柴胡提取物对热应激奶牛营养物质表观消化率和瘤胃发酵参数的影响

为研究添加不同水平的柴胡提取物对热应激条件下泌乳后期荷斯坦奶牛营养物质表观消化率和瘤胃发酵参数的影响,采用随机区组设计,按照产奶量、泌乳天数及胎次相同的原则将48头荷斯坦奶牛随机分为4组,每组12头,各组在基础日粮中分别添加0、0.5、2.5和5.0g/kg柴胡提取物(干物质基础),试验期9周。结果表明:热应激条件下,柴胡提取物对瘤胃pH,氨氮含量,丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸浓度,乙酸/丙酸及营养物质表观消化率均无显著影响(P0.05);0.5g/kg组的菌体蛋白含量显著高于2.5和5.0g/kg添加组(P0.05),添加5.0g/kg柴胡提取物降低瘤胃总挥发性脂肪酸(P=0.05)和乙酸浓度(P=0.06),不利于瘤胃发酵。因此,柴胡提取物推荐添加剂量不宜超过5.0g/kg。     

猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活参数研究

本研究比较了按不同方法贮藏的培养液对猪卵母细胞体外成熟及成熟后孤雌激活对胚胎发育的影响。此外,还探索了针对初情期前母猪体外成熟卵母细胞和孤雌激活方案。结果如下：①1.4 kv/cm、100 μs、1DC电激活后,卵母细胞死亡率明显高于2.0 kv/cm、30 μs、1DC和2.0 kv/cm、60 μs、1DC处理组,但激活后胚胎卵裂率和囊胚率相似;②使用钙离子载体和6-二甲基氨基嘌呤（Ionomycin+6-DMAP）处理后,胚胎卵裂及囊胚率都明显不如电激活处理;③6次独立试验结果证明：经4℃冷藏和-20℃冷冻保存的培养液用于猪卵母细胞培养,其体外成熟率、孤雌激活后的卵裂率及囊胚发育率无显著差异（P＞0.05）。说明成熟卵在2.0 kv/cm、30 μs、1DC或者 2.0 kv/cm、60 μs、1DC电击参数激活下可以降低死卵率;按本试验设计的电激活方案处理初情期前母猪成熟卵优于化学激活;在-20℃冷冻保存猪卵母细胞成熟液是可行的。      

激活HH信号通路抑制猪ADSCs向脂肪细胞的分化

为探讨HH信号通路在脂肪细胞分化过程中的作用机制,以猪脂肪间充质干细胞(ADSCs)为材料,应用油红O染色法检测ADSCs成脂分化过程中的形态变化;采用荧光定量PCR及Western Blot的方法检测HH通路Gli1及脂肪细胞分化转录因子的时序表达。通过嘌呤衍生物2,6,9-三元取代嘌呤(Purmorphamine,PM)激活猪ADSCs细胞中HH信号通路,探讨体外激活HH信号通路对猪ADSCs向脂肪细胞分化的作用及其机制。结果显示,在成脂诱导分化的过程中,经5μmol/mL的PM持续处理,细胞中Gli1的mRNA及蛋白表达量增加;猪ADSCs向脂肪细胞分化的数目减少、细胞内甘油三酯含量降低;脂肪细胞分化关键转录因子C/EBPα和PPARγ的表达受到抑制。以上结果表明,激活HH信号通路可通过下调PPARγ和C/EBPα的表达抑制猪ADSCs向脂肪细胞的分化。     

牛卵泡发育及其调控

扼要介绍了牛卵泡发育的一般规律,总结了近年来牛卵泡发育及其调控方面的研究成果,为进一步的研究工作提供了参考资料。     

小鼠干扰素应答基因(Ifrg15)的克隆、原核表达及其融合蛋白的亲和纯化

为研究一个可能的干扰素应答基因(interferon responsive gene 15,Ifrg15)所编码蛋白质的生物学功能,对昆明小鼠(Mus musculus)基因组DNA进行PCR扩增获得Ifrg15(393 bp),并将其克隆到pGEM-T载体,经测序鉴定后用EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ酶切下Ifrgl5基因片段并和双酶切后的表达载体pET-41(c)进行连接,然后转化入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受态细胞.对重组克隆用IPTG诱导融合蛋白的表达,并进行分离纯化.结果表明,本实验在E.coli BL21(DE3)菌株中成功地高效表达、并在变性亲和层析条件下成功纯化了GST&6xHis-Ifrg15融合蛋白.     

干细胞因子对小鼠附植前胚胎体外发育的影响

为优化胚胎体外培养体系,提高胚胎体外培养发育率和发育质量,以昆明小鼠体内受精胚、体外受精胚和孤雌激活胚为研究对象,研究不同浓度干细胞因子对小鼠不同来源胚胎体外发育的影响。结果表明:在KSOM培养液中,小鼠自然受精胚、体外受精胚和孤雌激活胚的卵裂率和桑椹胚率均无显著差异(P0.05),但IVN胚和IVF胚的囊胚发育率及囊胚细胞总数显著高于孤雌激活胚;培养液中添加不同浓度的干细胞因子对小鼠自然受精胚和孤雌激活胚的卵裂率、桑椹胚率、囊胚发育率和囊胚细胞总数都没有显著的影响(P0.05),但干细胞因子浓度为100ng·mL-1时,小鼠体外受精胚的桑椹胚率和囊胚发育率显著高于对照(P0.05)。     

肠道微生物与家畜生殖功能研究进展

肠道微生物群作为动物体内一个复杂而庞大的微生态系统,有着以细菌为主的数千种不同的种属。它们与宿主多个组织、器官存在密切的相互作用,能够调控宿主的能量代谢,影响机体免疫、内分泌和生殖功能。本文概述了家畜肠道微生物群随着宿主生长发育和不同生殖生理期而变化的规律,对性腺激素、精子发生、发情周期、妊娠泌乳和生殖疾病的影响,并指出肠道微生物群研究存在的问题,为肠道微生物在家畜生殖的功能研究提供参考。     

山羊FST慢病毒载体构建及其对卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响

研究卵泡抑素(FST)对山羊卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响。采集山羊卵巢组织、分离培养原代卵巢卵泡颗粒细胞,RT-PCR克隆山羊FST,设计shRNA片段,构建慢病毒过表达载体和干扰载体,感染原代卵巢卵泡颗粒细胞,qPCR技术检测过表达与干扰的效果, CCK-8检测细胞的增殖效果。结果显示:分离培养的山羊卵巢卵泡颗粒细胞经促卵泡素受体(FSHR)免疫荧光鉴定,阳性率为95%;慢病毒感染颗粒细胞时荧光蛋白的表达占比80%;qPCR验证FST过表达和干扰慢病毒载体的效果均显著(P0.05);过表达FST显著(P0.05)抑制卵巢卵泡颗粒细胞的增殖,干扰FST显著(P0.05)促进卵巢卵泡颗粒细胞增殖。笔者分离出山羊卵巢卵泡颗粒细胞,成功构建FST过表达和干扰两种慢病毒载体,感染结果表明FST能够抑制山羊卵巢卵泡颗粒细胞的增殖,为进一步研究FST在哺乳动物卵泡发育调控中的作用及其机制提供了基础资料。     

羊胎盘复方制剂对小鼠的毒性研究

为了检测羊胎盘提取物(GPE)及其复方制剂(GPP)的安全性,试验对200只小鼠进行急性毒性试验和30 d饲喂试验。结果表明:在急性毒性试验中,各试验组小鼠采食、排便无异常,器官无病变。在30 d饲喂试验中,各试验组小鼠饲料利用率、血常规及血液生化指标均差异不显著(P>0.05);各试验组小鼠内脏器官检查无病变,病理组织学检查无异常;但GPPⅡ单倍剂量组小鼠脾脏重显著高于对照组与高倍剂量组(P<0.05),并且GPPⅡ单倍剂量组小鼠脾脏重与体重比值与对照组、GPE组之间差异显著(P<0.05)。说明羊胎盘提取物及其复方制剂对动物无毒副作用,复方制剂对动物免疫器官有改善作用。     

水温对前鳍高原鳅幼鱼生长和存活的影响

为了探究养殖水温对前鳍高原鳅幼鱼生长和存活的影响,实验以初始体长(8.72±0.55)mm,初始体重(0.081 4±0.002 7)g的30日龄前鳍高原鳅幼鱼作为研究对象,设计了8、13、18、23和28℃五个温度梯度,进行为期30天的培育。结果显示,8、13、18℃组之间的存活率差异不显著;当水温超过18℃后,存活率逐渐下降,采用二次方程回归拟合了温度和存活率之间的关系(y=-0.16x²+3.893x+75.786,R²=0.964 2),最适生存水温为12.17℃。在生长方面,幼鱼的生长随温度的增大呈现先增大后减小的趋势变化。温度在8～18℃时,随着温度的增加,前鳍高原鳅幼鱼终末体长、终末体重增长均在逐渐增大;温度在18～28℃时,随着温度的增加,前鳍高原鳅幼鱼终末体长、终末体重增长均在逐渐减小。对日增重、体长增长率、体重增长率和特定增长率与温度分别进行了二次方程回归拟合,得到的最快生长水温为(16.57±0.51)℃,与最高存活水温相差近4℃。初步判定,前鳍高原鳅幼鱼最适生长温度范围为12.17～16.57℃。