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目前大多数小分子毒素的定量检测方法仍需以实验室为基础或者定制设备,不能被公众广泛应用。研究开发了一种便携式适配体生物传感器,结合血糖仪用于赭曲霉毒素A(OTA)的定量检测。所开发的适配体生物传感器的线性范围是1×10-8~4×10-6mol/L,检出限6.7×10-9mol/L(2.69μg/kg);适配体生物传感器被成功地应用于婴幼儿米粉和羊草样品检测,回收率达84%~122%,表明所开发的适配体生物传感器为OTA的定量检测提供了一种新的方法,展现出良好的应用前景。 相似文献
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为研究砷(Arsenic,As)和铅(Lead,Pb)单独以及联合作用对人肝癌细胞(Human liver carcinoma cells,HepG2)毒性作用和细胞氧化损伤的机制,采用不同质量浓度的As(2.65、3.15、3.65、4.15和4.65μg/mL)和Pb(160、190、220、250和280μg/mL)以及质量浓度比为1∶55的As+Pb分别或联合处理HepG2细胞24、48和72h,使用MTT法检测细胞活力;细胞培养24h后测定细胞活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和还原性谷胱甘肽(GSH)的相对含量。MTT结果表明:As、Pb和As+Pb的24、48和72h半数抑制浓度(IC50),As分别为4.20、4.03和3.74μg/mL;Pb分别为228.01、205.46和203.40μg/mL;As+Pb分别为3.10、3.17和3.18μg/mL。3组处理分别作用HepG2细胞24、48和72h表现出显著的生长抑制(P0.05),且细胞毒性与时间和浓度呈依赖性。当As、Pb单独作用和As+Pb联合作用HepG2细胞诱导ROS、LDH和MDA水平显著升高(P0.05),GSH的含量显著降低(P0.05)。综上所述:As+Pb联合作用与单独作用表现出较强的细胞毒性,毒性大小顺序依次为:As+PbAsPb,且As+Pb联合作用表现为拮抗效应。活性氧以及细胞氧化应激的产物可能是诱导重金属对细胞毒性的重要原因。 相似文献
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本试验旨在研究不同浓度的组氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白及酪氨酸激酶2(JAK2)-信号转导与转录激活子5(STAT5)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路相关磷酸化蛋白表达的影响。将原代奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,分为对照组和7个试验组,采用无必需氨基酸的培养基,对照组不添加组氨酸,试验组是在对照组基础上分别添加0.15、0.60、1.20、2.40、4.80、9.60、19.20 mmol/L的组氨酸。采用噻唑蓝比色法检测原代奶牛乳腺上皮细胞12 h增殖情况;运用蛋白质免疫印迹检测β-酪蛋白和8个信号通路相关磷酸化蛋白表达。结果表明:1)当组氨酸浓度为0.15~9.60 mmol/L时,与对照组相比,奶牛乳腺上皮细胞数量均增加。2)β-酪蛋白表达量随组氨酸浓度的增加出现先升高后降低的趋势,但试验组均极显著高于对照组(P0.01)。3)与对照组相比,组氨酸的添加可极显著促进各信号通路相关磷酸化蛋白的表达(P0.01);试验组中,随着组氨酸浓度的升高,磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白[P-m TOR(Ser2481)]和磷酸化真核细胞翻译延伸因子2[P-e EF2(Thr56)]蛋白的表达量下降,而磷酸化核糖体S6蛋白激酶1[P-S6K1(Thr389)]的蛋白表达增加;当组氨酸浓度为2.40 mmol/L时,磷酸化酪氨酸激酶2[P-JAK2(Tyr1007/1008)]、磷酸化真核细胞始动因子4E结合蛋白1[P-4EBP1(Thr37)]和磷酸化真核细胞起始因子2α[P-e IF2α(Ser51)]蛋白的表达量最高,磷酸化信号转导与转录激活子5[P-STAT5(Tyr694)]、磷酸化m TOR调控蛋白[P-raptor(Ser863)]和m TOR复合物1中的绑定蛋白(GβL)蛋白在组氨酸浓度为9.60 mmol/L时表达量最高。综合可知,组氨酸的添加可通过促进JAK2-STAT5信号通路中P-JAK2(Tyr1007/1008)和PSTAT5(Tyr694)蛋白的表达来进而调控β-酪蛋白表达。最适浓度(0.15~9.60 mmol/L)范围内的组氨酸还可通过m TORC1的P-raptor(Ser863)蛋白作用于下游靶点P-4EBP1(Thr37)来促进β-酪蛋白表达,最终调控乳蛋白合成。 相似文献
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维生素E对育成蛋鸭生长及某些免疫指标的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
选择216只满4周龄的健康金定蛋鸭随机分成6个处理组,每个处理组6个重复,分别饲喂VE含量为0、10、15、20、40、100IU/kg的日粮,研究日粮中添加不同水平的VE对育成蛋鸭生长及某些免疫指标的影响,结果表明:①日粮中添加VE能提高蛋鸭的日增重和日采食量,降低料重比,其中以第Ⅲ和第Ⅳ组(添加量为15IU/kg和20IU/kg)效果较好,但试验各组差异不显著(P>0.05)。②日粮中添加15IU/kg和20IU/kgVE时,血清中的免疫球蛋白(IgG、IgM)、白细胞介素-2(IL-2)、甲状腺素(T3、T4)的浓度最高,皮质醇(Cort)的浓度最低,能较全面地提高蛋鸭的免疫机能。③日粮中添加高剂量(100IU/Kg)VE时,蛋鸭的生长性能及免疫机能有不同程度地降低。综合分析,在蛋鸭育成期的基础日粮中添加15~20IU/kgVE,可提高其生长性能,改善蛋鸭的免疫机能。 相似文献
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缓释尿素对肉牛氮平衡和门静脉营养素流量的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
通过2个试验研究缓释尿素和饲料级尿素对肉牛门静脉回流内脏组织营养素流量、消化率和总氮平衡的影响。试验1选择4头(体重:319 kg±5 kg)具多血管插管的肉牛,试验2选择10头(4头荷斯坦肉牛体重:263 kg±43 kg和6头安格斯体重:367 kg±46 kg)具多血管插管的肉牛,分别研究瘤胃内或日粮供给缓释尿素和饲料级尿素10 h内门静脉回流内脏组织营养素流量和营养素含量的影响。研究结果表明,与饲料级尿素相比,瘤胃内供给缓释尿素极显著降低了瘤胃内氨浓度(处理×时间P=0.001,试验1),显著增加了粪氮的排泄(49.6 VS 45.6 g/d;P=0.04),极显著降低了表观总氮的消化率(61.7%VS66.0%;P=0.003)。缓释尿素和饲料级尿素对干物质、有机物质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观总消化率影响不显著(P〉0.53,试验2)。投喂后0.5 h(试验1)观察到胃肠道中尿素向血液中转移,其它时间点(试验1和试验2)的尿素都是从血液中向胃肠道中转移。试验1和试验2结果都表明,缓释尿素和饲料级尿素投喂后0.5~6 h内,提高了动脉血中的尿素的浓度,但缓释尿素效率显著低于饲料级尿素(处理×时间P〈0.001,试验1;P=0.007,试验2)。缓释尿素组门静脉氨的浓度保持在相对稳定的状态(试验1和试验2),尿素组显著增加了门静脉氨的浓度(处理×时间P=0.003,试验1),试验2结果与之相似(处理×时间P=0.11)。饲喂后0.5 h尿素组显著增加了门静脉回流内脏氨的吸收量(处理×时间P=0.02,试验1);但2 h后,内脏氨的释放量增加暗示着门静脉回流内脏的氨的流量可能超过了肝脏的移除能力。结果显示,缓释尿素通过减缓氨氮的释放以减少氮的损失,但是,动物机体可能降低了缓释尿素的水解作用或消化方式变化增加了粪氮的排泄和尿素向胃肠道内的转移。尽管如此,缓释尿素比饲料级尿素更有利于实际应用。 相似文献
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为了检测阴外动脉注射低剂量脂多糖(LPS)后泌乳期奶牛血浆蛋白的变化,以揭示LPS刺激机体应答的分子机制.本研究选择6头泌乳中后期的健康奶牛,均经阴外动脉注射LPS(0.01μg·kg-1体质量)后分别在不同时间点(注射后0、3、6、9、12、24、36、48、60、72、84和96 h)采集奶样和血样,采用双向电泳与质谱相结合的方法,双向电泳技术分离血浆蛋白,考马斯亮蓝G-250染色后用PDQuest 8.0.1软件自动检测差异蛋白斑点,并经MALDI-TOF-TOF进行质谱鉴定.结果,牛奶体细胞评分在注射LPS后上升,6h达到最大值,此后逐渐下降,24 h恢复到注射前水平.0、6、12和24 h血浆蛋白凝胶图谱分析后发现,8个蛋白点在6、12和24 h表达量升高,质谱鉴定为4种蛋白质(VD-结合蛋白前体、丝氨酸蛋白酶抑制剂A3-6、α1-抗胰蛋白酶和丝氨酸蛋白酶抑制剂A3-1前体).这些蛋白在LPS注射后6、12和24 h表达量显著高于0 h(P<0.05),但它们在6~24 h之间的表达量无显著差异.VD-结合蛋白前体、丝氨酸蛋白酶抑制剂A3-6、α1-抗胰蛋白酶和丝氨酸蛋白酶抑制剂A3-1前体在机体免疫调节中具有重要作用,这些蛋白的鉴定为揭示奶牛机体对LPS刺激应答的分子机制提供了基础资料. 相似文献