腺胃病变型鸡传染性支气管炎的诊断研究

１９９５年以来在江苏一些市县养鸡场和养鸡专业户蛋鸡群流行以生长阻滞,剖检表现为腺胃显著肿大为特征的一种原因不明的“鸡传染性腺胃病“。通过病原分离、鉴定,血清学检测,病原免疫原基因分离、鉴定,病料组织核酸点杂交等方面诊断研究,证明本病是一种新近报道的腺胃病变型为特征的禽传染性支气管炎。     

产肠毒素大肠杆菌感染的分子致病机制

产肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC）是发展中国家人群腹泻的主要原因,一直是西方国家旅行者腹泻的最常见病因,也是引起动物（尤其是幼龄动物）腹泻的主要病原菌。根据ETEC产生热敏和（或）热稳定肠毒素特性可以将其分类成不同致病型。针对这类重要病原体的疫苗研发目前仍然面临着艰难的挑战。本文综述了病原体-宿主相互作用的分子机制,从基因组学和蛋白质组学两方面介绍致病菌的多种毒力因子以及作为靶标研发疫苗的潜力,分析了病原与不同宿主易感性的差异,为针对ETEC新型疫苗的研发和有效预防ETEC感染提供理论依据。     

H_(91-1)、Y_(81)G_4和AV_(-127)三株EDS_(79)病毒血凝特性的研究

H_(91-1)、Y_(81)G_4和标淮株AV-127三株EDS_(-76)病毒在4℃、22℃和37℃下均能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞,并具有很高的凝集滴度;不能凝集人、兔、绵羊等多种哺乳动物的红细胞。血凝的适宜pH值为6.8～7.4.红细胞最佳浓度为0.75～1.00％。稀释液最佳浓度为0.01M。血凝活性可耐56℃ 2小时、0.3％甲醛溶液、0.5％胰蛋白酶。血凝素受体对脂溶剂、胰蛋白酶不敏感。     

鹅疫防治的探讨

由于本病常是突然发生，病程短，发病率和死亡率高，称为“鹅疫”；患鹅常呈头颈肿，称之“鹅肿头病”；也因患鹅眼睛严重潮红，电称之“鹅红眼病”；又因患鹅眼睛和鼻腔流血，也称之“鹅出血症”。由于生物学特性的变化，不同类型的毒株并发感染、环境应激以及禽的年龄、性别和种类及品种等许多因素可以影响感染后的后果。在禽类中水禽常被认为是病毒的携带者，不表现其致病性。但一些资料记载表明，有些类型能引起水禽致病，对养鹅业有很大的危害。     

禽类免疫系统的结构与功能

禽类免疫系统知识大多来自对鸡的研究.鸡和哺乳动物的免疫机制存在许多相似之处,但两者也存在重要的差异性.禽类受到抗原刺激产生抗体和细胞免疫应答,主要有三类抗体:IgM、IgG(亦称IgY)、和IgA,通过基因转换获得抗体多样性.T淋巴细胞是细胞免疫的主要效应细胞,禽类T细胞有两种不同的分化途径即α/β和γ/β.类似于哺乳动物T细胞受体机制,通过结合和连接机制产生禽类T细胞多样性.同哺乳动物T细胞一样,禽类T细胞参与MHC限制的辅助细胞和细胞毒性细胞功能.天然效应细胞由自然杀伤细胞(NK细胞)和抗体依赖细胞的细胞毒性作用(ADCC)介导.近来,禽类一些细胞因子得到克隆和表达,许多病毒引起鸡免疫抑制.目前我们感兴趣的是如何了解免疫抑制的机制以及采取何种策略增强商业鸡群的免疫应答能力.     

肠炎沙门氏菌SEF14菌毛研究进展

1 SEF14菌毛的发现 Feutrier等1986年首次在临床分离的一株人源肠炎沙门氏菌中发现一种菌毛(后来被称为SEF14菌毛),具有甘露糖敏感血凝反应(MSHA),形态上与肠杆菌科细菌的Ⅰ型菌毛难以分辨,蛋白质亚单位为14.4 kD,比伤寒沙门氏菌Ⅰ型菌毛亚单位(22.1 kD)小,N-末端18个氨基酸残基与大肠杆菌和伤寒沙门氏菌Ⅰ型菌毛同源[1].Müller等在同一株人源肠炎沙门氏菌分离株上鉴定了甘露糖敏感且形态和生化特性上不同于之前报道的SEF14的典型Ⅰ型菌毛[2].1990年Tahorns等通过单克隆抗体(MAb)介导方法在肠炎沙门氏菌表面鉴定出这一菌毛样结构,蛋白质亚单位为14.3 kD,直径小于5 nm,没有凝集红细胞能力[3].     

肠炎沙门氏菌SEFA基因表达和间接ELISA检测方法的初步建立

为了给临床检测肠炎沙门氏菌的感染和血清学调查提供一种切实可行的方法,本研究根据肠炎沙门氏菌SEF14菌毛操纵子亚单位sefA基因序列设计一对引物,利用PCR技术从国内标准株CMCC(B)50336中扩增sefA基因,并按预定的阅读框插入表达载体pET22b+中,获得重组质粒pET-sefA,限制性内切酶结合琼脂糖凝胶电泳分析和序列测定结果表明,该序列大小为498bp,与已发表的sefA结构编码序列完全一致。重组质粒pETsefA转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)并能获得高效诱导表达,通过对菌体裂解上清液SDS-PAGE和western blot分析鉴定,该重组菌可以表达大小为15.2ku的可溶性重组蛋白rSEFA。纯化的rSEFA免疫小鼠所得高免血清以及标准株CMCC(B)50336感染小鼠后所获阳性血清,均能识别标准株肠炎沙门氏菌SEF14菌毛蛋白以及纯化的重组蛋白rSEFA,结果表明明体外表达的rSEFA蛋白有较好的免疫原性和反应原性。而基于rSEFA介导的间接ELISA有较好的特异性,对肠炎沙门氏菌特异性抗体检测有潜在的应用前景。     

肠炎沙门氏菌SEF14菌毛的表达及其对该菌的特异性检测研究

为获得肠炎沙门氏菌SEF14菌毛蛋白并检测其生物学功能,本研究以肠炎沙门氏菌标准株SE50336为模板,PCR扩增其含分泌信号肽的sef14操纵子基因片段,并克隆至表达载体pBR322中,构建重组质粒pBR322-sef14,将该重组质粒转化至经修饰且不含任何菌毛的大肠杆菌SE5000M株中,获得重组菌pBR322-s...     

六十二株水貂源大肠杆菌分离株耐药表型与耐药基因及克隆菌群分析

为了调查诸城地区某水貂养殖场粪便源大肠杆菌的表观及其分子特征,采集某个水貂养殖场的水貂粪便进行大肠杆菌分离鉴定,对分离鉴定的大肠杆菌进行血清型鉴定和对14种常见抗菌药物的耐药表型鉴定;使用PCR检测耐药基因以及Ⅰ整合子基因盒的携带情况,利用多位点序列分型（MLST）来分析菌株的克隆关系并构建系统发育树来分析相同克隆群菌株的遗传相似性。结果显示,自82份水貂粪便样品分离到62株大肠杆菌,分离率75.61%;大肠杆菌分离株对AMP和TET的耐药率超过90%,多重耐药菌株（MDR）占比为85.48%。PCR检测到5类耐药基因的存在,qnrS检出率最高,为61.29%（38/62）;aaC2、aaC4、sul1和aac（6'）-Ib-cr耐药基因与菌株产生相应的耐药抗性存在一致性（P<0.01）。分离菌株中Ⅰ类整合子可变区域的优势结构为dfrA27-aadA2-qnrA。鉴定出致病性血清型的存在,且对应菌株都具有多重耐药性,优势血清型为O104：H4。分离株中存在33个STs,ST46为优势STs（16.13%）,具有3个主要克隆群,依次为CC10、CC46和CC176;与致病性相关菌株的STs和人源大肠杆菌具有共同的遗传背景。本研究表明,养殖场的水貂受到致病性和多重耐药性大肠杆菌的污染,相同克隆群菌株的耐药基因分布具有多态性,表观特征差异明显。