高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因的克隆表达及其单克隆抗体的制备方法

研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因的克隆表达及其特异性单克隆抗体(Mabs)的制备方法.本研究以HP-PRRSV为研究对象,参照已发表的PRRSV基因组序列,设计一对PCR引物,并在其上下游分别添加BamHI和SalI酶切位点,获得的PCR产物用BamHI和SalI酶切后与经同样处理的pET-28a原核表达载体质粒连接,转化DH5a感受态细胞后挑取阳性克隆,经酶切鉴定和测序验证后,转化至E.coli BL21(DE3)中,经IPTG于37℃诱导表达不同时间点后,取细菌菌体用SDS-PAGE分析.结果表明,Nsp2在大肠杆菌中得到表达.经包涵体的提取,用猪抗PRRSV血清抗体进行Western-bolt鉴定,结果表明,融合表达的pET28a-dNsp2蛋白能被PRRSV阳性血清特异性识别.取纯化的pET28a-Nsp2蛋白按每只100μg的剂量与等量弗氏完全佐剂进行乳化,并作为免疫原采取常规皮下多点注射免疫6-8周龄BALB/c小鼠.取其脾细胞与SP2/0的骨髓瘤细胞融合,经间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选,采用有限稀释法进行克隆.经过3次克隆后获得了一株抗PRRSV-Nsp2蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞,命名为A2F1.Western-blot和间接免疫荧光结果显示这株单克隆抗体株能与Nsp2蛋白和PRRSV JXA1株发生特异性反应,而不与PRRSV CH1A株发生反应,证明获得的McAb为针对PRRSV JXA1株的McAb.抗体亚类鉴定结果表明,重链为IgG1型,轻链为κ链.采用间接ELISA法测得单抗的细胞培养上清抗体效价为1:800,腹水效价分别为1:12800.这株单抗的获得为进一步研究pET28a-Nsp2基因的功能及建立准确快速PRRSV的诊断方法提供了强有力的手段.     

3%啶虫脒乳油防治小麦蚜虫田间药效试验

试验结果表明,3%啶虫脒乳油对小麦蚜虫具有良好的防治效果。3%啶虫脒乳油施药后1、3、7天,对小麦蚜虫的防治效果在86.1%~98.1%,小麦未发现异常症状和不良反应,生长正常。建议防治小麦蚜虫使用3%啶虫脒乳油有效成分22.5g/hm2以上为宜。     

川中丘陵区小麦耗水及其与产量的关系

川中丘陵区小麦耗水特性，及“三水”对小麦产量的作用研究结果表明：小麦不量随小麦生长逐渐增大，到拨节至籽粒乳熟阶段达量大，逐渐减小；小麦产量与其耗水量极显著正相关；在该区小麦大面积生产中，小麦耗水主要来源于同期降水，底墒水对小麦供水虽比例不大，但对小麦稳产高产有着重要的作用，表现为不麦产量与土层厚度极显著正相关；干旱时通过灌溉抗旱对小麦有一定增产作用。     

在低谷中崛起的徐州联农畜禽有限公司

徐州联农畜禽有限公司地处徐州东南张集镇，是集蛋鸡、饲料生产、销售及服务于一体的综合性企业。作为一家私营企业，自80年代中期以来不断发展壮大。特别是近几年国内养禽业形势低迷，联农公司却凭着自身的努力迅猛发展。目前公司拥有6万套父母代的种鸡场、年孵化能力达1000万只的孵化厅、年产万吨预混料的饲料厂，刚刚新建成了办公楼、培训楼。不久前，被江苏省农林厅批准祖代鸡生产，为联农公司的进一步壮大奠定了基础。至目前为止，公司已投资千余万元，未向银行借贷一分钱。总结公司成功的经验：产品重质量，销售重服务，向管理要效益…     

为饲料工业发展清道——第二届中国饲料科技与经济高层论坛暨中国饲料经济专业委员会第二届学术交流会采撷

2005年12月17～18日,中国饲料经济专业委员会和中国农业科学院饲料所联合主办的“第二届中国饲料科技与经济高层论坛——暨中国饲料经济专业委员会第二届学术交流会”在北京友谊宾馆隆重举行。原以为是一次一般的学术会议,但实际上这是一次组织严密、阵容空前、形式活泼、会众踊跃、内容丰富、涉及面宽、揭示理念和行业实质广泛的大会。出席此次会议的嘉宾有中国农业部畜牧司张仲秋副司长、中国饲料工业协会白美清会长、中国工程院院士、中国农业科学院前任院长卢良恕先生、联合国FAO饲料与动物生产部长AndrewW.Speedy、欧盟饲料产业联盟主席MartinTielen、正大集团副董事长姚民仆先生、蒙牛集团董事长牛根生、中国饲料工业协会秘书长谢洪钧先生、大北农科技集团董事长邵根伙及饲料行业的企业老总。农业部副部长尹成杰也到会作了重要报告。会议从专题报告到主题论坛,都吸引了大量听众,1000多人的会议厅场场暴满。17日晚,中央电视台也到会举行了演出和访谈。在所有活动中,有关人士的专题报告和主题论坛对饲料行业发展意义更为重大,现将部分内容整理见诸纸面,与大家分享(如有差错,与报告人无关)。     

猪链球菌病的综合防治措施

1 加强饲养管理，注意保持营养的均衡，尽量减少各种应激因素，加强猪舍的通风，适当降低饲养密度，避免过度拥挤，增强猪群的抵抗力。     

从"稻鸭共作"和"种草养鹅"看家禽业与农牧业生态发展的前景

人们在对愈演愈烈的自然灾害追根穷源后发现,自然植被的破坏、工业三废、农牧业生产中施用的药物,都会造成动、植物乃至微生物的生态失调,造成生态的退行性变化和地表裸露。因此,今天的人们一方面对“安全”、“绿色”、“生态平衡”表现出空前的警醒,一方面对“安全”、“绿色     

河蟹网箱养殖新技术

目前,我地有不少农民利用笼族式网箱进行河蟹养殖,获得成功。该网箱是制成笼格式,一只河蟹因于一个小笼内。其优点是河蟹因不可互相攀越、残杀,成活率高者可达90％～100％,一般可达80％,而且不用换水,管理容易,用工较少,起捕方便干净。每平方米可产商品蟹1.5～2.5公斤,蟹白肚青肢,无泥土腥味,商品性能好,具体技术如下: 一、网箱制作:根据所养河蟹的规格大小,选择网目1～2厘米的尼龙网片缝制成200～400平方厘米大的网格,高1～1.5米,每平方应有25～50个左右的格     

起动机拉缸的原因及预防

一、拉缸的原因 1.活塞定位销钉松脱 起动机活塞材料为铸造铝合金,每个环槽内部设有铜质活塞环定位销钉,限制环的转动,以防活塞环开口端落入气缸壁面上的配气孔中而折断。起动机在工作时,活塞处于高温、高压、高速运动之中,当活塞受热后,其膨胀系数大于定位销钉的膨胀系数,所以定位销钉难以保持原来的配合紧度。活塞往复运动产生振动,会使定位销钉出现松动,使销钉孔慢慢磨大,直到销钉脱出,拉坏缸壁。