低温对猪肌肉和肝脏组织线粒体数量的影响

为了研究低温环境对线粒体能量代谢的影响,以及民猪和大白猪对低温环境耐受能力的差异,试验选择6头民猪和6头大白猪进行试验,常温对照组置于(18±2)℃的供热舍内饲养,冷处理组置于(8±2)℃的无供热舍内饲养,试验期为15 d;试验结束时屠宰试验猪只,取背最长肌、股四头肌和肝脏组织,采用实时定量PCR法对线粒体数量进行测定。结果表明:无论民猪还是大白猪,在颤栗性产热中,背最长肌占优势,而肝脏内线粒体数量无显著变化。推测在8℃左右的低温环境下,民猪和大白猪无论是颤栗性产热还是非颤栗性产热均无明显差异,两者之间的差异可能发生在更低的环境温度下。     

丝兰提取物对体外模拟条件下绵羊瘤胃脲酶活性的影响

本试验采用体外培养法,研究添加不同浓度的丝兰提取物对绵羊瘤胃脲酶活性的影响.分别通过添加0、100、1000、10000 mg/L以及在此基础上细化添加0、100、200、300、500、1000 mg/L的丝兰提取物,测定其对1%尿素分解产生的氨浓度的测定,确定丝兰提取物抑制瘤胃微生物脲酶活性的最佳抑制范围.综合生产成本及使用效果,本试验结果表明,丝兰提取物的浓度为300 mg/L时,对氨浓度抑制效果较好.     

民猪和大白猪不同肌球蛋白重链表达差异

为揭示民猪与大白猪肌纤维类型组成差异,试验应用Real-time PCR法检测了民猪和大白猪背最长肌中肌球蛋白重链(MyHC)Ⅰ、Ⅱa、Ⅱx、Ⅱb 4种亚型mRNA表达差异。结果表明:同日龄民猪和大白猪、同体重民猪和大白猪相比,民猪Ⅰ、Ⅱa、Ⅱx型MyHC mRNA相对表达量显著高于大白猪(P0.05),而Ⅱb型MyHC mRNA相对表达量显著低于大白猪(P0.05)。说明民猪肌肉中氧化型和中间型肌纤维含量高于大白猪,而酵解型肌纤维含量低于大白猪。     

猪RYR1基因一个外显子的PCR-SSCP检测

用PCR-SSCP方法检测了36头民猪、56头三江白猪、102头长白猪、34头军牧1号、85头杜洛克和53头双肌臀大白猪的RYR1基因,结果表明:RYR1基因具有AA、CC、AB、AC、BC5种基因型,等位基因A、B、C的基因频率均为A>C>B,该基因处于遗传平衡状态。     

冷应激下民猪黑素皮质素受体基因的表达变化

黑素皮质素受体3（melanocortins 3 receptors,MC3R）是G-蛋白耦联受体超家族的成员之一。研究采用Real-time PCR的方法,对冷应激下民猪腿肌内MC3R基因的表达变化情况进行了研究。结果表明,冷应激下,MC3R基因的表达出现了显著地上升（P〈0.05）。据此推测,民猪很可能是通过上调MC3R基因的表达来增加能量消耗而抵御寒冷气候的。     

民猪细胞色素C氧化酶Ⅰ基因的克隆、多态性检测及冷诱导研究

采用克隆测序和PCR- SSCP方法对民猪COX Ⅰ基因序列及多态性进行了检测与分析,采用实时荧光定量PCR法对同一饲养水平下经冷诱导处理的民猪和长白猪肌肉、肝脏组织中COX Ⅰ基因的表达变化进行分析.结果表明:民猪的COX Ⅰ基因序列与其他猪种相比,存在18个核苷酸突变,导致5个氨基酸发生变化;C260T、G275A和C1253T位点民猪以B等位基因占优势,大白猪、长白猪、北京黑猪、野猪则是A等位基因占优势;冷诱导后低温组民猪COX Ⅰ基因的表达量与常温组民猪和低温组长白猪相比,均显著下降(P＜0.05).据此推测冷诱导可导致COX Ⅰ基因表达量降低从而产生更多的ATP为机体提供能量抵御寒冷,COX Ⅰ基因可能是一个与猪的抗寒性显著相关的候选基因.     

MC4R与Leptin、MC3R和CCKAR基因的互作研究

为了研究4个与采食量相关功能基因可能存在的互作关系,采用基因重组的方法构建了黑素皮质激素受体-4(MC4R)基因的真核表达载体,采用脂质体法将该表达载体转染入成纤维细胞,瞬时转染24 h后,采用Real-timePCR的方法检测和分析了Leptin、黑素皮质激素受体-3(MC3R)和猪缩胆囊素受体(CCKAR)基因mRNA的表达变化情况。结果表明,在成纤维细胞中,过表达MC4R基因后,Leptin、MC3R和CCKAR基因的mRNA水平均无显著变化。据此推测,MC4R基因与其他3个基因虽都参与调节动物的采食量,但很可能是通过不同的调控路径来发挥功能的。     

新民猪RYR1和MC4R基因的多态性检测分析

为了调查兰尼定1型受体(RYR1)基因和黑素皮质素受体4(MC4R)基因[其目前公认的数量性状基因座(QTN)]在新组建的民猪群体内的分布情况,试验采用PCR-RFLP的方法,对黑龙江省农业科学院畜牧研究所收集整理的23头民猪的RYR1基因和MC4R基因进行检测,并与其他已报道的猪种进行比较。结果表明:RYR1基因的N等位基因频率为86.96%,n等位基因频率为13.04%;MC4R的A等位基因频率为76.19%,G等位基因频率为23.81%,与其他猪种相比,n等位基因频率偏高。     

新民猪和皮民猪ESR基因的多态性检测分析

为了研究新民猪和皮民猪雌激素受体(ESR)基因的多态性,试验采用PCR-RFLP方法,对黑龙江省农业科学院畜牧研究所收集整理的27头新民猪和50头皮民猪F1代的ESR基因进行检测,并与其他已报道的猪种进行比较。结果表明:新民猪ESR基因的A等位基因频率为0.593,B等位基因频率为0.407;皮民猪ESR基因的A等位基因频率为0.720,B等位基因频率为0.280。新民猪与皮民猪的等位基因频率与引进猪种相似,即A等位基因频率略高于B等位基因频率;然而我国大部分地方猪种的B等位基因频率高于A等位基因频率,其中B为优势等位基因。     

野家杂交猪F1代群体8个繁殖功能基因的多态性分析

测定和分析了野猪与大白猪杂交后F1代群体内8个与繁殖性状相关基因的群体遗传情况,以期为猪的杂交育种以及标记辅助选择提供一定的理论依据.采用PCR-RFLP法对248头杂交猪(大白×野猪)的ESR、FSHβ、GPX5、FUTL、PRLR、NCOAl、OPN和RBT4基因的多态位点进行了检测,并计算了每个位点的基因型频率和基因频率.大白猪群体内引入野猪血统后,F1代的ESR、FSHβ和PRLR的优势等位基因频率都有不同程度的下降,FUTI和GPX5的优势等位基因频率与现有研究结果基本一致,而NCOAl和OPN的优势基因频率都高于已检测的杂交品种,只有TBP4基因处于哈代-温伯格平衡状态.野猪与家猪杂交育种工作中,要选择ESR、FSJβ和PRLR的优势等位基因频率较高的母本群体.