细粒棘球绦虫Hsp70基因的克隆、表达及抗体制备

【目的】克隆细粒棘球绦虫( Echinococcus granulosus , E.g)热休克蛋白家族基因Hsp70,在原核细胞中表达、纯化Hsp70蛋白并制备其特异性抗体。【方法】 从包囊中分离原头蚴,提取RNA,RT-PCR扩增EgHsp70基因的cDNA,将其构建至原核表达载体pMAL-p2x,转化大肠杆菌BL-21菌株。通过改变诱导温度、IPTG浓度和诱导时间筛选出EgHsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件。并用麦芽糖亲和层析法纯化该蛋白。纯化蛋白经皮下多点注射免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blotting检测血清效价和特异性。【结果】 RT-PCR扩增获得EgHsp70基因的cDNA,酶切和测序结果表明EgHsp70基因已克隆入pMAL-p2x。表达条件优化实验结果筛选出Hsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件为：当A600为0.6时,以0.3 mmol•L-1 IPTG于30℃条件下诱导表达4 h。SDS-PAGE显示Hsp70融合蛋白相对分子质量约为68.6kD,经麦芽糖亲和层析法纯化获得了Hsp70融合蛋白,其表达量为2.5 mg•L-1。Western blotting 检测证明制备的抗血清与EgHsp70融合蛋白、原头蚴粗提抗原、E.granulosis虫体蛋白和E.granulosis虫体表面蛋白均能特异性结合,ELISA检测表明获得的抗血清效价达到 1﹕256 000。【结论】在大肠杆菌中表达并纯化获得了EgHsp70融合蛋白,并制备了高效价的兔抗EgHsp70蛋白抗血清,为研制包虫病疫苗及相关诊断试剂奠定了基础。     

阿维菌素复方制剂3号对绵羊体内外寄生虫的驱杀试验

阿维菌素复方制剂3号由氯氰碘柳胺钠(clos-antel sodium)和阿维菌素混合制成注射液.其中氯氰碘柳胺钠商品名为佳灵三特,是一种肝片吸虫线粒体的氧化磷酸化解偶联剂,抑制虫体ATP的生成,致使虫体生存和发育受阻,已有数篇关于它还可驱除动物体内外其他寄生虫的报道;     

阿维菌素复方制剂2号对绵羊体内外寄生虫驱除试验

目的试验阿维菌素复方制剂2号中左旋咪唑与阿维菌素混合有无配伍禁忌及驱除绵羊体内外寄生虫效果。方法通过虫卵和痒螨检查确定阳性羊,设Ⅰ组:阿维菌素复方制剂2号(阿维剂量0.4mg/kg.BW.左旋剂量4mg/kg.BW);Ⅱ组:1%阿维菌素注射液0.4 mg/kg.BW;Ⅲ组:20%左旋咪唑注射液4 mg/kg.BW;Ⅳ组:左旋咪唑片剂7.5 mg/kg.BW;Ⅴ组:空白对照组,按羊的体重皮下注射或口服药物。结果Ⅰ、Ⅱ组羊用药后痒螨驱净率达100%,10 d试验羊虫卵减少率为100%和粗计驱虫率也为100%。Ⅲ组羊虫卵减少率和粗计驱虫率分别为91.3%和85%,Ⅳ组羊虫卵减少率和粗计驱虫率分别为82.7%和75%。结论阿维菌素复方制剂2号中左旋咪唑与阿维菌素混合无配伍禁忌,其驱除绵羊体内外寄生虫效果极佳。     

细粒棘球蚴中间宿主的模型动物首次感染六钩蚴对再次感染产生的保护性试验

业已证明 ,昆明鼠作为理想细粒棘球蚴中间宿主的模型动物感染六钩蚴 ,腹腔感染和静脉感染的成功率均达 1 0 0 % ,皮下感染的成功率为 83%。其中腹腔感染产生的包囊几乎全部寄生于腹腔内 (游离于腹腔内或寄生于腹腔各个脏器 ) ;皮下感染产生的包囊严格寄生于皮下 ;静脉感染产生的包囊严格寄生于胸腔内 (游离于胸腔内或寄生于肺脏间质及膈肌表面 )。存在六钩蚴感染途径 (腹腔、皮下、静脉 )与包囊寄生部位 (腹腔、皮下、胸腔 )的严格对应关系。这为将六钩蚴以不同的感染途径二次感染大批量昆明小鼠 ,判断首次感染六钩蚴对再次感染产生的保护试…     

饲料的防霉

饲料的防霉北京市营养源研究所桑普生物化学技术公司张文宝，孙滨霉菌是真菌的一种，属于微生物，它们繁殖非常迅速，能在短时间内生成数以百万计的孢子，这些孢子由空气、水、器械、动植物等媒体携带散布到世界的各个角落，霉菌孢子能以冬眠的方式抵抗干燥、寒冷及高温等...     

甜椒花粉贮藏试验小结

几年来,我们在甜椒制种过程中,一般都采用新鲜花粉授粉。由于植株长势不同或天气出现晴雨变化,花粉时多时少,给正常授粉带来一定困难。为了解决这个问题,我们在1983年安排了花粉贮藏试验。设三个处理:冰箱内5℃贮藏,干燥器中室内贮藏(21～30℃),新鲜花粉(CK)(以下简称冰、干、CK)。每处理做20朵花。5月25日上午,将大花蕾摘下,取出花药,晒3—5小     

饲料防霉剂——“除霉净”的研制

二、载体的选择及带载体的复合配方抑菌效果为了便于携带及商品化,液体状态的有机酸在运输、使用、贮存、包装各方面均有很大困难。我们选择了各种载体(包括膨化珍珠岩)膨化蛭石、人造沸石、膨化麸皮等)进行了吸附实验,证实这些经过处理的材料对酸均有很好的吸附作用,它们具有较大的比表面积,因而可吸     

阿维菌素复方制剂1号对绵羊体内外寄生虫的驱杀试验

为了确定阿维菌素复方制剂1号（含丙硫苯咪唑亚砜和阿维菌素）注射液驱杀绵羊体内外寄生虫效果。通过虫卵和痒螨检查确定阳性羊,设Ⅰ为阿维菌素复方制剂1号;Ⅱ为1%阿维菌素注射液;Ⅲ为蠕能净注射液;Ⅳ为10%丙硫苯咪唑口服混悬液;Ⅴ为丙硫苯咪唑片剂;Ⅵ为空白对照组。按羊的体重皮下注射或口服药物。Ⅰ、Ⅱ组痒螨驱净率达100%;Ⅰ～Ⅴ组虫卵转阴率和粗计驱虫率均为100%;Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组毛民线虫虫卵减少率分别为72%、71%、71%;Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组绦虫和肝片吸虫虫卵减少率、粗计驱虫率均达100%。阿维菌素复方制剂1号中注射液驱杀绵羊体内外寄生虫效果极佳。     

基层防疫工作中存在的问题和建议

动物防疫工作关系到畜牧业的健康、稳定发展和农牧民的增收,也关系到食品安全和人类健康,主要对基层动物防疫工作中存在的问题进行分析,并提出相应建议,以期为做好基层动物防疫工作提供参考。     

邓小平视野中的党执政合法性四论

巩固党的执政地位,实现党的长期执政,就要不断夯实党执政合法性基础。邓小平坚持从 人民根本利益出发,以民心为导向,从指导思想、经济绩效、民主法制和惩腐治党等方面, 全方位、多角度创建党执政合法性的基础。邓小平对党执政合法性的构建,具有深厚的理 论和实践价值。