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为了获得高纯度的白细胞介素-4(IL-4)蛋白,对分离得到的水貂外周血淋巴细胞经植物血凝素(PHA)诱导后,提取淋巴细胞总RNA,根据GenBank中登录的雪貂IL-4基因序列,设计并合成特异性引物,通过RT-PCR扩增获得了水貂IL-4基因序列全长399 bp,编码132个氨基酸,与雪貂氨基酸序列同源性高达99.2%,与熊猫、犬同源性均为90.0%。将编码成熟蛋白基因构建到原核表达载体pProEX-HTb,IPTG诱导后,SDS-PAGE及Western blotting结果显示,IL-4表达产物为15 ku的包涵体蛋白。通过His-Trap HP亲和层析预装柱变性、复性洗脱可获得高纯度的重组IL-4蛋白。本试验为水貂IL-4基因的进一步研究奠定了基础。 相似文献
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2019新型冠状病毒病(COVID-19)给公共卫生安全带来巨大危害,但目前引起该病的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)来源还未有定论。现有证据显示,SARS-CoV-2与分离自蝙蝠和穿山甲的 SARS-CoV-2病毒株同源性相近,表明蝙蝠和穿山甲可能作为SARS-CoV-2的中间宿主存在。目前,丹麦、荷兰和美国等国家已有人工饲养水貂及饲养场工作人员感染SARS-CoV-2的报道。试验研究显示,SARS-CoV-2可在雪貂上呼吸道复制,且雪貂对SARS-CoV-2高度易感,表明雪貂可作为一种SARS-CoV-2感染和传播的动物模型。2020年2—7月,本课题组对山东、吉林、辽宁、黑龙江等毛皮动物主要养殖省份的水貂样品进行SARS-CoV-2病原及抗体监测。利用WHO推荐的real-time RT-PCR检测方法,对328份水貂内脏组织及咽拭子样品进行检测,结果所有样品均为SARS-CoV-2阴性;采用北京万泰生物药业有限公司提供的SARS-CoV-2抗体检测ELISA试剂盒,对35份水貂血清样品进行抗体检测,结果样品中抗SARS-CoV-2抗体均为阴性。由于国内养殖多为密集型庭院养殖,养殖人员与水貂密切接触,且国外已有养殖场水貂大规模感染SARS-CoV-2的先例,为保障毛皮动物行业健康发展,此次监测重点对我国北方地区毛皮动物养殖场进行采样,结果并未发现毛皮动物携带SARS-CoV-2和针对SARS-CoV-2的抗体。这可能与目前我国人群的低SARS-CoV-2感染率和未有养殖场工人感染有关。本实验室已建立了检测毛皮动物及宠物的SARS-CoV-2抗原及抗体检测方法,在目前全球COVID-19疫情的严峻形势下,未来仍需对毛皮动物及宠物进行长期的SARS-CoV-2流行病学监测。 相似文献
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高产小麦品种具有众多优点,如抗病性能更好、光合作用强、产量高等。为了进一步提升小麦产量,近些年开展了小麦杂种方案的研究,取得了不错的进展。文章围绕小麦高产育种所需的特点进行阐述,并就其与杂种优势的利用进行分析,供参考。 相似文献
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作为当前现代农业快速发展的基本生产要素,农业机械化在优化农业生产结构、完善农业机械化管理方面可确保农业机械有效供给.探讨内蒙古自治区农业机械化发展现状,对内蒙古自治区现阶段农业机械化发展中存在问题进行分析,提出持续强化政策支持、推动农机结构性转变、全面构建农机技术性转化机制、加强农机科研队伍建设、注重农机法律政策与标准... 相似文献
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为了解近年来犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)在中国毛皮动物主要养殖区的流行情况及遗传变异情况,本试验于2012-2014年从山东、河北、辽宁收集疑似犬瘟热的水貂、狐狸和貉病料,经犬瘟热抗原检测试纸条检测和RT-PCR检测为阳性后,克隆测序了15株CDV F蛋白信号区(Fsp)基因序列.序列分析结果显示,15株CDV野毒株Fsp基因核苷酸序列和氨基酸序列的相似性均为93.6%~100.0%,与疫苗株相似性为80.7%~81.7%.基因系统进化分析结果显示,15株野毒株均属于中国当前流行的Asia-1基因型.氨基酸序列比对分析结果显示,Fsp蛋白在氨基酸3-14、16-37、47-67位等处存在高变异.通过对当前流行CDV野毒株Fsp基因序列分析,结果表明该Fsp基因区具有较高的变异率,可作为CDV基因分型的依据,同时本试验结果为毛皮动物犬瘟热的防控提供了参考依据. 相似文献
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