猪源沙门菌分离鉴定与耐药性分析

2015年9月和2016年10月,河南省两猪场暴发保育仔猪的急性死亡,为了弄清原因,采集心血、肺脏和肝脏病料,通过常规分离、PCR鉴定、生化试验,分离到2株沙门菌,分别命名为HenanSep1、HenanSq2N。小鼠致病性试验结果显示,每只小鼠接种0.2mL菌液,其浓度为5×10~8 CFU/mL,均导致小鼠发病,但是无死亡。选取21种药物,采用K-B法对2个分离株进行药物敏感性测定。药敏试验结果表明,2株沙门菌对头孢噻呋、氨苄西林、磺胺甲恶唑/甲氧苄啶、磺胺异恶唑、氯霉素、恩诺沙星耐药,对美罗培南、亚胺培南、氨曲南、多黏菌素B、土霉素敏感,对其他药物敏感性不同。研究结果为猪沙门菌病临床诊断与防治提供了重要依据。     

猪流行性腹泻病毒间接ELISA抗体检测方法建立与应用

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是目前引起我国猪急性肠炎并水样腹泻的重要病原之一,但尚无商品化病毒血清抗体检测试剂盒。本研究以纯化的PEDV为包被抗原,通过优化ELISA反应条件,建立了间接ELISA抗体检测方法,其反应条件为:抗原最佳包被浓度为3μg/mL,血清样品最佳稀释度为1∶100,包被时间为37℃作用2 h,1.5%BSA 37℃封闭3 h,二抗1∶10 000稀释,37℃作用30 min,抗体临界值为OD450nm≥0.306判为阳性,OD450nm≤0.268判为阴性,介于二者之间为可疑。该方法检测6份已知PEDV阳性血清效价为1∶3 200,检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、伪狂犬病毒和口蹄疫病毒血清抗体均为阴性,批间和批内重复试验变异系数2.5%～8.3%,对江苏、上海、浙江、安徽地区587份猪血清样品进行检测,抗体阳性率达56.76%,证明该方法具有较好敏感性、特异性和重复性,可用于PEDV抗体检测和流行病学调查。     

应用型本科兽医传染病学实验实训课程教学设计

应用型本科兽医传染病学实验实训课程是兽医传染病学课程教学的重要组成部分,是动物医学专业的主要实践环节之一.该文就应用型本科兽医传染病学实验实训课程教学设计的理念与依据、内容选取、组织与实施、考核进行研究与探索,并在2013级、2014级、2015级动物医学本科生中应用,取得较好的效果.     

猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

采用RT-PCR扩增猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白基因并克隆至原核表达载体pET-28a,转化到宿主表达菌BL21后经IPTG诱导表达和Ni柱纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组N蛋白,其大小约为58 ku。将纯化重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合,PEDV间接ELISA方法筛选,制备获得4株能稳定分泌PEDV抗体的杂交瘤细胞株1C9、4C8、4F8和6A11。Western blot和间接免疫荧光试验证明其与PEDV均有特异性反应,单抗亚类鉴定均属于IgG1,轻链为κ型。杂交瘤细胞培养上清ELISA抗体效价为1∶1 600~6 400,腹水ELISA抗体效价达1∶1.024×105以上;4株细胞连续培养20代,其ELISA抗体效价基本一致。本研究为PEDV感染的诊断和致病机制研究提供了有用工具。     

茶树不同组织结构中纤维素酶的活性差异研究

纤维素酶是重要的水解酶,对植物的生长发育及新陈代谢发挥着重要作用。为了解茶树中纤维素酶的活性变化特征,以茶树品种‘凫早2号’为研究对象,测定其不同组织结构中纤维素酶3种主要组分内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶的活性。结果显示,内切葡聚糖酶在茶树一芽四叶中随着叶片成熟度增加,酶活性增加,表现为:第四叶第三叶第二叶第一叶芽,与β-葡萄糖苷酶活性呈现相反趋势;外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶都是在第四叶活性最低。内切葡聚糖酶在茶树花朵中活性最高,而外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶分别在叶片、果皮中活性最高。胞质蛋白中内切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶活性显著高于膜蛋白中的酶活性,但胞质蛋白、膜蛋白中都未检测到外切葡聚糖酶活性。     

高效液相色谱法测定清瘟解毒口服液中栀子苷的含量研究

目的 为评价栀子苷(Geniposide)的定量检测方法,规范清瘟解毒口服液中栀子的质量控制标准,特进行了本含量测定方法研究。　方法 药液前处理以70%甲醇百倍稀释药液,超声提取后过微孔滤膜,精密进样20 μL,通过ODS填料色谱柱,以11%乙腈洗脱,在波长238 nm下采集紫外吸收色谱进行计算。　结果 进样栀子苷浓度在10.44~156.65 μg·mL^-1内时,与色谱峰面积值线性相关度佳。其中栀子苷加样回收率平均达97.3%,（RSD＝0.69%,n=6）。　结论 得知该方法转移率高、重复性好,可作为清瘟解毒口服液中栀子苷含量质控标准。     

肠出血性大肠杆菌O157:H7Intimin和Tir-Tccp蛋白质对小鼠的免疫保护性

为了研究不同浓度的肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7 Intimin和Tir-Tccp蛋白质对接受1010 CFUEHEC O157:H7小鼠的免疫保护作用,将Intimin和Tir-Tccp蛋白质和佐剂充分乳化后,通过皮下多点注射免疫小鼠,对照组注射等量的磷酸盐缓冲液.共免疫2次,间隔14d,末次免疫后14d...     

EHEC O157:H7二重PCR的建立及应用

建立用于从临床样品中检测EHEC O157:H7的二重PCR方法.根据GenBank登录EHEC O157:H7序列,通过对菌体和鞭毛抗原保守性核苷酸序列的比对和分析,分别设计编码O抗原rfbE基因和编码H抗原fliC基因各1对特异性引物,建立二重PCR检测方法,并以EHEC O157:H7纯培养和模拟制备的3种阳性样...     

南疆中早熟陆地棉高产栽培技术

新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市哈拉玉宫乡年植棉66.67 hm2以上的植棉大户韩从强,每年公顷子棉产量都在7500 kg以上,在普遍减产欠收的2012年(初霜比历年同期提早半月为10月8日,还有7-8月温度偏低造成了低产欠收年份),公顷平均产量仍达到7455 kg.为了总结其大面积棉花稳产高产栽培管理经验,笔者专程调查访问了这位植棉能手,总结其高产经验及南疆大田生产几年来的实际情况,有三点成熟经验:良种是前提,良田是基础,良法是关键.     

闽西北山区特色农业产业发展研究———以泰宁县为例简

闽西北山区由于交通不便,制约了当地经济的发展;但山区特色农业资源丰富,适宜发展特色农业产业,由此缩小与闽西南沿海地区的经济发展差距.该研究以泰宁县为例,介绍了该县特色农业产业化建设取得的成效,分析了期产业化过程中存在的加工滞后、科技含量低、资金短缺等问题,借鉴其他特色农业较为发达地区的发展经验,提出了建立多元投入机制、发展精深加工、加快科技创新等特色农业产业发展的对策建议.