云南香料烟花叶病病原分离物的鉴定

从云南保山采集具典型花叶症状的香料烟病株，用病株汁液接种心叶烟，进行单斑分离纯化。电子显微镜观察到杆状病毒粒体（18nm×300nm），三抗体夹心酶联免疫吸附（TAS-EUSA）检测与烟草花叶病毒（Tobaccomma／cv／nu，TMV）抗血清呈阳性反应；用TMV外壳蛋白（CP）基因特异性引物进行RT-PCR扩增，克隆，经序列测定分析，侵染云南保山香料烟的病原分离物CP基因含480个核苷酸，编码159个氨基酸，通过核苷酸和氨基酸序列分析，与TMV-152的相似性最高，核苷酸序列的相似性为98．8％，推导编码氨基酸相似性达到100．0％，亲缘关系最近。根据这些特性，引起云南保山香料烟花叶病的病原分离物是烟草花叶病毒的一个分离物。     

云南省烟草病毒病发生状况的电镜研究及其防治

 对云南烟草病毒病进行了调查采样,应用病毒分离提纯技术、电子显微镜技术开展鉴定研究,得出:(1)烟草病毒病在田间的症状以花叶病为主,但多为复合症状,诊断价值不大;(2)云南烟草病毒病原以烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯病毒Y (PVY)为主、烟草蚀纹病毒(TEV)发生较为普遍,但为害不严重,此外有马铃薯病毒X (PVX)一种球形病毒[可能是番茄斑萎病毒(TSWV)]也有零星发生,以症状来看,还有环斑、曲叶、丛枝、条纹等类型,但未分离到明显的病原;(3)病毒病原的分布在云南主要烤烟栽培品种上没有明显差异,而与采集地点不同有明显的不同,即其分布主要与生态类型有关.同时,对烟草病毒病重病区宾川开展了集中采样鉴定研究并进行了初步防治试验.     

烟草曲叶病病原的鉴定及其细胞病理

应用电镜技术，结合粉虱传双生病毒的多抗血清和单克隆抗体采用免疫电镜（ISEM）和三抗体夹心酶联免疫吸附测定（TAS－ELISA），对云南烤烟、香料烟和白肋烟3种类型烟草上的曲叶病病原进行了检测鉴定，其病原为粉虱传双生病毒（WTG）；根据单克隆抗体分析表位抗原，可分为3组，其中香料烟曲叶病分离物中三者皆有，烤烟和白肋烟曲叶病分离物与香料烟曲叶病的一个分离物同属一组表位抗原类型；对3种烟草曲叶病的病原细胞进行了观察，在核内观察到典型的纤维环，细胞核和细胞质内都含大量的双生病毒颗粒，在细胞质中有病毒颗粒的聚集块，在胞间连丝中观察到病毒颗粒。     

云南省玉溪市玉米致死性坏死病毒原的分子鉴定

玉米致死性坏死病是由玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)和一种或多种马铃薯Y病毒科病毒复合侵染引起的。2014年1月在对云南省玉溪市玉米病毒病害的调查中发现了一些表现严重花叶、矮化叶片甚至整个植株坏死症状的玉米。对采集样品进行RT-PCR检测,所有样品中都同时检测到了MCMV和甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV),在一个样品中同时检测到了MCMV、SCMV和南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus)。     

番茄斑萎病毒对云南莴苣类蔬菜的侵染为害

莴苣类蔬菜是常见的食用蔬菜。近年在云南发现生菜、莴笋、油麦菜有症状表现为叶片黄化、褪绿、坏死斑的病害流行危害,为确定其病原,通过电子显微镜观察、回接试验、ELISA检测、病毒基因分析,在典型症状病样组织粗汁液和超薄切片中均观察到有类似番茄斑萎病毒属病毒的粒体,该病毒粒体为球形,直径80～85 nm; ELISA检测和病毒基因分析显示,侵染莴苣类蔬菜的病毒为番茄斑萎病毒。     

烘烤烟丝中残留病毒的检测

应用电镜、DAs-EusA技术检测烘烤烟丝样品K326—1和K326之中的病毒。电镜观察到2个样品中均有类似烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）的粒子,在K326-2烟丝中还有类似番茄斑萎病毒属（Tospovirus）的病毒粒子存在于细胞壁及细胞质中。2个样品均与TMV抗血清及西瓜银色斑驳病毒（WSMoV）抗血清呈阳性反应。结果表明经烘烤的烟丝中仍存在病毒。     

马铃薯Y病毒云南昭通烟草分离物的检测及年度间差异比较

利用DAS-ELISA检测试剂盒检测昭通烟草脉斑病样品,结果表明存在马铃薯Y病毒O株系和马铃薯Y病毒N株系两个不同株系病毒。利用Sprimer和M4引物扩增、克隆、测序,得到长度为1 771 bp目的片段,该片段包含病毒的外壳蛋白基因序列、3′ UTR序列以及部分Nib基因序列;序列分析表明与湖南HN 2分离物（GenBank No. GQ200836）和美国NE 11分离物（GenBank No. DQ157180）核苷酸序列相似性均为98%,系统进化分析表明其具有较近的亲缘关系。     

马铃薯病毒病原种类电镜研究初报

<正> 马铃薯是云南省高寒冷凉地区重要的粮食作物。在马铃薯生产中因病毒病引起的种质退化是产量损失的重要原因,目前许多国家建立了脱毒快繁供种体系以解决这一问题。脱毒种薯的一个重要评价指标是脱毒率,因此,病毒的检测鉴定是生产过程中一个关键的环节。为调查收集本地马铃薯病毒病原,1991年7月我们从会泽马铃薯     

烟草接种赤星病后细胞病变及化学防治时期研究

烤烟Ｋ３２６品种接种赤星病菌后,用透射电镜进行叶细胞观察及致病机理研究。随接种时间的延长烟叶细胞受损及崩解程度增加,而未接种的叶细胞内各种细胞器正常,完整,在染病前至病菌侵簇后细胞病变初期进行化学防治（喷施代森锰锌）,效果达１００％,接种后３６ｈ施药,烟叶出现病斑,施药时间越晚,发病越早,且病情越重,防治效果越差,感病１４ｈ后施药与不施药的病情差异不大。