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为探索乙醛脱氢酶1A1(acetaldehyde dehydrogenase 1A1,ALDH1A1)基因功能,本试验以16月龄延黄牛母牛为研究对象,屠宰后采集心脏、肝脏、肺脏、肾脏、胃、十二指肠、皮下脂肪和背最长肌,提取总RNA。根据GenBank上公布的牛ALDH1A1基因mRNA序列(登录号:NM_174239.2),利用Oligo 7.0软件设计引物,应用RTPCR扩增ALDH1A1基因,将扩增产物连接pMD18-T载体进行克隆测序,获得延黄牛ALDH1A1基因完整CDS序列,应用生物信息学软件分析核苷酸序列及其蛋白结构。以延黄牛不同组织总RNA为模板,通过实时荧光定量PCR技术检测ALDH1A1基因在延黄牛各组织间的表达差异。结果显示,ALDH1A1基因CDS序列全长1 506bp,编码501个氨基酸;延黄牛ALDH1A1基因序列与野牛、牛的同源性最高(≥99.7%),与猫和豹的同源性分别为89.4%和89.6%,符合物种进化规律。ALDH1A1蛋白分子质量为54.805ku,理论等电点为7.16,亲水性较强,占86.4%,酸性氨基酸和碱性氨基酸分别占11.4%和12.2%,属于可溶性蛋白,但不是分泌性蛋白,无典型信号肽切割位点;存在31个氨基酸磷酸化位点(分值>0.5)。延黄牛ALDH1A1蛋白二级结构含有α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲,分别占42.12%、16.17%、8.18%和33.53%,与该蛋白三级结构预测结果相同。实时荧光定量PCR结果表明,ALDH1A1基因在延黄牛肝脏、胃、皮下脂肪、十二指肠和肾脏组织中极显著表达(P<0.01);在背最长肌中显著表达(P<0.05)。本试验结果为进一步开展延黄牛ALDH1A1基因功能及肉质基因筛选研究提供了参考依据。 相似文献
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为了克隆绵羊血管内皮生长因子A(VEGF-A)基因,探寻该基因与绵羊毛囊发育及毛用性状形成的潜在关系,试验采用RT-PCR方法从小尾寒羊与新吉细毛羊皮肤组织克隆出VEGF-A基因mRNA并对其进行生物信息学分析。结果表明:以皮肤组织cDNA为模板,RT-PCR扩增出3条特异性条带;克隆测序结果显示所有条带均为VEGF-A基因序列,片段长度依次为828,825,756,624 bp。828 bp和825 bp片段属于全长VEGF-A,其中825 bp片段在3′非编码区缺失3个碱基;756 bp和624 bp片段由可变剪切产生,分别为外显子6缺失和外显子6,7双缺失,编码蛋白与人类VEGF-A165和VEGF-A121类似;核苷酸序列比对发现,VEGF-A基因mRNA仅存在3个SNP位点;蛋白结构域分析发现,三种类型VEGF-A蛋白均含有完整的血小板衍生生长因子(PDGF)结构域。说明试验成功地从绵羊皮肤组织中克隆到VEGF-A基因并证实可变剪切突变体的存在。 相似文献
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本实验利用四只带有永久性瘤胃瘘管的延边半细毛羊,采用交叉实验设计进行测试.体内实验表明,瘤胃液氨浓度实验组比对照组明显降低(P<0.01),实验组的PH值比对照组显著降低(P<0.05),VFA的变化不显著(P>0.05).原虫蛋白浓度(P<0.05)、细菌蛋白浓度(P<0.05)和TCA-P(P<0.01)较对照组都明显提高,瘤胃温度没有发现变化;体外实验表明,实验组的产气性能明显高于对照组(P<0.01),而瘤胃液中除淀粉酶(P<0.05)有显著提高外,脂酶、脲酶和纤维素酶的活性均无变化.在原虫种类的变化上,实验组的内毛虫数量较对照组明显增高,但双毛虫却明显降低(P<0.01). 相似文献
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惰性粉杀虫剂对黄粉虫成虫的物理伤害症状研究 总被引:2,自引:1,他引:1
用一种以食品级惰性粉为主要原料的惰性粉杀虫剂处理黄粉虫成虫,处理6h~8h、12h~14h、24h~26h和48h~50h试虫的平均爬行速度分别为12mm/s、7mm/s、3mm/s和0.4mm/s,明显比正常试虫的爬行速度(33mm/s)慢(p〈0.05);处理后试虫表现出一系列物理伤害症状,随处理时间的延长,试虫受伤害程度增强。根据惰性粉杀虫剂处理后试虫爬行速度、伤害症状和死亡时间,将试虫的伤害程度由轻到重划分为四个级别,伤害一级:试虫平均爬行速度为10mm/s-15mm/s,死亡时间为74h±6h,身体抬高,腿节和胫节之间的活动角度略有减小;伤害二级:爬行速度为5mm/s-10mm/s,死亡时间为42h±5h,偶尔绊脚,摔倒后能立即站立起来继续爬行,腿节和胫节之间的活动角度进一步减小,胫节和附节之间的活动角度也减小;伤害三级:爬行速度为1~5mm/s,死亡时间为20h±1h,附节和爪不能牢固的抓住滤纸,摔倒频率明显增加,且摔倒后较难重新站立,腿节和胫节之间、胫节和附节之间的活动角度都较小;伤害四级:爬行速度小于1mm/s,死亡时间为5h±1h,腿节和胫节之间、胫节和附节之间基本不能活动,不能爬行,摔倒后基本上不能再站立起来。结果表明,目前被广泛接受的惰性粉破坏虫体表皮蜡层导致失水致死和堵塞气门致死的理论并不能完全解释这种食品级惰性粉杀虫剂作用害虫的症状并较快致死害虫的机理,其杀虫机理还有待于进一步的揭示。 相似文献
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