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191.
192.
193.
绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株囊膜蛋白基因在大肠杆菌中的分段表达 总被引:2,自引:0,他引:2
为了建立原核高效表达体系,从自然感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株的肺肿瘤组织中提取基因组DNA,应用PCR技术分别扩增编码囊膜蛋白(env)基因的表面蛋白(surface protein,SU)和跨膜蛋白(transmembrane protein,TM)区域基因,通过T-A克隆的方法分别克隆入pGEM-TEasy载体中,然后利用设计的起始密码、终止密码以及相应酶切位点的引物,把env基因的SU区和TM区基因亚克隆到表达载体pGEX-4T-1中,分别构建SU和TM的重组表达质粒,经酶切、PCR及DNA测序鉴定后,将阳性质粒转化入大肠杆菌BL21 CodonPlus中并在IPTG的诱导下表达,表达产物用SDS-PAGE分析鉴定。结果表明,该基因可以在大肠杆菌中以稳定的包涵体形式高效表达,表达的SU和TM融合蛋白表观分子质量约为68 ku和46 ku,表达量分别占全菌蛋白的25%和30%,并且从包涵体分离纯化得到的表达蛋白具有较高纯度,是一种理想的免疫原。 相似文献
194.
用间接红细胞凝集试验测定了以假结核棒状杆菌人工感染的1峰和本茵甲醛明矾菌免疫的6峰双峰驼的血清抗体,并绘制了产生的曲线。注射前抗体滴度均在1∶20以下,注射后约20天抗体滴度最高,有些达到1∶1280或1∶2560。以后滴度逐渐降低。6个月以后降到1∶20或更低。血清的第一管稀释度为1∶20。临床健康的双峰驼血清检查了69份。其中1份是曾患假结核棒状杆菌病痊愈者,抗体滴度为1∶80,另2份滴度为1∶20。其余66份均在1∶20以下。并检查本病患驼的血清10份,其中9份为1∶80或更高,1份为1∶40。因此初步提出间接红细胞凝集试验诊断双峰驼假结核棒状杆菌病的判定标准:抗体滴度1∶20为阴性,1∶40为可疑,1∶80为阳性,说明用本法进行诊断本病是快速而可靠的。 相似文献
195.
气肿疽是牛羊等反刍动物的一种急性热性传染病。其主要特征是在肌肉丰满处发生急性气性肿胀和坏疽,按压有捻发音,局部变黑,故又叫黑腿病、鸣疽。其病原体为气肿疽梭菌。该病菌能产生芽胞,主要存在于被病牛的尸体、坏死组织及水肿液所污染的土壤、草料、饮水中,牛羊等一旦采食 相似文献
196.
197.
198.
199.
200.