犬细小病毒的分离鉴定及VP2基因的克隆分析

2006年从南京疑似细小病毒感染的病犬中分离犬细小病毒一株,分离的病毒培养物能凝集猪红细胞,凝集效价达到128倍,并能被已知的犬细小病毒阳性血清所抑制。其衣壳蛋白基因VP2被克隆并测序,核酸、氨基酸序列同源性分析表明:血清型为CPV-2b。通过软件对其氨基酸序列分析,预测VP2区域可能的B细胞表位分别为:5-30,300-320,360-380,380-400,400-420区段,这为犬细小病毒基因工程疫苗的研制奠定了基础。     

淳化苹果园土壤肥力与施肥调查

正土壤是苹果树赖以生存的基础,土壤理化性状和肥力水平高低决定了苹果树的生长状况,而施肥种类和肥料质量又深刻影响土壤性状及土壤肥力。了解苹果园土壤养分情况与施肥现状,对指导果农科学合理施肥、生产优质苹果意义重大。为此,对陕西淳化县20户果农进行了入户调查,结合淳化县农技中心土肥站对果园土壤的测定分析,对如何改进当地苹果园施肥、提高苹果园肥力提出建议。1土壤养分和施肥现状     

不同生物药剂对烟青虫的室内药效作用研究

为筛选高效、低毒的烟青虫生物杀虫剂,采用浸渍法,在室内测定6种生物杀虫剂的防治效果。结果表明,球孢白僵菌和苦参碱的防治效果较好,其防效明显高于辛硫磷,施用这两种药剂后7 d和10 d发现,烟青虫幼虫的虫口减退率和防治效果均在90%以上;其次为氰虫酰胺;而除虫脲、苏云金杆菌、印楝素3种药剂的防治效果相对较差,其防效明显低于辛硫磷。     

秤锤树嫩枝扦插繁殖研究

秤锤树作为珍稀植物已被列入中国植物保护红皮书,需要采取苗木繁殖扩大其种群数量。试验通过采取不同植物激素种类、植物激素浓度、处理时间对比扦插,结果表明:采用河沙扦插基质和塑料小拱棚保湿,NAA+IBA(1∶1)1 000倍液处理60 s,扦插生根率为79%,生根数量16条,平均根长10.01 cm,实践操作简便易行,可在秤锤树扦插繁殖中偿试应用。     

核酸水平检测犬副流感病毒方法的建立

根据GenBank中与犬副流感(CPIV)同源性较近的SV5病毒N基因保守序列,利用DNAStar软件设计了一对特异性引物,能扩增265bp大小的片段,并以此建立了检测CPIV的RT-PCR方法,实验证明该对引物特异扩增CPIV;不扩增犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒和狂犬病病毒犬的四种病原的核酸。检测临床病料20份,其中2分为CPIV阳性。此法敏感性较高。是检测犬急性传染性呼吸道疾病(CIRD)中CPIV的有效的方法。     

紫外可见分光光度法同时测定水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的含量

[目的]同时测定水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的含量。[方法]在波长为440和545 nm下,以硫酸作为参比测定水的吸光度,根据吸光度的加和性,用紫外可见分光光度法同时测定水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的含量。[结果]在440和545 nm适宜波长下测定铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的吸光度,对数据进行回归处理,得线性回归方程和相关系数,表明线性关系均良好。[结论]此方法反应灵敏,操作简单,适合天然水或工业废水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）含量的同时测定。     

应用电位滴定法测定海带中碘的含量

本试验采用电位滴定法测定海带中碘含量,该方法反应灵敏,操作简单,专一性强,符合测定结果和分析的技术要求.本试验同时讨论了由E-V曲线、△E/△V-V曲线、△2E/△V2 -V曲线确定电位滴定终点的方法.     

去除紫花苜蓿叶片高丰度蛋白的方法及其应用

紫花苜蓿叶片中大量的高丰度蛋白(核酮糖-l,5-二磷酸羧化/加氧酶,Rubisco)干扰了蛋白质的动态分辨率,严重影响蛋白质组学研究中功能蛋白的检测与鉴定。为了探究去除高丰度蛋白的适宜方法,本研究利用Mg/NP-40与聚乙二醇(PEG)预分离紫花苜蓿叶片蛋白,通过双向凝胶电泳法比较了不同浓度PEG对叶片高丰度蛋白的分离情况。电泳图谱显示0,15%,17.5%,20%PEG处理的蛋白质中分别可以检测到(335±17),(417±3),(445±7),(459±11)个蛋白质点,0,15%,17.5%处理组间差异显著(P<0.05),17.5%和20%PEG 处理组间没有差异(P<0.05)。然而,17.5%PEG能够检测到更多的差异蛋白质点,证明其更能有效沉淀高丰度蛋白,便于检测被Rubisco遮盖的蛋白质点。将该方法应用于紫花苜蓿叶片响应低温胁迫的蛋白质组学研究中检验其应用效果,与三氯乙酸/丙酮法提取的全蛋白相比,去除高丰度蛋白后鉴定出8个新的蛋白质差异点,证明该方法适用于实际的蛋白质组学研究。可见,Mg/NP-40与17.5%PEG法是最适宜去除紫花苜蓿叶片高丰度蛋白的方法。     

犬细小病毒CPV-2c型亚洲株分离鉴定及VP2基因序列分析

为探明北京某犬场犬的死亡原因,从患有肠道出血的犬肛拭子中分离出1株犬细小病毒,试验通过PCR、血凝和间接免疫荧光试验方法对毒株进行鉴定,并对VP2基因进行克隆测序和序列分析,确定其遗传分支。结果表明,该分离株属于犬细小病毒CPV-2c型,命名为CPV-BJ21株。应用犬细小病毒单克隆抗体进行间接免疫荧光检测,结果为阳性;基因序列分析表明,分离株与犬细小病毒为同一进化分支,VP2基因核苷酸序列与中国四川的CPV-2c(MH476581.1)同源性达99%,与亚洲分离的犬细小病毒之间亲缘关系较近。VP2氨基酸序列在第A5G、S297A、D426E位出现了氨基酸突变;在F81细胞上传3代后,病毒液的血凝效价稳定于210。本研究可为犬细小病毒的流行情况及新疫苗的研究提供参考依据。     

紫花苜蓿花粉生活力测定方法研究

为找到快速而有效地测定紫花苜蓿(Medicago sativa L.)花粉生活力的方法,本文通过碘-碘化钾染色、氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、红墨水染色以及花粉离体培养萌发4种方法测定紫花苜蓿花粉的生活力。结果表明:前3种染色的方法不能准确快速的测定肇东苜蓿花粉生活力,离体培养萌发法中的琼脂法和悬滴法可以快速而准确的测定肇东苜蓿花粉的生活力。琼脂法和悬滴法培养花粉1.5h其萌发率最高,平均萌发率为55%,但悬滴法更加快捷方便,萌发率是54%,最适宜的浓度为蔗糖10%,硼酸0.015%。