分别只有74.3%（26/35）、82.9%（29/35）和91.4%（32/35）。FQ-PCR可用于鸭疫里默氏杆菌感染的快速诊断、流行病学调查和鸭产品的检疫等。     

奶山羊传染性角膜炎的诊疗

于１９９７～１９９９年的７～９月份在东宁县不同区域的养殖羊户发生奶山羊传染性眼角膜炎,发病率占羊群总数的２０％～５０％。１临床症状潜伏期２～５ｄ,患羊不断闭眼,一般是单侧性发病。后期严重时两侧都发病。初期一侧闭眼、羞明、怕光、流泪、眼睑红肿、血管充血、结膜潮红,２～３ｄ后,眼分泌物增多、变成浓性眼眵,角膜混浊．继而形成较少的白臀;如不及时治疗,而继续发展则会失明,跟不上羊群,影响采食和休息,逐渐消瘦,影响产奶量。２治疗初期用３％硼酸水溶液洗患眼或用生理盐水２０ｍｌ,青霉素８０万单位冲洗或点眼;然…     

食源性寄生虫的风险评估

风险(risk)是由一种或多种危害因子而引发危害事件的一种可能性或概率。危害因子可能属于物理的、化学的、微生物的范畴,病原微生物中的细菌、病毒、寄生虫等都可成为引发危害事件的风险因子。评估某一因子是否对人或其他生物构成威胁以及所危害的程度显得至关重要。事实上,存在于环境中的危险因子及其多种可能的传播途径都会引发多种危害性事件。因此,要想充分了解并揭示由危害因子引发危害的概率,以及其随后对人类健康造成的危害并非易事。风险评估则是对不良结果或不期望事件发生几率进行描述及定量的系统过程,现已被视为一种用于揭示存在于环境中的各种危害及其对人类健康造成的影响的方法。论文主要对食源性寄生虫风险评估的方法进行全面阐述。     

A型流感病毒跨种传播和致病性相关蛋白研究进展

A型流感病毒是重要的人和动物病原体,每年都会在人群中引发季节性流感流行,偶尔还会引发全球流感大流行,对公共卫生安全构成严重威胁.研究发现,A型流感病毒的跨种传播与该病毒的多个蛋白有关,其中血凝素是该病毒宿主范围的主要限制因素,但聚合酶蛋白和非结构蛋白1(NS1)的作用也不容忽视.A型流感病毒通过不断地适应各类宿主和长期...     

畜禽养殖中的环境污染及治理对策

随着我国畜禽养殖业的快速发展,其引起的生态环境问题也日益突出。强化畜禽养殖污染综合治理工作,降低其对生态环境的影响,对保障畜牧业可持续健康发展至关重要。本文分析了我国畜禽养殖中的环境污染现状与污染原因,并提出了一系列治理措施,对降低畜禽养殖中的环境污染具有一定的参考价值。     

用分类法治疗奶牛产后瘫痪

<正> 过去在临床治疗中,因钙缺乏引起的奶牛产后瘫痪病例居多,往往忽视牛发生产后瘫痪的其他因素,常采用单纯的钙疗法。这样有时会贻误病情,延缓疗程,拖跨了患牛,最后淘汰或以病牛死亡而告终。笔者经过多年的临床实践,对奶牛后产瘫痪病采用分类方法进行治疗,提高了治愈率,取得比较满意的效果,现介绍如下。奶年产后瘫痪的分类根据奶牛生产后瘫痪的原因和症状,将其分为单纯型瘫痪和混合型瘫痪。单纯型瘫痪分为单纯缺钙型瘫痪、单纯缺磷型瘫痪和单纯酮症型瘫痪;而混合型瘫痪分为酮钙型和钙磷型瘫痪。病例介绍单纯缺钙型瘫痪此型居临床发病首位,根据发病原因和临床症状检查基本可以确诊,但病程较长者,需进行实验室血钙检查。疗程一般在3～18天内。本型共收治65例,治愈率95%。病例:双城市双城镇新利村王某饲养的1头中国荷斯坦奶牛,于产后33天发生瘫痪,临床检查可见体温正常,心跳118次/分钟,呼吸46次/分钟,结膜发绀,胃蠕动音消失,肠音极弱,不能     

陕西省绥德县规模养猪场动物疫病防疫现状调查及对策

通过对陕西省绥德县100头以上规模养猪场场址、生物安全、防疫制度、免疫病种等动物疫病防控现状的调查,结合生产实际,为今后养猪业发展提出了规范化管理建议。