番茄筋腐病的发病机理、原因与防治

筋腐病是发生在番茄果实上的一种生理性病害,筋腐病所造成的病果称筋腐果、条腐果、条斑果、黑条果等.过去,很少有人对这种病害重视,从70年代末,筋腐病有少量发生.     

种子老化对萝卜早期生长生理生化的影响

研究了人工老化引起的萝卜种子发芽率、发芽指数、萝卜生长早期一系列酶活性和蛋白质的变化。结果表明,在浸种后生长3天,酶活性及蛋白质含量随着老化时间的延长而降低;在生长7天和28天的幼苗中,酶活性及蛋白质含量高于对照,且老化时间越长的种子,酶活性和蛋白质含量越高。     

萝卜高频再生体系的建立

通过基因型筛选,选出具有较高再生潜力的萝卜品种,并对其进行了外植体类型、琼脂浓度、激素配比等试验,比较了不同浓度的AgNO3、ABA、TDZ和抗生素对萝卜再生的影响,在改良MS+6-BA 5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂9%+AgNO35 mg/L+ABA 0.3 mg/L+TDZ 0.2 mg/L培养基上,建立了再生率达80.2%的萝卜再生体系。     

大白菜pol CMS育性恢复基因的表达分析

 为进一步探明pol CMS育性恢复基因作用的分子机理,利用数字基因表达谱技术,选用不育系与恢复系杂交的F₂代分离群体,对大白菜polCMS育性恢复相关基因的差异表达进行了分析,并选取部分基因进行了实时荧光定量PCR验证。共有2 826个基因差异表达,其中441个上调表达,2 385个下调表达。GO功能注释表明,差异表达基因显著富集的细胞位置为细胞质、细胞器及大分子复合物等位置,细胞器包括线粒体、叶绿体及质体等,分子功能主要为核酸外切酶的活性,参与的生物过程是花粉壁的形成和组装。与pol CMS显著相关的通路主要是核糖体、糖和氨基酸代谢、核苷酸切除和修复、RNA降解等通路。表达谱和RT-PCR结果表明恢复基因主要通过下调表达调控育性恢复,有4个差异表达基因与育性恢复密切相关。     

大白菜eIF(iso)4E.a假基因突变体的鉴别及相关检测标记的开发

马铃薯Y病毒在侵染寄主时与eIF4E或eIF(iso)4E的相互作用是一种普遍机制。大白菜病毒病主要病源是TuMV,TuMV在侵染大白菜时能同时与eIF4E和eIF(iso)4E发生作用,且在大白菜基因组中上述两基因各有三个拷贝。因而鉴定大白菜资源在上述两个位点的多样性、发现各位点的功能缺失突变体至关重要。采用同源克隆和Tail-PCR技术,鉴定了12份大白菜抗/感TuMV材料中eIF(iso)4E.a位点的多样性。结果表明：5份材料的eIF(iso)4E.a基因组序列完整,但与已知序列相比均存在显著差异,包含3种新的单倍型;7份材料的eIF(iso)4E.a缺失了第四、五外显子及3'端约1 kb的大片段,是个假基因。同时开发了鉴别完整基因与假基因的共显性标记。该策略为鉴定大白菜中eIF4E和eIF(iso)4E其他位点的多样性提供了借鉴,开发的相关检测标记可以作为标记辅助选择的工具用于创新抗病毒大白菜新种质及培育抗病毒大白菜新品种。     

萝卜中莱菔子素含量及其在冷藏过程中的变化分析

采用高效液相色谱法测定了43份萝卜材料肉质根中莱菔子素的含量,并分析了4份不同皮色和肉质色萝卜材料冷藏过程中莱菔子素含量和黑芥子酶活性的变化。结果表明:43份萝卜材料肉质根中均可检测到莱菔子素成分,其含量范围为43.26~468.27μg/g,平均含量160.23μg/g。冷藏4个月后,萝卜肉质根中黑芥子酶活性和莱菔子素含量均显著下降,与采收时相比,16Q1、16Q56、16Q62和16Q154中黑芥子酶活性分别下降了61.41%、68.96%、44.60%和81.39%,莱菔子素含量分别下降了26.74%、74.77%、50.04%和81.71%。通过本试验检测发现,莱菔子素含量较高的种质为红皮白肉类型,这为萝卜新品种选育及品种改良提供了依据和材料;明确了冷藏超过2个月后,萝卜肉质根中的莱菔子素含量和黑芥子酶活性大幅下降,今后需要发展新的贮藏技术以满足长期贮藏的要求。     

引进的日本、韩国春萝卜种质性状鉴定与评价

针对我国耐抽薹种质缺乏现状,从日、韩引进了12份春萝卜种质。为合理利用这些种质,进行了春季大田田间性状鉴定、人工春化耐抽薹鉴定、春季分期播种耐抽薹性鉴定、花期性状调查及不育种质胞质类型的分子鉴定。结果表明,除了从日本引进的1份种质不耐抽薹,其余11个种质耐抽薹性、早熟性等性状均适合春季播种。该鉴定结果,对合理、有效利用这些引进种质提供了理论依据。     

萝卜抽薹基因连锁的AFLP和SCAR分子标记鉴定

本文运用AFLP分子标记技术,结合BSA法,对萝卜抽薹基因相连锁的AFLP分子标记进行研究,获得两个与萝卜耐抽薹基因相连锁的AFLP标记,遗传距离分别为14.6 cM和9.1 cM.序列测定和Blast分析表明,标记ACG-CAG(123 bp)与拟南芥中锌指蛋白3(zinc finger protein 3,ZFP3)的cDNA同源性为89%,期望值为6e-23;标记ACT-CTG(175 bp)与拟南芥中的Copia类反转录转座子AtRE1基因的同源性为83%,期望值为4e-42.并将其中一个标记转化为简单易行的SCAR标记,遗传距离为7.5 cM.     

萝卜种质资源抽薹性状鉴定及评价

为筛选耐抽薹萝卜种质,丰富我国耐抽薹萝卜资源,本研究对105份不同类型的萝卜种质进行人工春化室内抽薹鉴定和春季大田分期播种抽薹鉴定。结果表明,国内红皮白肉萝卜资源中有耐抽薹种质;在春化过程中对日照、温度敏感的种质,两种抽薹鉴定方法所得结果存在差异;杂交、回交等育种措施对耐抽薹特性变化有影响。     

大白菜RAPD反应条件的优化

RAPD是作物主要农艺性状分子标记及遗传多样性研究的一项重要技术。为了适应大白菜反应体系,本试验以大白菜品种413、96及其F1为试材,对影响RAPD扩增的模板DNA用量、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶浓度、dNTPs浓度、引物浓度等因素进行了优化,结果如下:20μl PCR反应体系,30 ng(1.5μl)DNA模板,3 mmol/L Mg2+,0.01 U/μl Taq DNA聚合酶,0.4 mmol/L dNTPs,0.8μmol/L引物为最佳反应浓度。