两株乳酸杆菌对鸡新城疫HI抗体效价影响的研究

本研究利用两株乳酸杆菌L.casei.zhang和MG2-1制成乳酸菌液和发酵乳,以不同的剂量灌服给雏鸡,在10日龄和28日龄进行两次新城疫疫苗（Ⅳ系）滴鼻点眼免疫,在二免后的第7d和14d检测血凝抑制效价.结果表明,与对照组相比,试验各组抗体水平均达到显著或极显著水平,可提高抗体水平0.61～1.77（log2）.由于菌株、剂量等的差异,各试验组在提高抗体水平上也有所不同.两株乳酸杆菌制成乳酸菌液和发酵乳对雏鸡免疫机能均有促进作用.     

内蒙古地区部分奶牛场副结核病的血清学调查

采用ELISA检测方法对内蒙古地区17个奶牛场的2 391头奶牛进行牛副结核血清学检测。结果表明,大型奶牛场副结核的血清阳性率较低,在0~5%之间;小型奶牛场的副结核血清阳性率较高,平均阳性率为14.1%。调查结果提示,内蒙古地区奶牛场存在牛副结核病的流行,对该病的防控工作应给予高度重视。     

乳酸菌制剂对小鼠血清中IgG及肠道内SIgA影响的研究

试验以2株乳杆菌MG2 1、L casei zhang按不同剂量分别饲喂小鼠,在5,10,15,20,25,30天测定其血清中IgG及肠道内SIgA含量。结果表明:饲喂不同剂量2株菌的乳悬液均能极显著地提高IgG、SIgA的含量(P<0.01)。在提高IgG含量方面,2菌株均表现出低、中剂量饲喂组随着饲喂时间的不断增加,有超过高剂量组的趋势。在第25天时,菌株MG2 1中剂量组极显著地高于高剂量组;L casei zhang低剂量组极显著地高于中、高剂量组。而SIgA高剂量组比低、中剂量组高。     

鸡沙门氏菌外膜蛋白亚单位疫苗的研究

用十二烷酰肌氨酸法提取鸡沙门氏菌外膜蛋白（OMP）作为抗原，制备免疫激发复合物型（Immunostimulating Complex,ISCOM）亚单位疫苗。ISCOM型OMP亚单位疫苗在电镜下可笼型颗粒结构，直径为60mm-120nm。无菌性检测结果为无菌，具有可靠的安全性。对3周龄雏鸡肌注接种，6周龄攻毒，接种80ugOMP／只ISCOM型亚单位疫苗的雏鸡以鸡白痢沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌的攻击具有显著的免疫保护力。     

鸡沙门氏菌外膜蛋白亚单位疫苗的研究——Ⅱ油乳剂型(OE)亚单位疫苗的研究

用十二烷酰肌氨酸法提取鸡沙门氏菌外膜蛋白，作为抗原，制备油乳剂型（Ｏｉｌ　Ｅｍｕｌｓｉｏｎ　ＯＥ） 亚单位疫苗。该亚单位疫苗为油包水（Ｗ／Ｏ）型，稳定性良好，安全可靠。对３周龄雏鸡用该疫苗肌注接种，６周龄攻毒，结果表明，接种 ８００ｕｇ ＯＭＰ／只油乳剂型亚单位疫苗的雏鸡对鸡白痢沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌的攻击具有显著的免疫保护力。     

羊口疮病毒QD/2015株B2L基因克隆及生物信息学分析

为分析羊口疮病毒(ORFV/QD/2015株)B2L基因的分子特征,预测其编码蛋白的生物学功能,对其B2L基因进行PCR扩增、克隆及序列测定,应用生物信息学相关软件及方法,对扩增所得的基因进行序列分析,并对其编码蛋白的二级结构、细胞抗原表位、三级结构、跨膜结构域和信号肽等进行预测和分析。结果显示:ORFV/QD/2015株B2L基因序列长1 137 bp,编码379个氨基酸;该毒株与其他12株羊口疮病毒参考株的B2L基因核苷酸序列同源性为96.8%~99.7%,氨基酸序列同源性为96.8%~99.2%。系统进化分析显示,ORFV/QD/2015株与2015年分离到的ORFV/Shaan Xi/2015/China株亲缘关系最近;B2L基因编码蛋白二级结构以α-螺旋区域和β-折叠区域所占比例较大,预测此蛋白可能存在7个细胞优势抗原表位,无跨膜区域,无信号肽区域;三级结构呈弯曲状螺旋结构。     

应用反转录聚合酶链反应检测鸡传染性支气管炎病毒核酸的研究

根据国外报道的鸡传染性支气管炎病（ＩＢＶ）Ｇｒａｙ株的纤突蛋白（Ｓ１）核苷酸序列，自行设计合成了Ｓ１蛋白主要抗原决定簇基因两侧的１对引物，跨幅为１．０ｋｂ。用该引物对从内蒙古、天津、山东等地分离的３株ＩＢＶ进行ＲＮＡ提取，反转录后ＰＣＲ，经琼脂糖凝胶电泳结果表明，３株毒株均获得了与预期一致的ＰＣＲ产物；此外，ＩＢＶＰＣＲ灵敏度的测定结果表明，ＰＣＲ方法可检测出１０ｐｇ的模板，ＰＣＲ酶切结果为，ＨａｅⅢ、ＴａｇⅠ酶对３株ＰＣＲ产物均有１个酶切位点，而ＭｓＰⅠ酶无酶切位点     

2株鸡新城疫病毒的F基因序列测定及其遗传变异分析

将内蒙古地区呼和浩特市和包头市获得的两株鸡新城疫病毒分离株纯化培养后,提取病毒RNA,用一步法RT—PCR扩增F基因,测出F基因的全部核苷酸序列为1662bp,编码554个氨基酸。与国内外发表的部分NDV病毒的核苷酸序列进行比较。结果表明,这两株分离株核苷酸同源性为97．5％,与标准毒株F48E9的同源性分别为86．8％和85．8％。与长春、广东、广西、山东、河北、浙江、韩国等地的NDV的同源性在96.3％-98．8％之间。并且这2株分离株F蛋白的裂解位点氨基酸组成为112R—R-Q—K—R—F117,具有典型的强毒株裂解位点的特点。     

羊口疮病毒环介导等温扩增高效检测方法的建立

羊口疮(ORF)的快速诊断对于该病的防控至关重要,而环介导等温扩增(LAMP)技术可以满足对羊口疮病毒(ORFV)高效性的现场检测需求。本试验对ORFVVIR基因扩增,通过优化反应条件,对LAMP检测ORFV进行了显色反应、特异性和灵敏性的检测,并进行了后续的临床检测。结果显示,利用优化的LAMP染色法,将呈现绿色的阳性组与橙色的阴性组区分开。对扩增的质粒和阳性对照样品的检测呈现出了阳性条带,而对山羊痘、绵羊痘、牛传染性鼻气管炎和牛副流感3型病毒的检测并无阳性条带。优化的LAMP检测ORFV的灵敏度比传统PCR高出1 000倍。对15份临床样品检测的结果表明,优化的LAMP电泳和染色法对ORFV的检出率均为100%,与传统PCR检测结果相一致。上述结果表明优化的LAMP对ORFV的检测具有特异性、高灵敏性且更加方便等优点,从而更适用于现场的高效检测。