A型塞内卡病毒VP1蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

A型塞内卡病毒(SVA)是一种新发传染病病原。研究旨在对SVA的衣壳蛋白VP1进行原核表达,并制备其多克隆抗体。以SVA广西分离株SVA-GX01(GenBank登录号：MK039162)RNA为模版,通过RT-PCR扩增结构蛋白VP1基因,构建重组质粒pET-32a-VP1并转化表达菌株大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。在非变性条件下,将纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。纯化的多克隆抗体进行间接ELISA测定效价,同时进行Western blot与间接免疫荧光分析。结果表明,重组蛋白pET-32a-VP1在大肠杆菌BL21(DE3)以可溶性与包涵体两种形式表达,分子量约为49 kDa。纯化后多克隆抗体效价高达1∶64 000。Western blot与间接免疫荧光(IFA)分析显示,多克隆抗体能跟SVA抗原特异性结合。重组SVA-VP1蛋白及其多克隆抗体的成功制备为猪塞内卡病毒血清学检测方法的建立提供了良好的生物材料。     

南昌市近郊集约化农业利用下土壤酶活性与重金属污染关系的研究

在农学试验站的水田和菜地、蛟桥、黎家、扬子洲,凤凰洲等菜地取样,并对土壤样品进行重金属含量和酶活性的测定及分析。结果表明：在农业集约化利用下,土壤中不同重金属对土壤不同深度的土壤酶活性有不同的影响。重金属镉、铅、铜、锌与土壤脲酶达到显著正相关。镉、铅与土壤蛋白酶活性达到显著正相关,而其它的重金属与土壤酶活性的相关性不显著。土壤酶的活性与土壤肥力状况有显著的相关性。土壤速效钾与土壤重金属呈极显著相关。     

白桂木的种群结构和空间分布格局研究

采用空间序列代替时间序列的方法,对白桂木5个种群进行统计分析,编制种群的特定时间生命表,应用聚集强度指数进行种群分布格局分析.结果表明:白桂木种群结构呈纺锤形,幼苗严重不足,种群有衰退趋势;存活曲线基本接近DeeveyⅡ型;种群分布格局整体呈聚集分布.     

猪流行性腹泻病毒特异性SIgA 间接ELISA检测方法的建立及初步应用

以乳汁中SIgA特有的成分SC蛋白为研究对象，运用基因克隆、原核表达等方法，制备兔抗猪SC多克隆抗体，使用猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV) S截短蛋白进行包被后，初步建立了一种可以检测母猪初乳中PEDV特异性SIgA抗体的ELISA方法。结果显示，PEDV特异性SIgA检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点。结果表明，该方法适用于检测临床中SIgA。该方法的成功建立为生产中评估仔猪从乳汁中获得SIgA的效率及制定更为完善的母猪免疫程序提供了有效的技术支持。     

宜宾市红茶产业发展现状及对策

通过调研宜宾市红茶产业发展现状，分析现阶段宜宾红茶产业存在的问题，结合红茶产业发展趋势，对宜宾市红茶产业的出路进行深入探讨，提出宜宾红茶产业可以通过“挖掘文化资源、提高加工技术、开发特色产品以及强化品牌塑造”等进行改进，以推动宜宾市红茶产业进一步发展，为川红工夫的高质量发展提供思路。     

源远流长--浅谈中国古典园林理水艺术

文章概述了中国古典园林理水的审美思想，包括山水比德，道法自然，风水学、诗情画意、涵蕴意境等方面的美学观念。中国古典园林中水体的形态包括湖、池、沼、溪、涧、泉等。理水的艺术手法包括对水形、水色、水声以及理水布局、动静结合等方面的处理方法。     

以“认识病毒，防控感染”为教学理念的《病毒学》课程实践探索

《病毒学》课程是动物医学专业的基础课程之一，该课程概念抽象，内容繁杂，深奥难懂等特点，给教学带来了一定困难。因此，在新冠病毒全球流行的大形势下，将新发再发的病毒性传染病最新进展引入到《病毒学》选修课程教学中，帮助学生理解和掌握该课程的脉络和知识结构，由点到面扩展病毒学课程的知识点，以“认识病毒，防控感染”为主要中心思想，宣传新冠疫情防控知识点，一方面激发学生的学习兴趣，一方面活学活用；同时理论结合临床实践，再次加深对病毒的认知，以此为病毒学课程教学积累丰富的经验。     

表达O型口蹄疫病毒VP1蛋白的重组塞内卡病毒的构建与鉴定

A型塞内卡病毒(SVA)是近年来新流行的一种传染性病原，与口蹄疫病毒(FMDV)具有相似的基因组结构，所致临床症状也十分相似。为了研发一种新型的基因工程活载体疫苗，用于预防塞内卡病毒感染和口蹄疫，以SVA全长感染性克隆pSVA-GX01为基础，在SVA 2A与2B基因之间插入O型FMDV的VP1基因，经双酶切及测序鉴定，成功获得了重组质粒pSVA-FMDV-VP1-O。将重组质粒转染BHK-21细胞，拯救获得重组病毒rSVA-FMDV-VP1-O,间接免疫荧光试验鉴定显示，该重组病毒可在细胞中表达O型FMDV的VP1蛋白。对该重组病毒进行体外生长增殖特性以及遗传稳定性分析表明，重组毒株和亲本毒株在BHK-21细胞上具有相似的增殖特性，插入的FMDV VP1基因可在细胞传代过程中稳定存在6代。研究结果为开发以塞内卡病毒为载体构建表达口蹄疫病毒VP1蛋白的重组基因工程活载体疫苗提供了参考。     

多重PCR对禽分枝杆菌亚种鉴定的初步应用

为了建立禽分枝杆菌多重PCR方法，给禽分枝杆菌亚种鉴定及禽结核病的诊断提供参考。本实验根据国外报道的诊断方法设计4对特异性引物，选用我国禽结核参考菌株（CVCC 68201）基因组DNA为模板，优化了退火温度，测定了DNA最小检测量，并进行了特异性检验。采用优化好的多重PCR体系，对国家兽医微生物菌种保藏中心保存的禽分枝杆菌标准菌株进行检测和分类。实验结果表明，禽结核参考菌株（CVCC 68201）能很好的扩增出577 bp（IS901基因片段）、385 bp（IS1245基因片段）和140 bp（dnaJ基因片段）三条目的条带，基因组DNA的最小检测量为0.38 ng/μL，目的条带在退火温度50 ℃～62 ℃之间均能得到有效扩增。对23株禽分枝杆菌菌株检测，并设立牛分枝杆菌作为阴性对照，最终将禽分枝杆菌菌株分为三大类：禽亚种/森林土壤亚种、副结核亚种、人猪亚种，与国家兽医微生物菌种保藏中心的分类结果相比不仅一致且更加详尽而有临床意义。因此，基于分子生物学方法建立的多重PCR方法可以对禽分枝杆菌亚型进行快速鉴定并对禽结核病的诊断提供参考。