与苹果柱型基因（Co）紧密连锁的分子标记的筛选

苹果的柱型性状很适合于现代化的矮密栽培,所以成为苹果生产上有重要利用价值的农艺性状.寻找与柱型基因(Co)紧密连锁的分子标记,就可以借助于标记辅助选择的手段来提高柱型苹果的育种效率.本研究以短枝富士、舞姿(柱型)及其F1分离群体为试材,用分离群体分组分析法,筛选到了Co基因的一个AFLP标记,群体中的共分离分析结果表明,该标记与Co基因位点的重组率为3.3±2.3%.Southern分析结果显示,此标记在苹果基因组中为单拷贝.     

利用高分辨率熔解曲线（HRM）分析梨微卫星标记

 以西洋梨（Pyrus communis L.）‘Nain Vert’的一个矮生型实生系与‘茌梨’（Pyrus bretschneideri Rehd.）的F1杂交群体为试材,对分别源自梨和苹果基因组的4个微卫星（即SSRs）序列多态性进行了高分辨率熔解曲线（high resolution melting,HRM）分析。结果显示,在测试群体中,TsuENH042和Hi15a13存在两种分型,TsuENH081存在3种分型,而Hi08d09只有1种类型。因此,HRM分析技术可以作为筛查果树微卫星标记多态性或对其进行基因分型的有效手段在相关研究中加以应用。     

果树综合生产—国外果树生产新潮流

果树综合生产──国外果树生产新潮流莱阳农学院戴洪义，于士梅果树综合生产（ＩＦＰ，ＩｎｔｅｇｒａｔｅｄＦｒｕｉｔＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎ），又称果树综合栽培（ＩＦＧ，ＩｎｔｅｇｒａｔｅｄＦｒｕｉｔＧｒｏｗｉｎｇ），是继有机农业（ＯｒｇａｎｉｃＦａｒｍｉｎｇ...     

苹果甘露糖结合蛋白2基因(MdMBP2)的克隆及其重组蛋白的活性研究

甘露糖结合蛋白(MBP)是一类包含B-lectin结构域的植物凝集素,通过与糖的结合参与多种生理过程,包括细胞和细胞之间的相互作用以及寄主和病原之间的相互作用等.为了探讨苹果甘露糖结合蛋白在抗轮纹病防御反应中的作用,本研究从苹果(Malus demestica)枝条韧皮部cDNA鉴定了一个甘露糖结合蛋白的编码基因,命名为MdMBP2(GenBank accession No.JX126857).该基因全长1 553 bp,开放阅读框为1 368 bp,编码一个由455个氨基酸残基组成的蛋白质,分子量和等电点分别为50.4 kD和8.68.该蛋白的氨基酸序列包含保守的B-lectin结构域,N端有27个氨基酸残基组成的信号肽,C端有一个PAN-apple结构域.同源性和系统演化分析显示,MdMBP2蛋白与葡萄(Vitis vinifera)和大豆(Glycinemax)的表皮分泌蛋白(EP)及拟南芥(Arab idopsis thaliana)的甘露糖结合蛋白具有较高的序列相似性.包含B-lectin结构域的蛋白可以分成两个群,MdMBP2属于Class Ⅰ,与ClassⅡ蛋白相比,Class Ⅰ缺少SLP结构域和蛋白激酶结构域.利用荧光定量PCR技术检测MdMBP2基因的表达,发现MdMBP2基因在被检测的几种组织中均有不同程度的表达,但在皮和叶中的表达量较高,这种表达模式表明,MdMBP2可能参与多种生理途径.另外,轮纹病病原菌(Botryosphaeria dothidea)侵染能诱导MdMBP2转录本的积累,且其时序表达变化与轮纹病发病过程相关,暗示该基因参与了苹果抗轮纹病的防御反应.通过体外重组表达MdMBP2基因的重组蛋白,并用重组蛋白进行糖结合实验,发现MdMBP2蛋白能与真菌细胞壁组分高甘露糖型聚糖和甘露寡糖有较高的结合活性,表明MdMBP2蛋白可能参与病原真菌的识别.本研究分离鉴定了一个新的苹果甘露糖结合蛋白的编码基因,认为该基因参与苹果对轮纹病病原的防御反应,可能在寄主对病原的识别过程中发挥作用.     

4种砧木对富士苹果果实大小和品质的影响

以4种砧木（A1、A1d、M26和平邑甜茶）嫁接的烟富6和烟富3苹果为试材,对其果实大小及品质进行了比较。结果表明,烟富3或烟富6,嫁接在A1、A1d砧木上的单果质量和果实硬度均较高,但不同砧木上的果实果形指数无显著差异;嫁接在A1d砧木上的果实可溶性固形物含量较高;维生素C含量以烟富6/A1和烟富3/A1d组合较高;各种糖组分含量以烟富6/A1d和烟富3/平邑甜茶组合较高。可滴定酸含量均以M26砧穗组合最高,以烟富6/A1d和烟富3/A1含量最低,且差异显著。     

生食苹果品种又添新奇葩

莱阳农学院苹果育种课题组,于1995年利用人工杂交育种技术,经过10年的研究,成功培育出了6个拥有我国自主产权的苹果生食新品种。这6个新品种已于2003年通过了山东省科技厅组织的专家鉴评,并于2004年5月通过了国家农业植物品种权保护初审。现将这6个生食苹果新品种简要介绍如下。1福早红(暂定名)亲本为特拉蒙×新红星。树体紧凑型。自然坐果率高,适宜授粉品种为富士和嘎拉等。果实在烟台地区8月中旬成熟,单果重225.5g。果实圆锥形,果面着浓红色。果实硬度9.4kg/cm2,可溶性固形物含量12.0%,可滴定酸0.15%。果肉松脆,汁液中多,味甜,香气浓郁,品…     

欧洲甜樱桃品种的授粉试验

对9个甜樱桃品种进行授粉试验的结果表明：拉宾斯、斯坦勒和佐藤锦为高度自花不实品种(自交结实率为0.1％)；红灯的适宜授粉品种为那翁、滨库、雷尼尔等；佐藤锦的适宜授粉品种为雷尼尔、滨库、拉宾斯等；先锋的适宜授粉品种为红灯和雷尼尔。红灯用斯坦勒做授粉树，坐果率为25％，但反交时仅为3％。在多品种混栽园，各品种的自然授粉坐果率均较高。     

苹果原生质体培养再生愈伤组织

以苹果试管苗叶片为原生质体分离材料,对影响原生质体分离和培养的因素进行了研究。结果表明适合叶片酶解的酶液组成是Cellulase-Onzuka R-10 0.8% + Pectinase 0.5% + PVP 1% + 甘露醇 0.65 mol/L + MES0.1%;以改良MT + BA 1.0 mg/L + 2,4-D 0.2 mg/L + 甘露醇0.65 mol/L + Vc 5.0 mg/L + Glu 500 mg/L + CH 100 mg/L + ME 500 mg/L + Arg 50 mg/L为培养基对原生质体进行培养,固液双层培养效果较好,最适培养密度为1×105 (个/ml),培养1-2 d原生质体变形,3-4 d第一次分裂,2 w分裂3-5次。平邑甜茶原生质体一个月后形成微细胞团,两个半月形成肉眼可见的微愈伤组织。鲁加5号和M7均只形成7-10个细胞的细胞团,嘎拉未见细胞分裂。     

苹果SBP基因家族生物信息学分析

首先利用生物信息学方法对苹果42条SBP蛋白序列的系统发生和SBP基因组定位进行分析,然后对其氨基酸组成成分、理化性质以及二级和三级结构进行预测和分析,同时还分析了苹果与拟南芥的SBP基因家族之间的联系。结果显示着42条蛋白序列与拟南芥16条SBP蛋白序列一起被分成了7个亚族,拟南芥与苹果SBP基因间具有较高的保守性。基因组定位结果显示42条SBP基因分布在12条染色体上。研究还发现不同亚族间氨基酸数目、氨基酸序列疏水性存在一定的差异;二级结构预测分析发现,42条氨基酸序列以随机卷曲和α-螺旋为主要组成部分,而且42条氨基酸序列三维结构相似。     

苹果对炭疽菌叶枯病抗性遗传的研究及其分子标记筛选

利用两个对炭疽菌叶枯病高抗的苹果品种（系）‘富士’和‘QF-2’及两个高感品种‘金冠’和‘嘎拉’为亲本配制了4个杂交群体‘富士’ב金冠’,‘金冠’ב富士’,‘嘎拉’ב富士’,‘富士’בQF-2’。以F1群体植株为试验材料,对苹果炭疽菌叶枯病的抗性进行鉴定评价和遗传分析。结果表明,4个群体中抗、感植株的分离比分别符合1︰1,1︰1,0︰1和1︰0的理论比值,初步推测苹果抗炭疽菌叶枯病性状受隐性单基因控制,抗病基因型为rr,感病基因型为RR和Rr。以‘金冠’ב富士’F1群体为试材,采用分离群体分组分析（BSA）方法,通过对均匀覆盖苹果染色体组的500对SSR引物的筛选,获得了一个与抗病性状相关的分子标记S0506206-24,该标记与抗性基因位点的连锁距离为9.8 cM。