我国四个自然保护区森林土壤中苏云金芽孢杆菌的分布*

从我国四个不同立地带－长白山，百花山，鼎湖山，尖峰岭自然保护区，采集到林下０－５ｃｍ土层土壤样品７５个，分离到苏云金芽孢杆菌３９株。其中芽孢杆菌的总数量和苏云金芽杆菌的出土率和分离率所有差异，ｐＨ偏中性和含水量稍高的土壤，菌数较高；而与所测的各种土壤养分无明显相关。对３９株苏云金芽孢杆菌的鉴定：１７株属库尔斯塔亚种，６株属松Ｚｈｕ亚种，１６株未定名。毒力测定表明：对杨扇舟蛾和马尾松毛虫幼虫的致死率     

苏芸金芽孢杆菌孢子囊超微结构的研究

用电子显微镜观察了分属于苏芸金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)23个 H-血清型的30个亚种和3株新分离菌株孢子囊超薄切片的超微结构。结果表明苏芸金杆菌30个亚种的芽孢和伴孢晶体在孢子囊中形成的部位、形状及数量有所不同。大部分亚种的伴孢晶体位于孢子囊的一端,以单个晶体存在于孢外膜之外,只有幕虫亚种(Subsp.finitimus)的伴孢晶体位于孢外膜之内。在孢子囊中晶体的形状分别为菱形、方形、圆形、不规则形。其数量大多数为一个。从不同森林土壤中分离到的87052、85020、85040三株菌,其中87052菌株伴孢晶体为圆形,与已知圆形伴孢晶体的亚种形态特征相似,其它两株菌在形态特征上与已知 30个亚种在孢子囊的超微结构上有着一定的差异。     

我国不同森林立地带土壤中苏云金芽孢杆菌cry基因资源研究

利用PCR－RFLP鉴定体系和SDS－PAGE表达蛋白的分析方法，分析了来自我国不同森林立地带（寒温带，中温带，暖温带，北亚热带，中亚热带，南亚热带，高原亚热带，热带）自然保护区森林土壤中分离的72株苏云金芽孢杆菌的cry 1，cry 2，cry 3，cry 4，cry 5，cry 8，cry 9，cry 10，cry 11，cry 1I杀虫晶体蛋白基因类型，表达蛋白和杀虫活性的生物测定。研究表明：同时含有cry 1，cry 2，cry 1I3类 有21株菌，6株菌含有cry 1，cry 2类基因，4株菌含有cry 1和cry 1I基因，只含有cry 1基因的1株，cry 2基因的4株，36株菌不含所鉴定的10类基因。同时证明：绝大多数含有cry1基因的菌株表达了130kD蛋白，含有cry2基因的菌株表达了60kD的蛋白。对不同农，林害虫棉铃虫，杨扇舟蛾，舞毒蛾，马尾松毛虫，黄粉甲，榆兰叶甲，落叶松叶蜂等幼虫的杀虫活性进行了生物测定。进一步证明了苏云金芽孢杆菌cry基因，表达蛋白及杀虫活性三者的相关性。为生产和科研提供了生物治虫，抗虫育种的苏云金芽孢杆菌cry基因资源。     

苏云金杆菌发酵条件的研究——Ⅰ.发酵条件与昆虫毒性之间的相关性

研究表明,苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)对马尾松毛虫(Dendrolimuspunctatus)幼虫的毒性与苏云金杆菌的不同亚种,同一亚种的不同菌株以及发酵培养基组分有相关性,而在发酵过程中培养基全氮、有机碳、碳氮比例的消长规律与对昆虫的毒性未见一定的相关性。在发酵过程中,同一菌株在同一培养基中的菌数与试虫毒性成正相关;而不同菌株在同一培养基或同一菌株在不同培养基中菌数与对试虫的毒性无关。因此,单纯以活孢子数为指标评价苏云金杆菌不同菌株和不同发酵条件下的杀虫活性是不科学的。     

苏云金杆菌发酵条件的研究——Ⅱ.83002菌株在14L发酵罐发酵条件与制剂生产

以苏云金杆菌83002菌株在14L发酵罐条件下研究表明：培养温度和搅拌速度对菌数表现出一定的相关性，但对培养基PH变化规律影响不大；培养基灭菌前的初始PH值高低对发酵过程中PH变化规律有一定影响，培养温度、搅拌速度、培养基灭菌前PH值高低对酵过程中培养基C、N变化的规律均表现出一定影响。上述结果，为苏云金杆菌发酵条件参数提供了依据，确立了各种剂型的制备工艺。     

我国西北干旱地区森林土壤中苏云金芽孢杆菌生态分布

对地处我国西北干旱地区新疆、甘肃、宁夏三省（区）内的１１个自然保护区－－哈纳斯、小叶白蜡、天山云杉、野核桃、塔里木、东大山 山、六盘山、崆洞山、兴隆山、莲花山等自然保护区采集的２６０个森林土壤样品,进行了生态因子调查：分析了土壤ＰＨ、含水量、水解Ｎ、有效、速效Ｋ、全Ｎ、有机质;研究了芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌数量和种类生态分布。共分离苏云金芽孢杆菌４２株,其出土率和分离率分别为１１．５３％和２．１８     

苏云金芽孢杆菌的H-血清型鉴定

<正> 苏云金芽孢杆菌发现于二十世纪初期,但由于该菌在变种间鉴定和分类学中出现一些混乱现象,使之做为害虫生物防治手段发展缓慢。这里介绍的血清学方法是以苏云金芽孢杆菌的鞭毛抗原(H 抗原)为基础。利用血清学方法辅助于生物化学特性,对苏云金芽孢杆菌进行清晰的鉴定和分类。该方法的主要优点是敏感,特异性强,可靠和迅速。一、H—血清型方法1.H—抗原悬浮液的制备该方法依赖于细菌的鞭毛(细菌营养细胞     

我国四个自然保护区森林土壤中苏云金芽孢杆菌的分布

从我国四个不同立地带——长白山、百花山、鼎湖山、尖峰岭自然保护区,采集到林下0～5cm土层土壤样品75个,分离到苏云金芽孢杆菌39株。其中芽孢杆菌的总数量和苏云金芽孢杆菌的出土率和分离率有所差异,pH偏中性和含水量稍高的土壤,菌数较高;而与所测的各种土壤养分无明显相关。对39株苏云金芽孢杆菌的鉴定:17株属库尔斯塔亚种,6株属松蠋亚种,16株未定名。毒力测定表明:对杨扇舟蛾和马尾松毛虫幼虫的致死率在50％以上的菌株约占70％;对榆蓝叶甲和黄粉甲幼虫均无明显杀虫活性。     

我国不同森林立地带Bt分离株杀虫晶体蛋白及基因分析

利用苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系和SDS PAGE方法分析了来自我国不同森林立地带土壤中的 72株苏云金芽孢杆菌的cry1、cry2、cry3、cry4、cry5、cry8、cry9、cry10、cry11、cry1I等 10类基因类型和表达蛋白 ,并进行了杀虫活性的生物测定。研究表明 :同时含有cry1,cry2 ,cry1I 3类基因的有 2 1株菌 ,6株菌含有cry1,cry2类基因 ,4株菌含有cry1和cry1I类基因 ,只含有cry1基因的有 1株 ,cry2类基因的 4株 ,36株菌不含所鉴定的 10类cry基因。同时证明 ,绝大多数含有cry1基因的菌株表达了 130kDa蛋白 ,含有cry2基因的菌株表达了 6 0kDa蛋白。生物活性测定表明 ,共同含有cry1Aa、cry1Ac和cry2基因的菌株对棉铃虫幼虫具有较强的杀虫活性 ,只含有单一基因和不含上述基因的菌株杀虫活性较弱。