水生动物疾病检疫之我见

近来疯牛病、口蹄疫、SARS、高致病性禽流感已引起人们的高度重视，但作为“菜篮子”重要组成部分的水生动物的疾病检疫，却未得到足够重视，检验检疫手段与制度还不健全和完善。对虾白斑综合症、河蟹颤抖病、淡水鱼细菌性败血症等水产动物疾病所造成的水产养殖的损失十分严重。而加强水生动物检疫，一方面可有效防止病害生物进入我国，保障我国水产养殖安全与生态环境的稳定；另一方面能控制疾病从疫区向非疫区传播，减少疾病发生，提高水产养殖效率和水产品质量，维护我国水产品的国际信誉，促进水产品出口。一、水生动物疫病特点目前水…     

恩诺沙星在异育银鲫体内和体外肝微粒体中代谢产物分析

采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(UPLC/Q-TOF MS)对恩诺沙星在异育银鲫体内和体外肝微粒体中代谢产物进行定性分析.结果表明,异育银鲫血浆中除以恩诺沙星原形药物为主外,还可检测到少量N-去乙基代谢产物环丙沙星、葡萄糖醛酸结合物;而在肝微粒体体外孵育体系中除检测到原形药物外,只有少量N-去乙基代谢物环丙沙星.无论是体内还是体外,代谢产物生成量都很少.推测恩诺沙星在异育银鲫体内代谢反应主要是脱乙基反应和葡萄糖醛酸结合反应,而在体外肝微粒体恩诺沙星代谢反应主要是脱乙基反应.     

南极大磷虾木瓜蛋白酶酶解产物氟浓度及营养成分研究

为了解酶解处理对南极大磷虾木瓜蛋白酶酶解产物（上清干物质KSF,沉淀干物质KS和残渣KR）中氟浓度的影响,采用氟选择电极法对酶解产物中氟进行测定。同时,采用国标方法对KSF和KS中主要营养成分进行测定。结果：KR中氟浓度最高,且KR中氟占酶解前基质中总氟的质量分数为72.94%~79.94%,而KSF和KS中氟浓度得到极大的降低。木瓜蛋白酶加入有利于虾浆中不溶的蛋白质以可溶解的形式进入上清液中。KSF中未检测到粗脂肪,总糖含量为13.91%~21.57%,粗蛋白含量为57.75%~67.13%。而KS中粗脂肪含量高达33.28%~42.90%,总糖10.14%~15.57%,粗蛋白38.00%~44.87%。因此,木瓜蛋白酶酶解南极大磷虾获得的KS和KSF均可以作为优质、安全的饲料添加剂。其中,添加1.5%的木瓜蛋白酶和1.0%葡萄糖,经58℃水浴3 h的酶解方式能使KSF的得率从18.65%上升到20.37%,其粗蛋白含量为65.49%,而KS的粗蛋白和粗脂肪含量分别为39.16%和38.49%,为最佳的酶解南极大磷虾的酶解方式。     

异育银鲫P450家族CYP3A136基因的克隆与表达

根据5种硬骨鱼已知CYP3A序列保守区设计兼并引物,以异育银鲫cDNA为模板扩增得到CYP3A基因片段,根据得到片段序列设计特异引物并利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得全长cDNA。得到异育银鲫CYP3A基因全长为1 769 bp,开放阅读框为1 545个核苷酸,编码514个氨基酸。其预测蛋白质分子量为58.624 ku,理论等电点为6.30。将异育银鲫CYP3A序列理论编码氨基酸序列提交细胞色素P450命名委员会(Cytochrome P450 Nomenclature Committee)并由其命名为CYP3A136。氨基酸序列分析显示,其与稀有鮈鲫、草鱼、鲦同源性较高,并且具有高度保守的血红素结合区域FXXGXXXCXG。异育银鲫CYP3A基因的半定量RT-PCR显示,在肝和肠组织中转录水平最高,在肾和鳃中次之,其余组织较低。     

8种染色方法对组织切片中虾肝肠胞虫染色效果的比较

病理检测是一种诊断病原及观察机体组织病理变化的重要方法,特殊染色是在病变组织中寻找病原体的前提手段,良好的染色有助于将病原体与组织区别,从而增加病原在组织切片中的检出率。为筛选出一种适用于虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)病理切片检测的最佳染色方法,使用苏木精-伊红(HE)染色法、Masson染色法、爱显蓝-雪夫(AB-PAS)染色法、甲苯胺蓝(TB)染色法、伟郝夫范吉森(EVG)染色法、劳克坚牢蓝(LFB)染色法、天狼猩红(Sirius red)染色和普鲁士蓝(PB)等8种染色方法对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)感染了虾肝肠胞虫的肝胰腺进行组织病理切片染色,并结合对EHP检出率的统计分析,比较了这些染色方法的优缺点。结果表明:HE染色法、AB-PAS染色法、TB染色法、EVG染色法、天狼猩红Sirius red染色法和PB染色法对孢子的染色效果较差,与背景颜色对比不明显,单个视野检出率较低; LFB染色法虽然使孢子易被识别,但是有孢子丢失现象,且组织染色效果差; Masson染色结果显示孢子呈现品红色,与组织颜色对比鲜明,孢子颗粒清晰可见,对组织细胞结构染色效果较好,且检出率也最高。综合分析染色效果及检出率,Masson染色法是一种非常适用于组织内的虾肝肠胞虫孢子染色的方法,本研究为微孢子虫病的组织病理研究提供一种有效的基础手段。     

盐碱地水产养殖技术100问(四)

39 光合细菌、枯草杆菌等微生态制剂是否能与消毒剂同时使用? 光合细菌、枯草杆菌等微生态制剂不能与消毒剂同时使用,因为消毒剂会在杀死水体中有害微生物的同时,也将有益的微生物杀死,包括人为投放的微生态制剂.所以使用微生态制剂时,要在投放消毒剂3d之后投放.     

盐碱地水产养殖技术100问(八)

78 怎样检查对虾摄食情况? 检查对虾摄食情况,应在投饵后1～1.5h,主要是观察对虾肠胃的饱满度.对虾的胃位于对虾头部,在肝胰脏之前,呈囊状,会随着内含物的多少而变大或缩小.胃后延伸至对虾腹部末端的管子即为肠道.     

虾肝肠胞虫4个孢壁蛋白基因的鉴定、序列特征及表达分析

对上海某养殖场凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)开展了虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)检测,发现部分对虾存在EHP感染.随后对EHP感染阳性对虾肝胰腺组织进行转录组测序和数据分析,从中筛选到4个孢壁蛋白基因,分别命名为EhEnP1、EhSWP7、EhSWP...     

采用LC/MS~n法分析恩诺沙星在锯缘青蟹血浆中的代谢产物

采用电喷雾离子阱质谱法在正离子检测方式下,对锯缘青蟹口灌恩诺沙星给药后血淋巴中恩诺沙星和代谢产物进行定性分析。通过对血浆中恩诺沙星及其代谢产物的质谱裂解行为进行碰撞诱导解离分析,获得了各化合物的多级质谱信息,通过比较各化合物结构和质谱裂解途径的异同点,发现有三个代谢产物,其中峰面积最大的为环丙沙星,其次为羟基化恩诺沙星,另一代谢产物可能是加氧恩诺沙星;推测恩诺沙星在锯缘青蟹体内的代谢反应主要是脱乙基反应、羟基化反应和氧化反应。通过定量分析,血浆中恩诺沙星和代谢产物环丙沙星的浓度分别为19.1μg/ml和0.526μg/ml。     

斑节对虾鳃Na^＋／K^＋—ATPase的活性

研究了培养介质的Na^ 、K^ 和Mg^2 浓度、Na^ ：K^ 比、pH值，培养温度以及培养时间和底物ATP-Na2量对斑节对虾 锶Na^ /K^ -ATPase活性的影响，培养介质中Na^ 浓度为50-100mM、K^ 浓度为25-30mM、Mg^2 浓度为8-20mM、Na^ :K^ 比在10：1-2：1、pH7.0-7.5时，Na^ /K^ -ATPase活性较高，Na^ /K^ -ATPase活性随着培养温度升高而增大，Na^ /K^ -ATPase反应时释放出的无机磷（Pi)累积量与培养时间呈直线性增加，底物ATP-Na2浓度达到1.04mM时，Na^ /K^ -ATPase反应时释放出的无机磷（Pi)累积量与培养时间呈超级一性增加，底物ATP-Na2浓度达到1.04mM时，Na^ /K^ -ATPase活性达到最高，随着ATP-Na2量的增多，Na^ /K^ -ATPase活性并未增大。