四川主要辣椒栽培品种对疫病的抗性鉴定及评价

为了全面、准确地评价四川省主栽辣椒品种对疫病的抗性水平，采用室内苗期接种（6～8 片真叶期）、移栽大田后接种（分枝期）和病圃试验（结果期）3 种方法对四川省主栽的56 个辣椒品种进行疫病抗性鉴定。结果表明，5 个辣椒品种采用3 种鉴定方法均对疫病具有抗性，18 个品种均表现为感病，其余品种由于接种时期和栽培环境不同抗性类型发生变化；相关性分析结果表明，室内苗期人工接种能更准确地反映辣椒在田间的真实抗性水平。     

木霉菌T2562及4种化学药剂防治川西高原莴笋霜霉病试验

为评价木霉菌T2562防治莴笋霜霉病的效果,筛选莴笋霜霉病防治药剂,开展了田间药效试验。试验结果表明,莴笋苗期霜霉病初发期可用木霉菌T2562进行茎叶喷雾防治。莴笋霜霉病发生严重程度较高时可用10%氰霜唑SC1875倍液,或10%氟噻唑吡乙酮OD 3000倍液,或50%烯酰吗啉WDG1500倍液+687.5g/L氟菌·霜霉威SC600倍液进行茎叶喷雾防治。     

四川大白菜细菌性软腐病新病原菌Pectobacterium versatile的鉴定

为明确引起四川理县大白菜软腐病的病原菌种类, 从理县梭罗沟村田间采集具有典型软腐症状的大白菜病样, 采用组织分离、致病力测定、生理生化分析、形态学和分子生物学方法进行鉴定。结果表明, 分离获得的5株细菌在NA培养基上形成的菌落呈圆形、半透明、乳白色、中心突起、边缘平滑, 在半选择性培养基CVP上培养48 h后产生凹陷。5株菌均能使大白菜、胡萝卜、马铃薯和芹菜的离体组织腐烂, 接种于白菜苗后叶片呈湿腐萎蔫症状。通过大白菜叶柄接种部位形成的病斑长径来比较菌株致病力强弱, 各菌株的致病力有显著差异。基于看家基因pgi、rpoS、mdh、proA、mtlD 和icdA(NCBI登录号为OL963562~OL963571)的多基因联合系统发育树, 分离菌株与Pectobacterium versatile聚为一簇, dnaX-leuS-recA(NCBI登录号为OL963572~OL963576)的多位点序列分析(MLSA)进一步支持以上结果, 且准确性更高。分离菌株的生理生化特征与P.versatile模式菌株一致, 综上将其鉴定为P.versatile。这是我国首次报道P.versatile引起大白菜软腐病。     

侵染四川辣椒的番茄斑萎病毒和辣椒轻斑驳病毒的小RNA测序检测及鉴定

 调查发现四川省汶川县当地辣椒的病毒病严重且症状多样,病样粗提液摩擦接种辣椒、矮牵牛和三生烟,出现辣椒系统性花叶焦枯和茎尖坏死,指示植物表现局部枯斑。对3个不同症状的病果进行sRNA深度测序鉴定,发现均含有番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)和辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)。通过RT-PCR技术进行验证,结果显示所有病样的果皮和部分新鲜种子以及回接寄主的病叶均检测到TSWV和PMMoV,表明该地辣椒病毒病是由TSWV和PMMoV复合侵染引起。这是TSWV侵染四川辣椒的首次报道。分别基于TSWV N基因序列和PMMoV CP基因序列构建系统发育树,汶川分离物TSWV-WC(MK468469)与贵州分离物(KP684518)亲缘关系最近,PMMoV-WC(MK408614)与北京分离物(AY859497)亲缘关系最近。推测该地辣椒病毒病可能与品种引进有关。     

四川莴笋上番茄斑萎病毒的电镜观察与小RNA测序鉴定

为明确引起四川彭州莴笋病毒病的病毒种类,通过生物接种和电子显微镜方法,结合小RNA测序技术和反转录PCR对采集病样进行鉴定和分析。摩擦接种试验表明回接莴笋的发病症状与田间相似,矮牵牛叶片出现局部枯斑;利用电镜可观察到叶肉细胞中有大量病毒粒体聚集于内质网池,其形态特征与正番茄斑萎病毒属（Orthotospovirus）病毒相似;通过小RNA测序技术获得了番茄斑萎病毒（tomato spotted wilt orthotospovirus,TSWV）接近全长的序列,表明侵染该批次莴笋样品的病原物可能是TSWV。利用RT-PCR方法确定田间和回接莴笋及枯斑寄主中均存在TSWV,进一步证明四川彭州莴笋病毒病是由TSWV侵染引起的,这是四川首次发现TSWV为害莴笋。对拼接序列和N基因序列分别构建系统发育树可知,彭州分离物TSWV-SCPZ分别与韩国分离物（YY和K）和美国分离物（MR-01）亲缘关系最近。