毛竹枯梢病拮抗细菌巨大芽孢杆菌6-59菌株的产芽孢条件优化

为了提高芽孢的形成率,采用单因素和正交试验设计,通过摇瓶培养对毛竹枯梢病拮抗细菌巨大芽孢杆菌6-59菌株芽孢形成的发酵培养基和培养条件进行优化。结果表明:优化后的培养基配方为:玉米粉1.0%、大豆蛋白胨1.0%、CaCl2·2H2O0.1%、MnSO4·H2O0.05%;适宜培养条件是:种龄20h、接种量8%、培养基初始pH为6.0、装液量30mL/250mL、培养温度30℃、摇床转速200r/min。在此优化条件下,6-59菌株发酵液中的芽孢数量为2×109个/mL,芽孢形成率达96.4%。     

棉花黄萎病生防芽孢杆菌 Z-5 菌株发酵培养基的优 化简

 在农用微生物菌剂中芽孢杆菌菌剂产品多采用芽孢作为有效成分,因此产芽孢条件的优化对棉花黄萎病生防细菌的工业生产有着重要意义。本文通过单因素试验分析了8种碳源、8种氮源和6种无机盐对Bacillus malacitensis Z-5菌株芽孢产量的影响,采用Plackett-Burman试验设计确定了影响芽孢产量的主要因素,用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法确定主要影响因素的最佳条件。结果表明,单因素试验筛选出3种碳源（玉米粉、麸皮、葡萄糖）、3种氮源（豆饼粉、花生饼粉、酵母粉）和2种无机盐（MnSO₄·H₂O、CaCl₂）;Plackett-Burman试验确定Z-5菌株生产芽孢最适碳源、无机盐和氮源分别为玉米粉、MnSO₄·H₂O和豆饼粉,最陡爬坡路径法获得此3种因子的最适浓度范围为：玉米粉1.0%~2.0%、MnSO4·H2O 0.05%~0.09%、豆饼粉为1.0%~2.0%。响应面法得到芽孢产量与玉米粉、MnSO4·H2O和豆饼粉含量的回归方程。最终确定优化培养基组合为玉米粉1.66%、豆饼粉1.30%、MnSO₄·H₂O 0.07%、NaH₂PO₄·2H₂O 0.2%、Na₂HPO₄·2H₂O 0.4%,优化后芽孢产量达到1.9⁷×10⁹ mL^-1,与理论值基本相符。     

棉籽饼粉脱毒饲料的制备及其应用效果初探

本试验通过制备棉籽饼粉脱毒饲料产品,采用感官鉴定法观察其物理性状,采用国标法测定其棉酚含量,采用凯氏定氮法测定其粗蛋白质含量,并通过肉鸭饲喂试验探讨其在肉鸭饲养过程中的应用效果.结果表明,脱毒后的棉籽饼粉中棉酚残存量不足10 mg/kg,与原始饼粕相比,粗蛋白质含量提高了4.35%,其颜色明显变浅,饼粕质地松软,硬度小,无硬块,无异臭,符合安全标准.经肉鸭饲喂试验发现,与对照组肉鸭相比,用制备的棉籽饼粉脱毒饲料代替常规饲料饲喂肉鸭其生长发育、器官发育、血液指标、饲料中营养成分利用情况均未发现异常,未发现棉酚中毒现象,说明脱毒后的棉籽饼粉饲料中棉酚含量符合饲用安全标准,达到脱毒目的.     

白菜黑斑病菌拮抗细菌LBC-2的筛选鉴定、发酵条件优化及田间防效

采用对峙法筛选得到一株对白菜黑斑病菌Alternaria brassicae具有强烈拮抗作用并具有较广抗菌谱的细菌LBC-2。本试验利用对峙法初筛得到具有拮抗作用的菌株20株,复筛得到1株拮抗活性较高的菌株。通过菌体形态和菌落特征观察、生理生化试验和16S r RNA序列同源性分析,鉴定该菌为甲基营养型芽孢杆菌Bacillus methylotrophicus。该菌的最适培养基组成为20 g/L蔗糖、30 g/L黄豆饼粉、0.5 g/L Ca Cl2、0.1 g/L Zn Cl2。最适培养温度37℃、最适培养p H值为7.5、最适培养转速为220 r/min、最适培养时间为40 h。并在此基础上进行了田间防治试验,细菌LBC-2菌剂的病指防效达到79.08%,对白菜黑斑病具有一定的防治作用。     

产乳酸芽孢杆菌RS-1菌株的分离及鉴定

为了得到可以产乳酸的芽孢杆菌,通过加热富集培养及特异性MRS培养基结合溶钙圈的方法,从发酵制品、土样及腐烂水果等样品中分离纯化出15株具有产乳酸能力的芽孢杆菌。将这些菌株进行纯化培养,利用纸层析法和EDTA定钙法进行定性和定量研究,筛选出1株产乳酸能力较高的菌株,命名为RS-1。并对其进行形态鉴定,生理生化鉴定及16S rDNA全序列分析,最终鉴定此菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

Z-27菌剂对猪舍有害气体排放及育肥猪生长性能的影响

为探索Z-27菌剂的饲喂效果,研究了其对猪舍空气中NH_3、H_2S减排及对育肥猪生长性能的影响。选取400头50 kg左右健康杜×长×白三元杂交育肥猪,随机平均分为对照组和试验组,每组1栋猪舍,每栋20栏,每栏10头猪。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0. 1%的Z-27菌剂。试验共15 d,期间检测猪舍空气中NH_3、H_2S的含量及细菌总数、大肠杆菌数量,测定猪粪、尿的pH值,检测猪粪尿混合物中NH_3、H_2S的48 h排放量;观察每组腹泻情况,计算腹泻率;每组分出3栏(30头)分别于试验开始和结束时空腹12 h称体质量,并结算剩余料,计算均增质量和料重比。结果显示,与对照组相比,试验组猪舍空气中NH_3、H_2S含量分别下降了63. 27%(P 0. 01)、54. 61%(P 0. 01),细菌总数、大肠杆菌总数分别下降了46. 68%(P 0. 01)、59. 89%(P 0. 01);猪粪的pH值降低0. 54 (P 0. 05),猪尿的pH值降低0. 86 (P 0. 05);猪粪尿混合物中NH_3、H_2S的48 h释放量分别下降32. 76%(P 0. 05)、35. 69%(P 0. 05);试验组均增质量提高了10. 38%(P 0. 05),料重比降低9. 05%(P 0. 05),腹泻率降低了60. 06%(P 0. 01)。可见,Z-27菌剂具有净化猪舍内空气环境、提高育肥猪的生长性能、防治腹泻的作用。     

枯草芽孢杆菌JA-14菌剂对肉鸡粪便中氨气释放量的影响

为了降低肉鸡粪便中氨气的释放量,净化鸡舍内环境,提高肉鸡的生产性能,向肉鸡基础日粮中添加枯草芽孢杆菌JA-14菌剂(基础日粮组为对照组),采用纳氏比色法测定肉鸡粪便中氨气的释放量,并测定粪便的蛋白酶活力、总氮和氨态氮含量、pH值及水分含量。结果显示,与对照组相比,添加JA-14菌剂组粪便中氨气释放量下降了24.88%,蛋白酶活力提高了23.25%,总氮和氨态氮含量分别下降了35.72%和63.80%,pH值和含水量分别下降了6.31%和25.66%。可见,枯草芽孢杆菌微生态制剂能够提高肉鸡肠道蛋白酶活力、减少氨气排放量。     

特异腐质霉来源漆酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,在有机农药残留和木质素的降解方面具有潜在的工业价值。从特异腐质霉Y1(Humicola insolens Y1)中分离到了漆酶基因Lac1,其全长1 803 bp,编码600个氨基酸,与NCBI蛋白数据库比对结果表明,与来源于Chaetomium globosum CBS 148.51(XP_001228806)的多酚氧化酶序列相似性最高为71%,表明是一个新的漆酶基因。将其克隆入毕赤酵母表达载体pPIC9r中,通过PCR和SDS-PAGE检测证实基因已经整合入酵母基因组中且能分泌表达。在3 L发酵罐中,重组Lac1蛋白表达量达到3.79mg/mL发酵液,酶活性达到1.3 U/mL发酵液。酶学性质分析结果显示,漆酶的最适作用温度为65℃,最适反应pH为4.5,且在pH 6～11的范围内酶的相对活力均在70%以上。     

枯草芽胞杆菌MG-4抑制小麦全蚀病菌物质及其性质分析

为明确本实验室筛选并鉴定的枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis菌株MG-4分泌物对小麦全蚀病菌的抑制作用及其性质,采用生长速率法检测了菌株MG-4发酵无菌上清液(cell-free supernatant,CFS)中抑菌物质的稳定性,并通过PCR扩增抑菌物质合成相关基因,利用基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定抑菌物质结构。结果表明,菌株MG-4分泌的抑菌物质在中性及酸性条件下稳定,在pH 2~7时CFS相对活性为98.8%~100.0%;热稳定性强,100℃处理30 min后相对活性仍为88.5%;利用胃蛋白酶和胰蛋白酶处理120 min后相对活性为98.8%;CFS中抑菌物质不能被氯仿、乙醚和乙酸乙酯萃取,且对这3种有机溶剂不敏感;Na~+、K~+、CO_3~(2-)和I~-对CFS活性无影响,Mg~(2+)、Ca~(2+)、NO_3~-、SO_4~(2-)、H_2PO_4~(2-)和Mn~(2+)显著抑制CFS活性。菌株MG-4基因组中含有srfAB、yndJ、bamC、fenD、ituC和ituD共6种抑菌物质合成基因;将菌株MG-4分泌的抑菌物质鉴定为C14~C15伊枯草菌素A、C14~C18芬荠素A和C14~C17芬荠素B。     

牛源肠道益生菌的筛选与3株芽孢杆菌益生菌株的鉴定

[目的]从健康牛的粪便中筛选出对大肠杆菌（Escherichia coli）有较强抑制作用的芽孢杆菌,并对其进行鉴定。[方法]以大肠杆菌为指示菌进行初筛和复筛,采用SPSS软件对复筛结果进行显著性分析,以选择抑制大肠杆菌活性较强的菌株,经过形态观察、生理生化试验和16S rDNA全序列分析鉴定其种属：采用稀释活菌计数法测绘这些菌株的生长曲线,利用SPSS软件结合修正的Gompertz方程和Logistic方程对生长曲线进行拟合,以获得这些菌株的生长动力学参数。[结果]经过鉴定,筛选得到的对大肠杆菌有较强抑制作用的3株牛源芽孢杆菌均属于解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）;采用SPS软件拟合得到的生长曲线的相关系数（R）在0．985以上。[结论]筛选并鉴定了3株牛源肠道益生菌;采用SPSS软件可以较准确地预测这些菌株的生长动力学参数。