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禽流感病毒N3亚型神经氨酸酶基因的克隆 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究应用11日龄SPF鸡胚增殖禽流感病毒标准株A/Duck/Germany/1215(H2N3),用LSTRIAZOLL试剂盒提取病毒RNA,应用自行设计的NA基因半特异性引物进行RT-PCR扩增,得到NA基因的全长DNA片段,克隆到PMD18-T载体上,并进行鉴定和序列测定.测定结果表明所获得的NA基因DNA片段长1451bp,编码469个氨基酸残基,与其他亚型的NA基因编码的氨基酸长度相一致.根据推导的氨基酸序列进行预测,该蛋白具有6个潜在的糖基化位点和19个半胱氨酸残基.与其他亚型的NA基因相比较发现克隆的NA基因符合神经氨酸的分子结构特征,本研究首次获得N3亚型NA基因全序列. 相似文献
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转K2.9基因绒山羊体细胞核移植技术体系的优化研究 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】利用体细胞核移植技术制备转毛角蛋白Ⅱ型中间丝K2.9基因的高绒质绒山羊胚胎,为绒山羊优良品种的培育提供一种全新的技术材料。【方法】以含有Neor 基因标记的K2.9 毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选获得转K2.9基因细胞,将获得的转基因阳性细胞与体外成熟的绒山羊卵母细胞进行核移植,并对生产的重构胚进行了体外培养。本文分别进行了激活方法、供体细胞和卵母细胞来源的筛选,且对获得的囊胚进行了PCR鉴定。【结果】(1)Iono+6-D对成年羊卵母细胞的孤雌激活效果好于A23187+6-D,显著提高了胚胎的卵裂率。(2)羔羊孤雌胚的卵裂率显著低于成年羊,但囊胚率差异不显著。(3)来自2只绒山羊胎儿的转基因成纤维细胞对核移植胚的发育没有显著影响,但2号羊的转基因细胞显著提高了融合率。(4)以羔羊卵进行核移植,显著降低了核移植胚的发育率。(5)对获得的囊胚进行PCR鉴定,成功扩增到目的基因。【结论】将K2.9 毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染的绒山羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞,核移植到成年羊卵母细胞中,以Iono+6-D进行激活,首次成功、高效地获得携带K2.9基因的绒山羊囊胚。 相似文献
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<正>在《中华人民共和国森林法》伐迹地、火烧迹地、未成林造林中,对林地所作的解释是:"林地地、苗圃地和县级以上人民政府规包括郁闭度0.2以上的乔木林地以划的宜林地。"服务于林业生产及竹林地、灌木林地、疏林地、采的地块统称为林地。林地是森林资 相似文献
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禽球虫病是一种原虫寄生于肠道黏膜上皮细胞的原虫病,以消瘦、血痢、贫血、痉挛为主要临床特点,主要侵害2月龄内的幼雏。禽大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌的某些血清型所引起禽的大肠杆菌病的总称,由于感染途径不同,临床上表现为败血症、脐带炎、眼球炎、心包炎、 相似文献
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新疆地区羊传染性无乳症病原的鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
从新疆地区患乳房炎的山羊、绵羊乳汁中分离到9株霉形体,其形态特征、培养特性、生化特性和血清学反应等均与无乳霉形体国际模式株 PG_2一致,为无乳霉形体(Magalactiae)。 相似文献
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为进一步调整和理顺集体林经营机制,动员全社会力量,加快绿化步伐,促进林业发展,自2005年起,我省在全省范围内开展了集体林权制度改革工作。目前,我省有集体林业用地869.2万公顷,列入这次改革范围的有557.8万公顷,涉及全省11个市和153县(市、区)。随着林权制度的改革的不断深入,森林防火工作面临着许多新隋况、新问题。 相似文献
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试验旨在构建锌指蛋白3(KLF3)基因3'-UTR区双荧光素酶基因报告载体及其突变载体,初步分析可能调控KLF3基因表达的miRNAs。首先通过PCR方法扩增KLF3基因的3'-UTR序列,将其克隆到经Xho Ⅰ、Not Ⅰ双酶切的双荧光素酶报告载体中;运用Targetscan软件预测可能与KLF3基因3'-UTR相互作用的miRNA;使用脂质体2000转染试剂将miRNAs mimics与构建好的KLF3基因3'-UTR段双荧光素酶报告载体或突变载体共转染于常规培养的293T细胞中,检测荧光素酶活性。结果表明,KLF3基因3'-UTR可能是miR-21的作用靶位点;双荧光报告显示,miR-21 mimics组(0.6900±0.0144)比突变组(1.000±0.0688)和空白对照组(1.000±0.0159)KLF3基因3'-UTR双荧光素酶基因报告载体和突变载体的活性降低了31%(P<0.01)。本试验成功构建了含有KLF3基因3'-UTR段双荧光素酶基因报告载体与突变载体,初步证实miR-21对KLF3基因有调控作用。 相似文献