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试验旨在探究S100A12在胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)诱导猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM)炎性细胞因子表达及吞噬中的作用。PAM细胞接种APP菌株后,用实时荧光定量PCR检测感染后不同时间点炎性细胞因子和S100A12的mRNA表达水平;构建S100A12重组蛋白表达载体并进行重组蛋白的表达纯化,用MTT法检测其对PAM的细胞毒性,实时荧光定量PCR检测不同浓度(0、5、50和500 ng/mL) S100A12重组蛋白对PAM炎性细胞因子mRNA表达水平的影响;构建S100A12干扰质粒,用Western blotting、实时荧光定量PCR及流式细胞术检测其干扰效率及其对APP感染PAM后炎性细胞因子mRNA表达水平和细胞凋亡的影响;用平板计数法检测S100A12表达对APP的黏附侵袭及其在PAM细胞内存活的影响。结果表明,APP感染促进PAM中IL-6、IL-8、IL-18、IL-1β和TNF-α等炎性细胞因子表达的同时也促进S100A12的表达,且该表达随APP感染剂量增大及时间的延长均显著或极显著增加(P<0.05;P<0.01)。5、50和500 ng/mL重组蛋白S100A12对PAM均没有毒性。5和50 ng/mL的重组蛋白S100A12均可显著促进PAM中IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1β、IL-21和IL-5等炎性细胞因子的表达(P<0.05),而高浓度的S100A12重组蛋白则对上述炎性细胞因子表达无影响(P>0.05)。干扰质粒可成功阻断S100A12蛋白的表达,与转染shNC的对照组相比,在APP诱导下转染shS100A12干扰质粒的PAM中细胞因子IL-6、IL-8、IL-1β和IL-5的转录水平显著或极显著降低,且细胞凋亡率也显著或极显著增加(P<0.05;P<0.01)。进一步研究发现,干扰PAM中S100A12蛋白的表达可显著增强APP对PAM的黏附侵袭能力及其在PAM内的存活能力(P<0.05),相反,体外添加S100A12重组蛋白则显著抑制APP对PAM细胞的黏附侵袭及其在PAM内的存活(P<0.05)。以上研究表明,S100A12具有增强APP感染后PAM炎性细胞因子的表达、抑制APP诱导的PAM凋亡和降低APP对PAM的黏附侵袭及其在PAM内存活的作用,为进一步揭示APP感染过程中S100A12对PAM调控作用及机制奠定了基础。 相似文献
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农业产业化发展是促进农业结构调整,实现农业增产、农民增收、农村繁荣的根本途径,是推进社会主义新农村建设、提高人民生活水平的关键措施,是实现传统农业大县向现代农业强县根本转变的必由之路。进一步加快农牧业产业化发展,对于全面落实中共"十八"大会议精神,不断优化产业结构,转变经济发展方式,构建和谐宁城,实现建成小康社会目标都具有十分重要的意义。1宁城县农牧业产业化发展情况宁城县委、县政府坚持"工业强县,产业富民"主战略,加大产业结构调整力度,推进农牧业产业化经营。2004年制定了《宁城县农牧业产业化重点产业2005-2010年发展规划纲要》,用抓工业的理念和思维谋化农牧业,连续做出了项目建设年、项目提速年、项目推进年、项目效益年的战略部署。经过几年的不懈努 相似文献
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马师武,是黑龙江省尚志县苇河镇的一个蜂农。一九八五年,他利用当地丰富的花粉资源,办起了以制作“花粉酒”为主要产品的家庭工厂。他的《中国花粉补酒》远销国外。当年产值达七十多万元,按规定缴足税款后,获纯利十万余元,马师武一下成了远近闻名的企业家。 相似文献
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