猪核转录因子C/EBPβ真核表达载体的构建及表达

通过构建猪核转录因子C/EBPβ编码区真核表达体pEGFP-N1-C/EBPβ,将猪C/EBPβ异位表达于小鼠成肌细胞C2C12细胞中,为进一步研究C/EBPβ在猪脂肪发育中的调控机制奠定基础。本试验利用RT-PCR扩增C/EBPβ编码区序列并测序,提交GenBank;并将其克隆至真核表达载体pEGFP-N1,通过双酶切和测序鉴定重组质粒。将重组表达体pEGFP-N1-C/EBPβ导入C2C12细胞,荧光显微镜下观察C/EBPβ在细胞中的定位,半定量RT-PCR和Western blot检测C/EBPβ在细胞中的表达情况。本试验成功克隆测序了猪C/EBPβ基因编码区序列,并首次上传到GenBank;成功构建猪C/EBPβ真核表达体pEGFP-N1-C/EBPβ,并将其异位表达。结果表明:猪C/EBPβ在脂肪组织中表达量丰富,心肌和背最长肌表达微量,并且正确插入真核表达载体pEGFP-N1,荧光显微镜下观察重组体组主要集中在细胞核;而C/EBPβ基因和蛋白在转染重组体C2C12细胞中均有表达。本研究为提高猪肉肌内脂肪含量方面的研究提供新的思路。     

辽宁种猪H-FABP和A-FABP基因位点多态性研究

目的:检测辽宁种猪H-FABP和A-FABP基因位点多态性。方法:采用PCR-RFLP技术。结果:4个猪种H-FABP基因HinfI和HaeⅢ点酶切位点上都显示多态性,优势基因型分别为HH和dd型,荷包猪H-FABP基因5′上游区和第二内含子多态性分析的结果显示H和d基因的频率较高;4个猪种A-FABP基因内含子IBsmI位点进行PCR-RFLP均检测到3种基因型,在地方猪种东北荷包猪中,等位基因A为优势基因,在国外引进猪种大白,长白,杜洛克猪中,等位基因B为优势基因。结论:荷包猪具有高肌内脂肪含量,我国地方猪种肉质优于引入品种。     

牛瘤胃产蛋氨酸热带假丝酵母菌的分离鉴定及发酵条件优化

试验旨在从牛瘤胃微生物中筛选出能够合成并分泌蛋氨酸的菌株.试验以草原红牛瘤胃液为样品,使用蛋氨酸缺陷培养基分离纯化,通过革兰氏染色、游离蛋氨酸含量测定、16S rDNA测序等鉴定菌株.采用单因素设计和正交试验对培养基和发酵条件进行优化,通过体外模拟瘤胃发酵试验测试菌株.结果 显示,分离的菌株为热带假丝酵母菌(Candi...     

大骨鸡和AA+肉鸡骨骼性状差异及BMP2 mRNA表达研究

为研究大骨鸡和AA+肉鸡的骨骼性状差异以及骨形态发生蛋白2(BMP2)mRNA的表达与骨骼性状的相关性，选取大骨鸡和AA+肉鸡1日龄公雏鸡进行舍饲笼养，在0～7周龄(w)随机挑选大骨鸡和AA+肉鸡各5只，在8～24 w随机挑选大骨鸡5只，限饲12 h后进行屠宰。屠宰后对其股骨、胫骨和跖骨的重量、长度和强度进行测定，并采用实时荧光定量PCR方法检测胫骨组织中BMP2 mRNA相对表达量。结果显示：0～24 w大骨鸡和0～7 w AA+肉鸡的股骨、胫骨及跖骨的重量、长度和强度均呈现相似但不同的生长趋势和回归公式。按体重相近原则，建立了0～24 w大骨鸡和0～7 w AA+肉鸡周龄配对表。大多数配对周龄中，大骨鸡各骨骼重量、长度和强度均极显著高于AA+肉鸡(P<0.01)。大骨鸡和AA+肉鸡胫骨组织BMP2基因相对表达量与骨骼性状均呈现极显著正相关(P<0.01)。4～7 w AA+肉鸡BMP2 mRNA相对表达量均极显著高于大骨鸡(P<0.01)。提示：BMP2可能是影响鸡骨骼生长的重要功能基因。