不同培养阶段的组培平贝母中碳水化合物代谢的研究

[目的]进一步深入研究贝母器官发生机理,为今后分子水平上的研究提供参考。[方法]以平贝母为供试材料,以培养体的可溶性总糖含量、还原糖含量和淀粉含量为指标,研究了组培平贝母培养过程中培养体不同发育时期的碳水化合物代谢。[结果]培养体内可溶性总糖和还原糖含量按照组培平贝母培养体不同发育时期呈先降低后升高的趋势,到小鳞茎膨大时（小鳞茎-2）,可溶性糖和还原糖的含量均达到最高,分别为53.41和9.23mg/g。不同阶段培养体内淀粉含量整体呈上升-下降-上升的趋势,在愈伤组织时期淀粉含量最低为42.32mg/g,而小鳞茎膨大时（小鳞茎-2）达到最高值为84.06mg/g。[结论]探明了碳水化合物代谢机制,为贝母器官发生机理提供理论依据。     

葡萄5BB品种SRAP-PCR反应体系影响因素

为建立适合葡萄5BB品种的SRAP-PCR反应体系,利用正交设计对葡萄SRAP-PCR反应体系5种因素(Taq DNA聚合酶,Mg2+,模板DNA,dNTP,引物)4个水平进行优化。结果表明,各因素水平变化对PCR反应的影响从大到小顺序为:Mg2+,引物,dNTP,Taq DNA聚合酶,模板DNA;筛选出各因素的最佳水平,建立了葡萄5BB品种SRAP-PCR反应的最佳体系(20μL)为:Taq DNA聚合酶2U,Mg2+2.0mmol/L,模板DNA60ng,dNTP0.25mmol/L,引物0.10μmol/L。这一优化系统的建立为今后利用SRAP标记技术对葡萄进行相关研究提供了帮助。     

组培平贝母形态转变过程中过氧化物酶同工酶变化的研究

以平贝母为供试材料,研究了组培平贝母培养过程中培养体不同发育时期的过氧化物酶同工酶的变化。结果表明:在发育过程中各培养体的过氧化物酶同工酶在形成小鳞茎后酶带比较稳定,且酶带数最多,达到8条,愈伤组织在Rf=0.275处出现了颜色较浅且细的特异性带,而其它时期的培养体则没有此带,其活性也在刚形成小鳞茎时达最高。     

铵态氮和硝态氮浓度对金线莲丛生芽中活性物质积累的影响

为高效培养金线莲丛生芽,并生产大量有效物质,本研究探明了培养基中硝态氮和铵态氮浓度比对悬浮培养金线莲丛生芽有效物质积累的影响。结果表明:在MS培养基中,NO_3~-和NH_4~+浓度为30/15m mol/L时,最有利于金线莲丛生芽生物量的积累,丛生芽的鲜重和干重分别达到17.52和1.91g;有效物质的积累也最高,多糖和金线莲苷生产量分别达到7.42和1.33g/L。同时初步探究了金线莲提取物对酪氨酸酶活性的抑制效果,结果表明:金线莲丛生芽甲醇、乙醇提取物对酪氨酸酶具有较好的抑制效果,分别为54%和59%。因此,通过金线莲悬浮培养生产有效物质时,可将MS培养基中的硝态氮的浓度调节为15m mol/L,而铵态氮调节为30m mol/L,并采用金线莲丛生芽乙醇提取物可更好的抑制黑色素。     

贯叶连翘愈伤组织和不定根培养的研究

为探索贯叶连翘愈伤组织和不定根反应器大量扩繁的最佳条件,以贯叶连翘种子为材料,对愈伤组织的诱导和增殖条件进行优化,并对不同培养条件下愈伤组织和不定根增殖生长情况进行调查。结果表明,愈伤组织在附加吲哚丁酸(IBA)4mg/L,激动素(KT)0.02mg/L和蔗糖30g/L的MS培养基中增殖效果佳。无论是愈伤组织还是不定根的增殖,反应器培养效果好于固体培养和振荡培养。在生物反应器内培养不定根的过程中,研究了培养基中pH值对不定根增殖生长和不定根中金丝桃素含量的影响,结果pH值为4.8～7.8时不定根生长不受pH值的影响,但金丝桃素的含量在pH值为4.8和5.8处理中显著高于pH值为6.8和7.8的处理,金丝桃素生产量也在pH值为4.8和5.8处理中较高(7.09和6.77mg/L)。说明利用反应器进行愈伤组织和不定根培养是短期内获得有效物质的有效方法之一。     

植物组织培养中降低培养基成本的研究

在马铃薯、菊花和满天星的发根阶段研究了用自来水代替蒸馏水、白糖代替蔗糖的可行性．结果表明：马铃薯、菊花和满天星培养苗的生长在蔗糖与白糖、蒸馏水与自来水的处理间无显著性差异，因此规模化生产上配制培养基时用白糖取代蔗糖，自来水取代蒸馏水完全可行．     

温度及昼夜温差对马铃薯脱毒苗生长的影响

研究温度和昼夜温差对生物反应器内培养的马铃薯脱毒苗生长的影响,结果表明,25℃的培养温度对Atlantic和Russet Burbank两品种节数和株高的增加有利,而30℃有利于幼苗鲜物重及根鲜物重的增加;昼夜温差对Atlantic和Russet Burbank两品种幼苗的生长影响不同,昼夜温差为25/20℃时,Atlantic的节数、幼苗鲜物重和根鲜物重最佳,而昼夜温度差25/25℃的恒温条件有利于Russet Burbank马铃薯脱毒苗的生长.