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11.
为构建TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系,利用CRISPR/Cas9系统在TRDMT1基因第1个外显子前插入BGH Ploy(A)转录终止序列,终止TRDMT1基因表达。利用重叠PCR方法合成sgRNA序列,构建TRDMT1-gRNA载体及含不同抗生素基因的同源重组载体TRDMT1-LOXN-Puro和TRDMT1-LOXP-Neo;将同源重组载体TRDMT1-LOXN-Puro、TRDMT1-LOXP-Neo及TRDMT1-gRNA、Cas9表达载体MLM3613共转染HEK293细胞;利用Puromycin和Neomycin抗生素筛选细胞,通过RT-qPCR检测TRDMT1基因转录终止效率。通过细胞生长曲线和划痕试验检测TRDMT1基因敲除对HEK293细胞增殖和迁移能力的影响。结果表明:成功构建了TRDMT1-gRNA载体及TRDMT1-LOXN-Puro、TRDMT1-LOXP-Neo同源重组载体;与正常HEK293细胞相比,试验组TRDMT1表达量仅为1%;TRDMT1基因敲除后显著影响HEK293细胞增殖和迁移。这一研究通过CRISPR/Cas9技术成功构建了TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系(HEK293-TKO),为RNA甲基化研究提供了一种有效的工具;TRDMT1基因可能与细胞的增殖和迁移有关。 相似文献
12.
土壤铅、镉污染及其微生物修复研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
随着经济的飞速发展,受到重金属污染的地区越来越多,环境问题也日益突出,特别是铅、镉等常见的重金属元素,对土地造成的污染尤为严重.与微生物修复技术相比,常见的物理化学修复技术易造成二次污染.而微生物修复以污染小、成本低等特点成为热门的重金属土地污染修复技术,越来越受到关注.研究综述了铅、镉污染现状及其微生物修复技术在土壤修复中的应用,包括微生物修复的机理、优缺点及今后的发展方向. 相似文献
13.
14.
1头母斑点狗2岁,体重25公斤。该犬子宫颈及部分阴道脱出,从阴门突出,呈鹅卵大至拳头大的红色带状物,不能缩回,而且该犬一直处于发情状态。保定母犬,用0.05%高锰酸钾溶液将脱出的子宫颈及部分阴道清洗后进行还纳整复,然后放入金霉素胶囊3~4枚,并注射子宫收缩剂,在阴门上作荷包缝合。经整复缝合保守治疗后,该犬又反复发作。母犬起卧不安,不仅容易造成子宫破裂,而且易将子宫系膜及血管扯断导致阴道全部脱出。为彻底根治疾病,挽救母犬生命,拟实施子宫卵巢全切除手术。 相似文献
15.
家具生产原材料已从全实木时代进入了一个多种替材料与之并存的新时代。同时绿色的家居环境也要求生产“绿色家具”,随着人造板工业的发展,中密度纤维板、刨花板、集成材、人造薄木等材料将成为家具制造的主要原材料。 相似文献
16.
17.
安徽省是我国最重要的冬小麦生产省份之一,研究其灾损风险的时空变化对区域防灾减灾有着重要意义。依托74个区县1973—2014年冬小麦单产资料构建了气候减产率的逐年序列,采用空间计量分析与气候诊断探讨了灾损风险的时空分布特征。结果表明:(1)基于多年平均减产率,高灾损区域的空间分布呈现出明显的年代际变化,其中沿淮地区是安徽省冬小麦灾损的首要高风险区域;(2)基于重心迁移模型,1973—2014年灾损重心经度的年际变化呈现出强烈的短期振荡,而重心纬度则呈现出显著的减少趋势;(3)基于Mann-Kendall趋势检验与Hurst指数,1973—2014年安徽省北部的冬小麦灾损风险呈现出较强的下降趋势,而南部的灾损风险呈现出上升趋势,且未来短期仍将持续该趋势。总体而言,安徽省冬小麦灾损风险的时空演变呈现出显著的南北差异格局,其中南部将会是灾损的高风险区域。 相似文献
18.
党的十八大报告将生态文明建设放在了与经济建设、政治建设、文化建设和社会建设同等重要的地位,2013年9月,水利部和江苏省水利厅分别要求建设水生态文明试点城市。基于此,本文以江阴市为例,从水安全、水环境、水生态、水文化和水管理五个方面进行了水生态文明城市建设的探索,提出了保障水安全、改善水环境、修复水生态、彰显水文化和提升水管理的具体措施。效益评估表明,江阴市将基本建成独具特色的水生态文明城市。 相似文献
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20.