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供体细胞对猪体细胞克隆胚胎早期发育的影响 总被引:1,自引:1,他引:1
以中国农业大学实验用小型猪香猪胎儿成纤维细胞、成年耳成纤维细胞和颗粒细胞3种细胞系为供体细胞进行核移植。比较了血清饥饿法和接触抑制法处理胎儿成纤维细胞诱导进入G0/G1期的效率,发现二者差异不显著(P〉0.05),血清饥饿2d和4d差异不明显,同样接触抑制2d和4d差异也不显著(P〉0.05)。系统研究了影响克隆胚胎发育的供体因素:血清饥饿与否、细胞形态、细胞类型及个体差异等,结果表明:血清饥饿处理对克隆胚的早期发育没有明显的促进作用;圆形光滑细胞有利于细胞融合,对早期发育无显著影响(P〉0.05);不同个体、不同类型的供体细胞对克隆胚囊胚发育率有一定的影响。 相似文献
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为了解湖羊围生期主要生化指标及生殖激素变化规律,试验选择体重70 kg左右的健康妊娠末期湖羊12只,通过颈静脉空腹采血后,采用全自动生化分析仪检测分娩前3天、分娩当天、分娩后3天的血清生化指标,采用ELISA法检测分娩前21天至分娩后6天(每3 d测定1次)的血清雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)及前列腺素(PGF_(2α))水平。结果表明:分娩当天湖羊血清总蛋白(TP)、三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)浓度显著下降(P0.05),但分娩后3天TP水平迅速回升,而TG和TC浓度则一直维持在较低水平;分娩后3天血清尿素氮(BUN)浓度显著下降(P0.05);从分娩前21天至分娩前3天湖羊血清E_2浓度呈逐渐升高的趋势,分娩当天明显下降,而P_4浓度则在分娩前3天开始呈缓慢下降趋势,并一直持续到产后6天;PGF_(2α)浓度在分娩当天升高,之后下降。说明分娩前后湖羊血液生化指标及主要生殖激素发生了显著变化。 相似文献
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以小鼠自然受精与体外受精胚胎为模型,探索鼠源巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)在小鼠胚胎早期发育过程中的生理功能。分别使用添加不同剂量(对照组:0 ng.mL-1;试验组:0.5、2和10 ng.mL-1)GM-CSF的化学限定培养基连续培养小鼠自然受精、体外受精原核期与2细胞期胚胎,检测其胚胎着床前发育效率(卵裂率、囊胚率)及囊胚的质量(囊胚总细胞数、ICM/总细胞数的比率、凋亡指数)。结果发现,对自然受精胚胎而言,原核时期添加不同剂量的GM-CSF,其卵裂率、囊胚总细胞数、ICM/总细胞数的比率在各组之间均差异不显著,但10 ng.mL-1试验组的囊胚率显著低于对照组(61.6±5.1)%(P0.05);2细胞时期添加不同剂量的GM-CSF,其囊胚率、囊胚总细胞数、ICM/总细胞数的比率在各组之间均差异不显著,但试验组中的囊胚凋亡指数均显著低于对照组(P0.05)),并且试验组中2 ng.mL-1的囊胚凋亡指数最低,显著低于0.5 ng.mL-1(P0.05),其他试验组之间的囊胚凋亡指数没有统计学上的差异性。对体外受精胚胎来说,原核时期添加GM-CSF,其卵裂率、囊胚率、囊胚总细胞数、ICM/总细胞数的比率在各组之间均无显著性差异;在2细胞时期,10 ng.mL-1组的囊胚率显著低于对照组及其他2个试验组(P0.05),但各组之间的囊胚总细胞数、ICM/总细胞数的比率均无显著性差异。本研究结果表明,在化学限定培养基中添加一定剂量的GM-CSF有利于改善小鼠自然受精与体外受精囊胚的质量,但剂量过高可能不利于小鼠受精胚胎的早期发育。 相似文献
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[目的]旨在研究皖北地区肉牛能繁母牛繁殖疾病的发生情况。[方法]通过走访,并结合调查问卷,对皖北地区的22个母牛繁育场的3088头母牛的繁殖疾病发病情况及病因进行调查。[结果]结果显示:皖北地区母牛繁殖疾病以胎衣不下的发病率最高(5.99 %)、其次是子宫内膜炎(5.44 %)、难产(3.92 %)、流产(2.75 %)、子宫积脓(1.45 %)、阴道脱出(1.33 %)、卵巢囊肿分别(1.39 %)、持久黄体(1.52 %)。[结论]繁育场的饲养管理技术影响母牛繁殖疾病的发病率,针对这些因素提出了对应的改进意见,以期为安徽省的能繁母牛的扩拦增量工作提供决策参考。 相似文献
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安淮山羊骨骼肌卫星细胞的分离培养与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
为了分离得到安淮山羊骨骼肌卫星细胞,成功构建山羊骨骼肌卫星细胞系,为相关研究提供实验材料。以安淮山羊背最长肌肌肉组织为材料,采取胶原酶和胰蛋白酶结合的二步消化法,结合差速贴壁法纯化原代骨骼肌卫星细胞。对骨骼肌卫星细胞中特异性基因Pax7用免疫荧光染色法及PCR扩增加以鉴定。通过分离、纯化,得到纯度较高的山羊骨骼肌卫星细胞,其形态为圆形,折光性强。培养一段时间后密度增大,细胞呈梭型。所得骨骼肌卫星细胞生长状态良好,具有较为一致的生长方式和形态特点。经免疫荧光染色法以及PCR鉴定发现细胞系中有Pax7基因的表达。通过上述材料和方法,可获得较纯的山羊骨骼肌卫星细胞,并稳定传代。 相似文献