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161.
目前在昆虫杆状病毒表达系统(baculovirus expression vector system,BEVS)中表达A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)结构蛋白VP1尚未见报道。本研究将VP1基因通过限制性酶切位点插入杆状病毒载体pFastBac I,然后将鉴定正确的重组载体转化至DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选,对鉴定正确的菌落提取质粒。将质粒转染Sf9昆虫细胞,待有明显细胞病变后收获重组杆状病毒rBac-I-VP1,并进行病毒滴度测定。随后通过蛋白免疫印记(Western Blot)和间接免疫荧光(IFA)鉴定VP1蛋白表达情况。结果显示,重组杆状病毒rBac-I-VP1滴度为6.8×105 pfu/mL;Western Blot可检测到相对分子质量约27 kDa的表达产物,且其能够被SVA兔阳性多克隆血清识别;IFA试验显示,VP1蛋白能够在Sf9细胞内表达。结果表明,本研究利用BEVS表达的SVA VP1蛋白具有良好的免疫反应性,为其后期功能研究及SVA诊断试剂研制提供了技术基础。 相似文献
162.
察布绒山羊及其生产性能的研究和分析 总被引:2,自引:0,他引:2
本文系统地阐述了察布绒山羊的形成、外形、体尺、体重、绒量、绒质、繁殖性能及生长发育,并在一些重要指标上与我区阿尔巴斯绒山羊作了对比,并提出了一些建议。 相似文献
163.
在精饲料相同的条件下选择5种饲草,通过不同的配比确定为4个粗饲料类型。通过饲喂科尔沁肉牛育成至初产期母牛,研究不同的粗饲料类型对其繁殖性能的影响。结果发现,试验Ⅳ组繁殖成活率达到96.67%,分别高于试验Ⅲ组、试验Ⅱ组和试验Ⅰ组6.67、 10和20.01个百分点;初配日龄试验Ⅳ组和试验Ⅰ组差异极显著(P<0.01),试验Ⅳ组初配日龄为475日龄,比试验Ⅰ组初配时间提前69d;犊牛初生重试验Ⅳ组和试验Ⅰ组差异显著(P<0.05);妊娠期各试验组不显著(P>0.05)。因此,不同粗饲料类型对母牛繁殖性能有一定影响,在粗饲料中加大优质牧草的比例,提升母牛繁殖性能。综合分析得出,饲喂青贮玉米+羊草干草+秸秆粗饲料组合既能达到经济效益最大化,同时又能保证科尔沁肉牛育成至初产期母牛的营养需求,使其繁殖性能达到较高水平。 相似文献
164.
为了研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5重组蛋白(rGP5)对猪外周血单个核细胞(PBMC)功能的影响,本研究选取PRRSV-PC疫苗株中的ORF5基因片段,对其进行原核表达并纯化,结果显示rGP5以可溶性和包涵体两种形式表达,分子质量约为30 ku;将该纯化蛋白免疫大耳白兔,按常规方法制备抗血清并进行酶联免... 相似文献
165.
166.
167.
168.
169.
170.
为了解塞内卡病毒分离株SVA/CH/ZZ/2016全基因组序列,设计4对相互重叠的特异性引物扩增基因片段,将扩增产物分别克隆至pCE2TA/Blunt-Zero载体并进行测序,拼接校正后获得SVA/CH/ZZ/2016株全基因组。结果显示,该毒株基因组全长7 292 bp,包括5''UTR(670 bp)、ORF(6 546 bp)以及3''UTR(76 bp)。选择国内外其他9株参考毒株序列,对编码区12个基因的核苷酸及编码氨基酸进行比对。结果显示,核苷酸同源性最高的是3B基因,最低的是VP1基因,其余基因的核苷酸序列同源性均在85.2%~100%之间。VP1基因遗传进化分析显示,SVA/CH/ZZ/2016株与美国分离株USAIL_Purdue_43_2016和USAIN_Purdue_3698_2016株亲缘关系最近,属同一进化分支,与原始毒株SVV-001株亲缘关系最远。对SVA/CH/ZZ/2016株和原始毒株SVV-001 VP1蛋白的氨基酸序列进行比对,发现共有10处氨基酸差异。本研究通过对SVA/CH/ZZ/2016株全基因组测序及分析,为进一步开展SVA分子生物学研究及流行病学调查提供了基础数据。 相似文献