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莱克多巴胺快速检测竞争ELISA试剂盒的研制及其性能测定(英文) 总被引:1,自引:0,他引:1
Mixed anhydride(MA)was used to conjugate ractopamine(RAC)to BSA and obtained artificial antigen BSA-RAC identified by UV and SDS-PAGE.Balb/c mice were immunized with BSA-RAC and hybridoma lines that secrete RAC monoclonal antibody(mAb)were generated with cell fusion.A ciELISA kit for detection of RAC(RAC-Kit)was developed with RAC mAb and its performance were tested.The results indicated that BSA-RAC was successfully synthesized and its conjugation ratio of RAC to BSA was about 24.5∶1.Three hybridoma lines were filtered and the best one was 4D8-3E11,its affinity constant(Ka)was 1.65×1010 L/mol.The limit of detection of RAC-Kit was 0.5 ng/ml and its detection range was 0.5-184 ng/ml.The mean recoveries of RAC spiked in feed were 85.6% and in swine urine were 88.6%.The precision and accuracy of the assay as determined by inter-assay and intra-assay coefficient variation were below 15%.It had 9.4% cross-reactivity(CR%)to dobutamine and little or no CR to other compounds.The validity of RAC-Kit in 4 ℃ was in 180 d. 相似文献
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利用临床自然病例,采用冰冻切片技术、组织学和组织化学染色,对猪体内铁异位沉积的组织病理学变化进行了显微观察和研究。结果发现,一些病猪的淋巴结周围组织、淋巴索和淋巴窦内淋巴细胞的数量显著减少,巨噬细胞的数量大幅度增加。大量吞噬有含铁血黄素颗粒的巨噬细胞聚集在一起,连成一片,十分拥挤,致使轮廓不清,不易区分。它们的趋化运动能力、吞噬处理抗原的机能丧失。从而证明仔猪过量补充铁制剂,可以引起铁的异位沉积;铁在巨噬细胞内的沉积,无疑会导致机体的免疫机能下降,使仔猪易患各种传染病。 相似文献
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为制备B族黄曲霉毒素(BGAFs)特异性强、广谱性好的抗体,本研究根据黄曲霉毒素B1(AFB1)的分子结构和活性位点,采用肟化活泼酯法(OAE)、氨甲基化法(MOA)、混合酸酐法(MA)、半缩醛法(SA)、环氧化物法(EP)和烯醇醚衍生物法(EED)6种方法合成BGAFs人工抗原AFB1-BSA,并通过UV和SDS-PAGE进行鉴定;采用AFB1-BSA免疫新西兰白兔制备多克隆抗体(AFB1 pAb),间接ELISA检测AFB1 pAb效价,间接竞争ELISA(icELISA)分析其敏感性,交叉反应试验(CR)分析其特异性和广谱性。结果表明,AFB1-BSA合成成功,在BGAFs抗原合成的6种方法中OAE效果最好,AFB1与BSA的分子结合比为8.46∶1;AFB1 pAb的间接ELISA效价为1∶(1.28×104),IC50为10.32 μg·L-1,与AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2的CR分别为75.21%、44.13%、14.72%、16.36%、1.44%。本研究制备出了高效价、敏感、特异、广谱的AFB1 pAb,为BGAFs免疫检测方法的建立奠定了物质和技术基础。 相似文献
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试验旨在探讨日粮中添加丁酸梭菌(Clostridium butyricum,CB)对肉鸡生产性能、免疫力、小肠黏膜形态和盲肠菌群的影响。采用单因素试验设计,选择1日龄健康AA肉鸡720只,随机分为6组,每组120只,设6个重复,每个重复20只,试验期42 d,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组分别在基础日粮基础上添加CB 250、500、750、1 000 mg·kg-1和1 250 mg·kg-1。结果显示:与对照组相比,试验Ⅳ组(1 000 mg·kg-1)对提高生产性能效果最好,平均日采食量(AFDI)高于对照组(P>0.05),平均日增重(ADG)提高了6.41%(P<0.05),料重比(F/G)降低了4.29%(P<0.05);试验Ⅳ组对增强免疫力效果最好,42日龄时,胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数分别提高了6.45%(P<0.05)、12.92%(P<0.05)和13.94%(P<0.05),IgA、IgG和IgM含量分别提高了27.36%(P<0.05)、28.95%(P<0.05)和28.24%(P<0.0... 相似文献
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选取体重为(2412.85±68.37)g的56日龄豁眼鹅300只,采用3处理5重复单因子完全随机设计,研究3种蛋白质饲料(血粉、膨化血粉和鱼粉各3%)对肥育鹅营养物质的表观代谢率及血清生化指标的影响。结果显示:①鱼粉组营养物质的代谢率略高于膨化血粉组,但差异不显著(P0.05);膨化血粉组和鱼粉组NDF、EE、CP的表观代谢3指标显著高于血粉组(P0.05);鱼粉组CF、ADF、ME的表观代谢率显著高于血粉组(P0.05)。②鱼粉组丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、白蛋白、球蛋白和总蛋白5指标和膨化血粉组相比差异均不显著(P0.05),但显著高于血粉组(P0.05)(除球蛋白外);膨化血粉组丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸转氨酶显著高于血粉组(P0.05)。研究结果表明,膨化血粉在肥育鹅日粮中可以代替相同水平的鱼粉,且其效果要明显优于普通血粉。 相似文献
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研究了6种中间砧‘寒富’苹果(基砧为组培山定子,中间砧分别为‘SH38’‘SH6’‘SH1’‘SH40’‘GM310’‘GM256’)发育期钙素动态变化和累积情况,以及果实品质差异,并采用组合赋权Topsis法评价果实综合品质,以期明确不同中间砧‘寒富’钙的吸收规律及果实品质差异,为冷凉地区选择钙高效转运型苹果矮化中间砧提供参考。结果表明,6种中间砧‘寒富’叶片钙浓度变化趋势基本一致,均呈上升趋势。花后160 d,叶片钙浓度按中间砧排序依次为‘GM310’>‘GM256’>‘SH40’>‘SH6’>‘SH38’>‘SH1’。6种中间砧‘寒富’果实钙浓度变化趋势一致,均在花后0~80 d迅速下降,之后缓慢下降。果实成熟期,钙浓度按中间砧排序依次为‘GM256’>‘GM310’>‘SH40’>‘SH1’>‘SH6’>‘SH38’。钙累积量以花后0~60 d较大,占果实全年钙累积比率的52.54%~70.20%,果实成熟期,以‘GM256’为中间砧的‘寒富’钙总累积量显著高于其余中间砧的‘寒富’,为25.83mg,以‘SH38’为中间砧的累积量最少,为18.35mg。各中间砧‘寒富’苹果的果实品质存在显著差异。依据组合赋权Topsis法对果实品质按中间砧进行评价,排序依次为‘GM256’>‘SH1’>‘GM310’>‘SH40’>‘SH6’>‘SH38’。综上所述,‘寒富’果实钙素累积的关键期为盛花后0~60 d,以中间砧‘GM256’‘SH1’的‘寒富’果实钙浓度较高,综合品质较好,东北冷凉地区可优先考虑栽培以‘GM256’和‘SH1’为中间砧的‘寒富’。 相似文献