牛c-Myc/TAT/9R融合表达载体构建及其原核表达研究

原癌基因c-Myc虽然在许多肿瘤组织中特异性高表达,但它也是机体正常细胞生长与增殖所必需的因子,然而目前家畜诱导多潜能干细胞（iPS）研究中关于多功能转录因子c-Myc的报道很少.为此,研究拟利用蛋白转导区域（PTD）的跨膜作用,构建TAT-bc-Myc-9R融合表达载体,并对其进行原核表达,旨在为转录因子蛋白重编程牛体细胞奠定基础.试验以牛c-Myc基因编码区序列为参考,设计并合成含酶切位点、跨膜转导肽TAT和9R的引物,利用PCR等基因工程方法获得包括牛c-Myc、TAT和9R的重组原核表达载体（pTAT-HA-bc-Myc-9R）;酶切鉴定和DNA测序结果表明,试验成功获得bc-Myc-9R重组序列,成功构建重组质粒pTAT-bc-Myc-9R;不同IPTG浓度和诱导时间条件对该重组载体的诱导表达和SDS-PAGE分析表明,TAT-bc-Myc-9R在0.6 mmol/L IPTG和37℃诱导6h条件下表达约57KDa的目的蛋白.这些结果为PTD介导的转录因子蛋白直接重编程牛体细胞以获得iPS研究积累了科学资料.     

人类HBxAg蛋白反式激活基因5的原核表达及其蛋白纯化

为了更深入研究XTP5蛋白(也称人类次要组织相容性抗原(mHA-8))的生物学功能,以HepG2细胞总RNA为模板、应用RT-PCR技术获得XTP5基因,再利用基因工程技术对其进行克隆和原核重组表达载体构建和诱导表达,成功克隆XTP5基因,并成功构建原核重组表达空载体pET-32a(+)-XTP5;阳性重组质粒转化大肠杆菌E.coliBL21后,在37℃经终浓度1 mmoL/L IPTG诱导5 h后,受体菌大量表达76.88 ku XTP5重组蛋白;West-ern-blot证实宿主菌表达的蛋白特异性好;肝素亲和层析柱纯化表达产物XTP5蛋白效果良好。结果表明,成功克隆了人类XTP5基因,并获得纯度较高的融合蛋白XTP5。     

《动物遗传学》国家精品资源共享课的改革与创新

《动物遗传学》课程是现代畜牧业和动物科学专业学习的核心和基石,在国家精品资源共享课建设项目资助下,该课程已取得了长足的发展。为此,为进一步适应国家新形势条件下高等教育改革与创新的要求,论文从改革与创新的必要性、成效与作用、举措和建议等方面进行论述,为该课程的深入建设提供参考。     

基于Web of Science及CNKI数据库可视化分析国际近30年牛科学研究概况

本文通过对1992-2019年间Web of Science核心合集数据库以及中国CNKI数据库收录的牛研究论文进行产出分析,了解国内乃至全球范围内牛科学研究概况。采用文献计量学方法,以“牛”为检索词,进行标题检索,并结合GraphPad Prism 8.4.2及Cite Space软件,分析近30年间牛科学领域论文的数量变化、所属国家、机构、作者、期刊、研究方向、热门学科、关键词等信息。经统计分析发现,美国在牛科学研究领域优势明显,各高质量期刊、论文也大多源于美国。中国牛科学研究在2010年后开始进入飞速发展阶段,近10年论文发表数量位居全球第二,其中,西北农林科技大学、中国农业科学院的贡献突出。此外,农学、兽医学、食品科学、繁殖生物学、生物技术与应用微生物学为全球牛科学领域的主要研究方向,中国在牛的主题研究方向上与国际接轨。但我国缺乏高影响力论文和高质量期刊,因此,我国应在该两方面进行突破,进一步推动我国牛科学研究的发展。     

基于WOS和CNKI数据库解析国际山羊研究发展态势

为了解国际山羊整体发展态势,运用引文分析方法,以"山羊"为标题词进行检索,对1992—2019年期间Web of Science数据库中全球有关山羊研究论文产出,以及同一时期中国CNKI数据库中中文有关山羊研究重点论文产出,进行了国、内外山羊研究论文全面解析.通过Web of Science平台共检索到SCI山羊论文1...     

内蒙古绒山羊PRDM6基因插入/缺失(InDel)检测及其与生长性状的关联分析

PRDM6属于PRDM蛋白家族的一员,PRDM6基因编码1个转录抑制因子,具有与DNA、RNA、蛋白质结合的能力,同时还具有组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶活性.全基因组关联分析结果显示,PRDM6基因遗传变异与骨密度和体质量等性状显著相关,且该基因插入/缺失(Indel)遗传变异还被发现与陕北白绒山羊的多个生长性状显著相关.因此,本研究将PRDM6基因作为研究对象,以期挖掘到与内蒙古绒山羊生长性状相关的关键遗传变异位点.结合Ensembl数据库提供的山羊PRDM6遗传变异信息和已发表文章中的遗传变异位点,本研究探究了2个InDel位点(rs656578433、rs651603667)多态性及其在内蒙古绒山羊群体中的分布规律.发现在本研究检测的群体中,只有第一内含子区的12 bp InDel(rs651603667)存在多态性.不同基因型与生长性状的关联分析结果显示,rs651603667存在3种基因型,即纯合插入型(Ⅱ)、杂合型(ID)和纯合缺失型(DD),频率分别为0.399、0.444、0.159.在育成羊群体中,此rs651603667突变与体质量、胸深显著相关(P<0.05);在成年羊群体中,rs651603667突变与体长、髋宽显著相关(P<0.05),和体高、胸深极极显著相关(P<0.01);此外,皮尔逊(Pearson)相关分析结果显示,该突变位点显著影响的生长性状均与体质量存在极显著相关(P<0.01).综上,PRDM6基因12 bp InDel突变位点与内蒙古绒山羊体长、髋宽和体高、胸深具有显著或极显著相关性,可作为内蒙古绒山羊生长性状选育的有效分子标记.     

5个山羊品种β-1g5''侧翼区多态性研究

利用PCR-RFLP技术对西农萨能奶山羊、关中奶山羊、陕南白山羊、安哥拉山羊和波尔山羊等5个品种1 62个个体的β-lg 5'侧翼区进行了多态性分析.结果表明,PCR扩增产物大小为710 bp,被Sma Ⅰ酶消化后表现多态性.西农萨能奶山羊、关中奶山羊、陕南白山羊、安哥拉山羊和波尔山羊的A/B等位基因频率分别为0.911/0.089, 0.871/0.129, 1.000/0.000, 0.933/0.067, 0.944/0.056, 且它们的基因杂合度/有效等位基因数/Shaanon信息熵/PIC值分别为0.163/1.1 94/0.301/0.150, 0.225/1.290/0.385/0.200, 0.000/1.000/0.000/0.000, 0.125/1.142/0.245/0.117, 0.105/1.117/0.215/0.100. 由此可见,关中奶山羊的遗传多态性最丰富,其次是西农萨能奶山羊,而安哥拉山羊和波尔山羊的遗传多态性较低,陕南白山羊未表现出多态性.