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981.
982.
猪脑心肌炎病毒GXLC株的分离及其3D基因分子特征的分析 总被引:2,自引:0,他引:2
采集临床疑似脑心肌炎死亡仔猪的组织作为接种材料,接种于BHK-21细胞系,观察细胞病变(CPE),并用RT-PCR和间接荧光抗体试验(IFA)进行鉴定,证实分离到1株脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV),命名为GXLC株。应用RT-PCR方法扩增GXLC株的3D基因,扩增产物克隆入pMD18-T载体后进行测序,对获得的3D基因序列进行分析。序列分析结果表明,GXLC株3D基因全长1380 nt,编码460个氨基酸,含有7个抗原表位。同源性分析结果表明,GXLC株与国内外其它EMCV分离株3D基因核苷酸序列的同源性在84.7%~99.7%之间,氨基酸序列的同源性在96.1%~99.6%之间。遗传进化分析结果表明,基于3D基因核苷酸序列绘制的系统进化树可将所有EMCV分离株分成2个群:Ⅰ群和Ⅱ群,Ⅰ群可再细分为Ⅰa亚群和Ⅰb亚群,其中猪源EMCV在Ⅰ群和Ⅱ群中均有分布,而鼠源EMCV分布在Ⅰ群,人源EMCV分布在Ⅱ群;GXLC株与其它中国分离株均属于Ⅰa亚群。 相似文献
983.
[目的]为了提高巨大芽胞杆菌的芽胞形成率及芽胞数量,为巨大芽胞杆菌芽胞制剂的产业化生产提供理论依据。[方法]通过单因子试验及正交试验对巨大芽胞杆菌JD-2发酵培养基和培养条件进行了研究。[结果]最适培养基组成为:玉米淀粉10.0g/L,蛋白胨5.0g/L,酵母膏5.0g/L,NaCl5.0g/L,CaCO31.0g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L。确定最佳培养条件为:接种后起始芽胞浓度控制在106CFU/mL,初始pH值为7.0,培养温度为30℃,200r/min摇瓶培养,250mL三角瓶中最适装液体积为25mL。在15L自动发酵罐中扩大培养,控制溶氧在30%以上,培养22h,菌体浓度可达3.50×109CFU/mL,芽胞数量可达3.40×109CFU/mL,芽胞率达97.2%。[结论]试验获得的最佳培养条件可进一步应用于生产实际。 相似文献
984.
小鼠IL-1β、TNF-αTaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及脑心肌炎病毒感染小鼠的检测 总被引:3,自引:1,他引:2
为探讨脑心肌炎病毒(EMCV)感染后促炎细胞因子的表达水平、从分子水平深入研究EMCV的致病机制,本研究分别建立了检测小鼠IL-1β、TNF-α和管家基因β-actin的TaqMan real-time PCR检测方法.该方法标准曲线的相关系数均达到0.998以上,检出下限均达到10 copies/μL质粒标准品,组内与组间的变异系数均小于2%.应用该方法对猪源EMCV GXLC株人工感染小鼠的脑、心、脾中IL-1 β、TNF-α mRNA的转录水平进行检测,发现感染后第4d IL-1β、TNF-α mRNA的转录水平达到峰值,并且与小鼠发病死亡高峰存在明显的时间相关性.本研究所建立的TaqMan real-time PCR检测方法为小鼠促炎细胞因子的检测及定量分析提供了技术手段. 相似文献
985.
986.
种番鸭产蛋下降综合征病毒的分离及其PCR鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
从临床表现产蛋率下降、产蛋异常的种番鸭输卵管粘膜中分离到1株病毒,经血凝及血凝抑制试验鉴定为产蛋下降综合征病毒,命名为E05。参照GenBank上发表的鸭源产蛋下降综合征病毒基因组序列的保守区设计1对引物,通过PCR技术扩增出286 bp的基因片段,将扩增产物与T载体连接后,转化感受态细胞,筛选出阳性重组质粒进行测序分析。测序结果与GenBank上已发表的EDSV 100kD蛋白序列比对,扩增片段与已登陆的基因片段完全相符,同源性100%。 相似文献
987.
杂交粳稻六优1号的选育及其利用 总被引:2,自引:0,他引:2
六优1号是江苏省农科院粮食作物所培育成的杂交粳稻新组合,表现有明显的产量优势。现将六优1号的选育经过、产量表现及其栽培利用技术分述于下。 选育经过 1.不育系六千辛A的选育 六千辛A是江苏省农科院粮食作物所以BT型矮秆黄A为母本,中粳品系691/千重浪//Zenith(简称六千辛)为父本回交转育而成的中粳不育系。转育工作始于1977年,以后选不育株与父本连续回交。据测定:B_6F_1群体的不育株率即达100%,不育度达99.5%,B_8F_1不育株率和 相似文献
988.
PCR检测鸭疫里默氏菌的研究 总被引:8,自引:1,他引:8
对本研究室分离、鉴定并保存的42株鸭疫里默氏菌(包括8个血清型)、9株鸭源大肠杆菌和4株鸭源禽多杀性巴氏杆菌进行PCR扩增,结果所有的鸭疫里默氏菌均能扩增出809bp的特异性DNA片段,而鸭源大肠杆菌和鸭源禽多杀性巴氏杆菌均为阴性。试验证明以细菌DNA和全菌体分别作模板,对PCR的扩增结果无影响。经过优化的该PCR方法能检测出的最低DNA量为1pg。 相似文献
989.
990.