新城疫病毒F48E9株M和NP基因的原核表达

根据新城疫病毒（NDV）F48E9国内标准强毒株编码序列设计了2对特异性引物,分别用于扩增M和NP基因。经序列测定,将其克隆到原核表达载体pET-30a（＋）上,转化E．coliBL21（DE3）,筛选表达NDVF48E9株M蛋白和NP蛋白的菌株。IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析结果表明,NDVM蛋白在E．coliBL21（DE3）内以可溶形式存在,而NP蛋白以包涵体的形式表达。用纯化的M和NP蛋白免疫鸡制备超免疫血清,进行Western-blot分析;结果,它们可以与真核表达系统表达的M和NP蛋白以及NDV发生特异性反应,表明,原核表达系统表达的NDVM和NP蛋白具有良好的免疫原性和反应原性。     

猪李氏杆菌病症状及治疗

正李氏杆菌病是一种人畜共患病的散发性传染病,猪李氏杆菌病的主要特征是脑膜炎、败血症和流产,有的单核细胞增多。本病是一般散发,发病率低,但病死率很高。易发于冬季和早春,各种年龄的猪均可感染,但怀孕母猪和仔猪较易感染。结合当地养殖情况提出了有效的预防和治疗措施,为广大养殖户提供参考。1主要症状猪李氏杆菌病的症状很不一致,可分为败血型、脑膜炎型和混合型,而常见的是混合型,多见于哺乳仔     

家禽免疫副反应的发生原因及预防措施

<正>免疫接种是预防和控制家禽传染病,降低家禽死亡率的主要措施。但在接种疫苗过程中,由于受到疫苗质量、接种时间、免疫接种技术及家禽有机体健康状况等多种复杂因素的影响,一些家禽在免疫接种后出现症状轻重不等免疫接种是预防和控制家禽传染病,降低家禽死亡率的主要措施。但在接种疫苗过程中,由于受到疫苗质量、接种时间、免疫接种技术及家禽有机体健康状况等多种复杂因素的影响,一些家禽在免疫接种后出现症状轻重不等     

禽白血病A亚群病毒引起的淋巴细胞性白血病诊断

采用病理组织学方法和分子生物学技术对某肉种鸡场的感染鸡进行实验室诊断,在肿胀的肝、肾和法氏囊组织切片中观察到成淋巴细胞增生病变。针对禽白血病病毒(ALV)群特异性抗原P27基因进行RT-PCR扩增,肾、肺、肝、脾病料样本中ALV病原核酸的检出率分别为100%、100%、90%和50%。将扩增的目的基因序列与GenBank公布的ALV参考毒株相应序列进行比较,核苷酸序列的同源性达到93.6%~97.7%。取ALV囊膜糖蛋白gp85基因的扩增产物进行酶切分析,扩增的目的片断中存在BglⅡ和SspⅠ酶切位点,BamHⅠ不能切割PCR产物。试验结果证实本次疫病是由ALV-A亚群病毒引起的淋巴细胞性白血病。     

O型、A型及Asia1型3个型口蹄疫病毒通用套式RT-PCR检测方法的建立

为了建立针对流行于我国及周边国家主要口蹄疫病毒(FMDV)血清型的检测方法,本实验设计2对特异性引物,通过对反应条件的优化,建立了能够同时扩增O型、A型及Asia1型FMDV VP1全基因的套式RT-PCR (RT-nPCR)方法.该方法能特异性检测O型、A型和Asia1型FMDV,对其它相关动物病毒的检测结果均为阴性;比FMDV多重RT-PCR商品试剂盒敏感约1 000倍.利用该方法对10份FMDV样品进行扩增检测,结合扩增产物的克隆测序技术,对所检样品进行了准确定型.实验结果表明,该方法通用型强,可用于3个血清型FMDV的检测和分子流行病学调查.     

鸡新城疫病毒强弱毒株RT_PCR鉴别诊断方法

本研究通过对大量不同毒力ＮＤＶ Ｆ基因核苷酸序列分析,根据毒力和序列间的相关规律,分别设计合成了两组引物,建立一个可以迅速鉴别ＮＤＶ强、弱毒株的ＲＴ－ＰＣＲ方法,对强毒株可扩增出１３３ｂｐ的特异性片段的３６２ｂｐ的通用片段,弱毒株可以扩增出２５２ｂｐ的特异性片段的３６２ｂｐ的通用片段。只需一个ＲＴ－ＰＣＲ反应,整个实验过程可在５小时内完成。敏感性测定结果表明该方法的最低检出量不低于５００ｐｇ的ＤＮＶ ＲＮＡ。为了增加方法的实用性,我们进一步建立了直接从组织病料中检测并鉴别强弱毒株的方法。     

mRNA差异显示技术及其改进

分子生物学的首要任务之一就是比较不同细胞间或同一细胞不同时间与空间基因表达的差异。在多种基因检测技术中 ,mRNA差异显示技术作为研究细胞、组织在不同条件下 ,基因表达水平差异的重要手段 ,以不可替代的优势已被广泛用于生物学领域。该技术与传统的消减杂交等方法进行比较具有简便、快捷、灵敏、高效等优点 ,但也存在假阳性率高、易污染等缺点。为了克服以上缺点又不断涌现出一些改进技术。文章对该技术的原理、优势与不足及主要改进进行了综述     

奶牛饲料配方优化模型的研究

本研究通过对奶牛饲料特性和营养需要模型分析,实现了以线性规划的两阶段法为主要方法配合奶牛饲料配方的优化算法.本程序时单纯形法计算过程中的数据处理加以改造,提高了运算速度.     

牛肉肌内脂肪日粮营养调控技术的研究进展

牛肉是一种营养价值较高的食品,具有高蛋白、低脂肪、低胆固醇等优点。随着人们对健康和保健意识的提高,消费者越来越意识到健康和饮食的关系,要求吃到高质量的牛肉。肌内脂肪是影响牛肉品质的重要因素之一,影响牛肉的多汁性、嫩度和风味,适宜的肌内脂肪含量可以改善肉质,提高牛肉的营养价值和食用品质。肌内脂肪的含量和分布受遗传和营养等多种因素的控制和影响,通过营养调控干预机体代谢来改善肌内脂肪是一种切实可行的途径。文章仅就肌内脂肪与牛肉感官品质、营养及保健价值的关系和国内外通过日粮营养调控改善牛肉肌内脂肪含量,提高牛肉质量的技术研究作一综述。     

断奶应激对犊牛血液生化、免疫和内分泌的影响

选择体质量和出生日期接近的26头犊牛,其中6头母犊,20头公犊。10日龄开始补充苜蓿干草、精饲料自由采食,60日龄断奶。分别在断奶前（-1d）和断奶后1,3,5,7,14d采集血液,测定血清中代谢物、激素及免疫球蛋白含量的变化情况。结果表明,断奶影响犊牛的消化代谢,血清中葡萄糖、总蛋白、尿素氮、甘油三酯含量变化显著（P〈0.01）。断奶造成犊牛血清皮质醇、急性反应蛋白、T3、T4、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、溶菌酶显著变化（P〈0.01）,使免疫球蛋白、γ-IFN、IL-1含量有不同程度下降（P〉0.05）。因此,断奶不仅降低了犊牛的免疫力,而且对犊牛产生了严重的应激反应。