抗脂肪细胞40 000特异膜蛋白scFv-Fc融合抗体毕赤酵母表达载体的构建

采用RT—PCR方法从人外周血淋巴细胞克隆IgG1 Fc片段基因，经序列分析表明，该Fc片段基因长699bp，具有完整的铰链区、CH2和CH3结构区，与GenBank中人IgG1重链Fc片段基因序列完全相同。将Fc片段基因与pPICZaA酵母载体连接先构建pPIgG1质粒，然后将抗脂肪细胞40000特异膜蛋白的噬菌体scFv抗体基因插入到pPIgG1质粒，构建pPIgG1-scFv酵母表达载体。序列分析表明，scFv基因与Fc片段基因拼接正确，阅读框正确无误，表明成功构建了抗脂肪细胞40000特异膜蛋白scFv—Fc融合抗体毕赤酵母表达载体。本试验为下一步在毕赤酵母中大量表达与IgG结构相似、具有较高亲和力和生物活性的scFv—Fc融合抗体分子奠定了基础。     

猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列的表达与纯化

 猪肌生成抑制素基因myostatin (MSTN)的cDNA去除信号肽后对成熟蛋白编码序列PCR扩增出1.2 kb片段,将该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109受体菌细胞,筛选阳性克隆测序分析,结果表明与设计序列完全一致。将该克隆载体的质粒DNA用带有BamH I和Sal I内切酶识别序列的另一对引物进行PCR扩增,将回收的1.2 kb PCR目的片段定向克隆到pET28a（+）表达载体上,成功地构建了猪肌生成抑制素成熟蛋白编码的原核表达载体。对成功构建表达载体阳性克隆在LB液体培养基中用IPTG诱导表达, SDS-PAGE凝胶电泳显示,重组菌表达的MSTN蛋白是以包涵体的形式表达的;SDS-PAGE凝胶经薄层扫描仪扫描分析,表达的MSTN包涵体蛋白占菌体不溶性蛋白含量的27.9%,表达的MSTN分子量为41 451.3D. 因为所构建的表达载体中含六聚组氨酸标签,则用His-trap亲和柱进行纯化后,纯度可达92.5%. 该试验为获得较好的猪肌生成抑制素基因抗原、制备抗体打下了良好的基础。     

色素万寿菊试管苗玻璃化现象及防止研究

以色素万寿菊种子萌发苗为外植体,对色素万寿菊试管苗玻璃化现象进行了研究.结果表明:防止色素万寿菊试管苗玻璃化的有效措施为:使用0.1 mg/L 6-BA,添加0.01 mg/LNAA;采用浓度50 g/L的蔗糖;采用浓度1.2％的琼脂;添加浓度0.1％的活性炭;采用浓度1.8g/L的聚乙烯醇.     

浅议玉米新品种的成功上市

随着我国加入WTO和《种子法》的实施,玉米种业市场逐渐放开,国外的跨国种业集团公司纷给登陆中国种业市场,促进中国种业快速成长,各个公司基本都完成了品种资源储备,都在全力推出自己的新品种,品种竞争达到了灼热化程度。1玉米新品种推广的意义(1)优良新品种的丰产性、广泛的适     

万寿菊种子发芽实验

以万寿菊品种芙蓉8号种子为材料,研究了万寿菊种子发芽最适的漫种时间、温度和处理方法。结果表明:采用标准法催芽时,万寿菊种子发芽最适的浸种时间是8h,最适温度是25℃;毛巾法处理的种子在同等条件下发芽势和发芽率都比标准法处理的种子要高,毛巾法的最佳催芽温度也是25℃。     

初为民警的岁月

光阴荏苒、岁月如梭,转眼间我在森林公安工作已经二十多年了.作为鄂尔多斯市森林公安局成立之初的民警之一,我亲历了鄂尔多斯森林公安队伍发展与壮大的整个过程,也将自己的青春年华奉献给了这个自己所钟爱的光荣职业.1989年底,刚入警的时候,我所在的单位还属于地方公安机关派驻林场的治安派出所;1990年,自治区设立林业公安处;1991年,我们派出所并入林业公安序列,成为当时鄂尔多斯市最早的林业公安派出所之一.     

非洲菊组织培养研究进展

从基因型、外植体类型、基本培养基类型、Thidiazuron(TDZ)的高效利用、附加物的添加等方面对非洲菊组织培养的最新进展进行了综述.     

λgtl0 cDNA文库表达序列标签测定时模板处理方式

表达序列标签是揭示基因组容量的有效方法。在构建cDNA文库的基础上，对以λgtl0为载体进行表达序列标签到定时模板的处理方法进行了探讨。结果表明，以λ噬菌体DNA为模板直接测序比PCR产物经回收后为模板进行测序，其目标克隆的平均插入片段长度要长，但反应成功率低。以λ噬菌体浸提液为模板进行PCR并在产物回收后进行测序反应，可能是以λ噬菌体为载体构建文库的表达序列标签测定的最佳选择。