猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达

[目的]克隆猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因并在原核表达系统中表达。[方法]根据GenBank上登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）核酸序列设计1对引物,用RT—PCR方法扩增出PRRSV的核衣壳蛋白（N）基因,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T．1上,得到重组质粒pGEX-4T-1-N。将重组质粒转化大肠杆菌BL31（DE3）感受态细胞,经TPTG诱导,SDS-PAGE电泳检测。[结果]PRRSV肺组织所提取的RNA,经RT—PCR扩增,得到一段392bp的片段,与预期结果一致。SDS—PAGE电泳分析,所得重组蛋白的分子量约39．866Da,与预期结果相同。重组菌体超声裂解后,经10％的SDS—PAGE电泳分析,结果显示该重组蛋白为可溶性蛋白。     

浅谈农民施用鸡粪的无害化处理方法

鸡粪中含有机物25．5％,氮1．63％,磷1．54％,钾0．85％。在干鸡粪中含粗蛋白28．0％～32．0％,粗纤维12．7％～16．8％,此外还含有钙、磷、镁、钠、钾、铁、铜、锌、锰等多种丰富的矿物质。     

巨型艾美球虫株间差异表达基因消减文库的构建和分析

为分离鉴定巨型艾美球虫上海株与南通株间免疫原性的差异表达基因,分别以巨型艾美球虫上海株孢子囊cDNA为驱动组,以南通株孢子囊cDNA为试验组,或相反,利用抑制消减杂交(SSH)方法,通过2轮杂交和2次PCR分别构建了2个抑制性消减文库.随机从2个消减文库中分别挑取96个克隆产物,经PCR鉴定上海株和南通株孢子囊消减文库的重组率分别为91%和94%,差异基因片段大小为250～1 000 bp.从每个文库中随机挑取30个阳性克隆测序,并进行同源性比较分析,结果表明:从上海株cDNA消减文库中获得了19个单一有效序列,其中15个为未知序列;从南通株cDNA消减文库中获得了16个单一有效序列,其中13个为未知序列.这些结果将为分离巨型艾美球虫新功能基因和进一步探索球虫抗原变异相关的分子机理奠定基础.     

福州市西湖公园滨水景观赏析

通过对福州西湖公园滨水景观资源进行调查,首先阐述了公园的滨水景观属性,进而从观赏性、生态性、宜人性等方面对公园的驳岸、植物、园路以及景观小品等要素进行分析;另外还探讨了公园滨水文化的延续与发展,并提出了建议性的思考,以期能为城市滨水景观的营造提供一些参考,为创造更好的人居环境提供依据。     

苹果生长素响应因子MdARF5的克隆与功能鉴定

【目的】分离苹果生长素响应因子MdARF5（Auxin Response Factor 5）,分析其对生长素的响应,鉴定其在调节花青苷合成过程中的作用,揭示MdARF5的生物学功能,为进一步研究生长素对花青苷的调节提供理论依据。【方法】以‘嘎拉’苹果（Malus×domestica ‘Royal Gala’）为材料,利用同源克隆技术,克隆得到一个ARF（Auxin Response Factor）转录因子,并将其命名为MdARF5。利用MEGA5.0软件构建多物种间系统进化树。通过农杆菌介导的遗传转化获得转基因苹果愈伤组织。比较野生型和转基因苹果愈伤组织花青苷积累的差异。利用烟草叶片瞬时转化试验,分析MdARF5对MdMYB1的转录调控。【结果】克隆获得苹果生长素响应因子MdARF5（序列号：MDP0000143749）,该基因CDS为2 691 bp,编码含有896个氨基酸的蛋白。系统进化树分析表明,苹果MdARF5与梨PbARF5同源性最高。基因表达分析显示,该基因响应生长素处理,并且与花青苷合成相关基因表现出相反的表达模式。在苹果愈伤组织中超表达MdARF5,其花青苷积累较野生型显著降低,表明MdARF5在调控花青苷积累过程中发挥重要作用。对苹果MdMYB1启动子序列进行分析,发现其序列包含一个MdARF5的结合位点。烟草瞬时表达试验显示,MdARF5能够抑制MdMYB1的表达。【结论】推测苹果MdARF5可能通过直接抑制MdMYB1的表达负调节花青苷的积累。     

全球转基因作物商业化进展及现状分析

分析了全球1996～2010年转基因作物商业化的进展及现状,结果表明,1996年以来,转基因作物面积逐年扩大,高速增长;2010年全球种植了1.48亿hm2,相当于全球作物面积15亿hm2的10%,是1996年170万hm2的87倍,平均每年约增加1 000万hm2。15年内全球累计种植10.97亿hm2转基因作物,近4年累计种植5.21亿hm2,接近前11年的总和。2010年有29个国家种植转基因作物,有30个国家允许进口转基因作物用于食品、饲料和进行环境释放,这些国家的人口占世界总人口的75%。转基因作物主要集中在美国(45.1%)、巴西(17.2%)、阿根廷(15.5%)、印度(6.4%)和加拿大(5.9%)。2010年全球种植了24种转基因植物,主要是大豆(49.5%)、玉米(31.6%)、棉花(14.2%)、油菜(4.7%)。转基因普及率最高的作物也是大豆(81%)、棉花(64%)、玉米(29%)、油菜(23%)。转基因性状主要是抗除草剂(61%)、既抗除草剂又抗虫(22%)和抗虫(17%)。     

猕猴桃抗溃疡病基因连锁SSR分子标记初步研究

【目的】研究与猕猴桃抗溃疡病基因连锁的SSR分子标记,为猕猴桃抗病育种提供早期分子筛选标记。【方法】以易感病的雌株西选二号和抗病的雄株SX45872杂交F1代的198株群体以及40份猕猴桃材料为试材,利用离体接种法进行抗性鉴定。利用SSR(Simple sequence repeat)技术,结合集群分类分析法(Bulked segregation analysis,BSA)进行猕猴桃抗溃疡病基因(PR)分子标记筛选。【结果】抗性鉴定结果表明,猕猴桃溃疡病抗/感病分离比符合由1对主效基因控制的1∶1分离比例。通过对51对SSR引物的筛选,获得了与抗溃疡病基因连锁的SSR分子标记UDK97-428116;将获得的SSR标记在40份猕猴桃材料中进行验证,分子标记结果与离体枝条接种结果一致率达95.5%,从而验证了该标记的可靠性。【结论】SSR标记UDK97-428116可用于猕猴桃材料溃疡病抗性鉴定和分子标记辅助育种。     

植物功能型及其划分方法

综述了植物功能型（plant functional types,PFTs）的概念、发展历史、研究意义以及现有的植物功能型划分方法．分析了目前植物功能型研究中所面临的几大难题,对现有的划分方法进行了分析和评价,以期为国内研究者在本领域进一步开展实验提供参考．最后以McIntyre ＆ Lavorel的五步研究方法为基础在四川西部卧龙自然保护区亚高山暗针叶林进行了实例研究．结果根据物种对林窗微环境的响应将林窗中的物种划分为2个PFTs：无响应群和敏感群．划分结果与物种本身对光湿条件的需求基本吻合．证明能够用该方法进行卧龙亚高山森林植物功能型的划分研究,     

地方习用药材红茂草规范化种植标准操作规程(SOP)

按照《中药材生产质量管理规范（》GAP）规范化种植生产的技术要求,对红茂草生产中的选地、种植、田间管理、病虫害防治、采收加工、包装、贮运、质检、材料归档等各环节等进行规范化研究,并制定了标准操作规程。     

半夏疏松愈伤组织诱导条件的优化研究(英文)

[目的]建立半夏细胞悬浮培养体系。[方法]以半夏叶柄为外植体,采用正交试验设计研究了2,4-D、NAA、毒莠定和KT4种植物生长物质及其配比对疏松愈伤组织形成的影响。[结果]2,4-D和毒莠定对半夏叶柄愈伤组织诱导效果最显著,KT和NAA次之。诱导半夏叶柄形成疏松愈伤组织的适宜培养基为MS+0.5mg/L2,4-D+1.0mg/LNAA+1.0mg/L毒莠定+1.5mg/LKT。[结论]为通过半夏细胞悬浮提取有效成分和生产人工种子奠定了基础。