牛Smad4基因cDNA克隆及生物信息学分析

Smad4基因在TGF-β细胞内信号传导过程中起重要作用,通过生物信息学方法,结合RT-PCR技术和SMART RACE技术,对牛Smad4基因进行了克隆,得到了3 503 bp cDNA全长序列并向GenBank递交了该序列,登录号：DQ494856。通过核酸序列分析发现,牛Smad4基因由12个外显子组成,编码553个氨基酸。该基因与绵羊、猪、人、大鼠和小鼠在核酸序列上分别有99%、96%、95%、91%、91%的同源性;在氨基酸序列上分别有99%、98%、98%、99%和98%的同源性,牛Smad4基因的组织表达谱很广,在睾丸、胰腺、肝、小肠、卵巢、淋巴结、心肌、骨骼肌、胸腺组织中都有表达。     

牛αS1-酪蛋白基因5'调控区的克隆与分析

编码乳蛋白的基因位于常染色体上,呈共显性遗传.牛酪蛋白基因位于基因组第6号染色体上,编码4种酪蛋白的基因在染色体上的位置依次是αS1-酪蛋白、β-酪蛋白、αS2-酪蛋白和γ-酪蛋白,表明这4种酪蛋白基因的表达受到共同的启动元件和调控元件的调控[1].研究通过数字化差异显示技术分析发现,牛αS1-酪蛋白基因在牛泌乳前后的乳腺组织中的表达量发生着显著的变化,表明αS1-酪蛋白可能与牛的泌乳调控有关.因此,试验克隆了牛αS1-酪蛋白基因5′调控区域,并进行了多种生物信息学分析,现报道如下.     

生物统计附试验设计课程考核方式的改革与实践

恰当的考核对学生的理论学习和实践训练具有引导、激励和促进作用.该研究通过增加上机考试、增加实验报考、期末闭卷考试和期末开卷考试等改革措施,对生物统计附试验设计课程考核方式进行了改革与实践,旨在激发学生求知欲,培养学生的科学研究能力及独立分析、解决问题的能力.     

牛Fas基因的组织表达分析及其功能预测

采用RT-PCR技术从中国西门塔尔牛睾丸组织总RNA中反转录FascDNA,将其克隆于pMD19-Tvector后进行测序分析,并对其表达的蛋白结构功能进行预测、分析。结果表明:牛的FascDNA序列为1109bp,编码323个氨基酸残基,在氨基酸序列上与羊、猪、人、小鼠的相似性分别为90.5%、65.3%、56.7%和48.6%。Fas蛋白的胞外区有2个糖基化位点和3个富含半胱氨酸残基的结构亚域,对Fas蛋白的定位及凋亡信号识别有重要作用。牛与羊、猪、人、小鼠Fas的死亡结构域(Death domain,DD)氨基酸序列的相似性分别为94.3%、68.5%、59.6%和70.8%,体现了该结构在各物种间较强的保守性及接受凋亡信号诱导靶细胞凋亡的重要性。组织表达谱发现,Fas不仅表达于牛的淋巴、脾等淋巴系统,而且高表达于牛生殖系统的睾丸中,这对于进一步阐明Fas在公牛精子发生过程中的调控作用奠定基础。     

生物统计学课程改革与实践

通过在教学过程中的经验积累,开展了利用多媒体进行理论教学、统计软件应用于实践教学、利用网上考试系统进行考试、利用网络学习平台进行课下复习等四大教学改革方面的有益探索,以期达到提高学生学习的积极性、解决实际问题的能力以及提高生物统计学整体教学效果的目的。     

RNA干扰防治禽流感的研究进展

禽流感(avian influenza,AI)是一种由A型流感病毒引起的各种禽类感染的传染性疾病。近年来,禽流感在世界范围内造成了巨大的危害,许多科研工作者对禽流感病毒的感染机制、致病机理进行了深入研究,积极探索防治禽流感的有效方法。RNA干扰作为一种防治病毒性传染病的新兴技术,其高效、特异、快捷的特点,在抗病毒治疗中显示出了它独特的功效。本文就RNA干扰技术对禽流感病毒防治的研究进展进行综述。     

伏牛白山羊TACR1基因扩增及生物信息学分析

本研究旨在克隆伏牛白山羊TACR1基因,并对其结构和编码蛋白进行生物信息学分析,为进一步研究TACR1基因的功能及其在生殖生理和免疫调节中的作用奠定基础。根据GenBank中已发表的山羊TACR1基因（登录号：NC_030818.1）序列设计引物,对伏牛白山羊TACR1基因进行分段PCR扩增并测序,拼接后得到包含TACR1基因完整编码区的序列片段。结果表明,伏牛白山羊TACR1基因开放阅读框（ORF）全长852 bp,共编码283个氨基酸,碱基组成为：A（23.47%）、T（25.49%）、C（27.76%）和G（23.27%）。与绵羊相比,伏牛白山羊TACR1基因编码区发生了2个碱基突变,但没有引起氨基酸的改变。5'端非编码序列长为860 bp,发生了9个碱基突变;3'端非编码序列长为271 bp,发生了2个碱基突变。同源性分析结果显示,伏牛白山羊与卡普拉山羊、藏羚羊、绵羊、瘤牛、白尾鹿、白鳍豚、人、野猪、金钱豹、土拨鼠、野驴TACR1基因同源性分别为99.9%、99.3%、99.2%、97.5%、96.7%、92.9%、89.7%、88.6%、86.3%、86.2%和85.0%。SignalP 4.1在线软件预测结果显示,TACR1 N末端存在信号肽且可能在21位氨基酸处存在裂解位点;蛋白质结构预测发现伏牛白山羊TACR1基因编码蛋白没有跨膜结构域。     

砧木地径大小对当年香榧生长的影响

为比较不同砧木地径对当年香榧Torreya grandis'Merrillii'苗木生长的影响,选择地径(D)D≤1.0cm、1.0cm1.5cm3a生的三组苗木作砧木,粗度为2.50~3.0mm的1a生枝条作接穗,运用DPS软件LSD法分析。结果表明:砧木地径粗度均在0.5~2.0cm,香榧砧木地径的大小与抽生的新梢个数以及抽梢次数之间无明显影响,但直接影响香榧苗新梢的生长量,而且砧木地径粗度与新梢平均长度间存在正相关关系,砧木地径粗度从0.6cm开始,增粗0.5cm,其当年新梢生长量增加22%,增粗1.0cm,当年新梢生长量增加54%,砧木地径粗度>1.5cm时效果最好,最差的是粗度≤1.0cm的,为此,在3a生的实生苗圃地中培育香榧嫁接苗时,应尽量选择地径粗度>1.5cm苗木作砧木。     

小麦抗白粉病基因Pm43定位区段内RGA分析

利用普通小麦测序草图可从基因组范围内对小麦单条染色体上的某个区段进行分析。Pm43是作物遗传与分子改良山西省重点实验室在小麦2D染色体长臂上定位的一个抗白粉病基因。利用信息学方法分析Pm43所在物理图谱、遗传图谱和基因组图谱上的位置,可为其精细定位乃至候选基因的确定提供参考。试验采用Pm43两侧标记序列进行比对,将Pm43定位于染色体C-2DL3-0.49区间的79~99 c M内,所在基因组区段为2DL_9835990~2DL_9823315。利用目前已克隆小麦抗病基因的保守基序作为探针,从目标区段内检索出89条包含抗病基因类似物(Resistance gene analogues,RGA)序列的scaffold,其中,36条scaffold被诊断出含有SSR位点,之后针对SSR位点开发分子标记。利用携带有Pm43的普通小麦材料CH5025、感白粉病材料台长29以及CH5025×台长29的F2作图群体的抗感池DNA,对开发的SSR标记进行连锁性检测,共筛选出4个多态性标记,从而将目标区段进一步确定在标记PK_9908430和NBS_9908778之间。最后经聚类分析,筛选出与已克隆Pm基因同源性较高的1个PK序列和1个NBS序列,且在粗山羊草2D染色体和水稻第4染色体中均存在与这2个序列同源的RGA表达序列。     

河南地方绵羊品种RBP4基因的多态性研究

采用PCR-SSCP方法分析了RBP4基因在大尾寒羊和小尾寒羊中的多态性,以期探索该基因对于河南地方绵羊品种繁殖力的影响。结果表明：在2个绵羊品种中RBP4基因检测出2个基因型即BB和AB,没有检测到AA基因型。在小尾寒羊和大尾寒羊中BB基因型频率分别为0.840和0.583,AB基因型频率分别为0.160和0.416。在小尾寒羊和大尾寒羊中A等位基因频率分别为0.080和0.209,B等位基因频率分别为0.920和0.791。研究为进一步从分子水平探索河南地方绵羊品种的高繁殖力遗传机制提供了参考。