中西医结合治疗肠炎型犬细小病毒病

犬细小病毒病是由犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)引起的急性致死性传染病,对养犬业危害极大,其特征是非化脓性心肌炎或出血性肠炎.该病在临床上可分为两个类型:心肌炎型和肠炎型,其中心肌炎型发病急、死亡快、死亡率高,门诊中肠炎型更为多见.自1999年以来,景德镇市畜牧兽医站宠物门诊部共接诊肠炎型犬细小病毒病496例,并尝试采取不同的方法治疗,对云南白药、维迪康深部灌肠治疗本病作重点研究,取得满意的效果,现总结如下:     

两系杂交稻稻曲病发生规律及防治

为控制日益严重的两系杂交稻稻曲病的危害，分别对不同杂交组合按新分级标准系统调查田间病情，并进行多种田间小区药剂试验和综防示范，探讨两系杂交稻稻曲病的发生规律及防治措施，结果表明，两系杂交稻稻曲病的发生与组合的抗性密切相关，稻曲病的田间发生用逻辑斯蒂曲线模型拟合，防治稻曲病的药剂以瘟曲克星的防效最好，防治适期足水稻孕穗未期至破口期。对感病绘经剂防治药两次比施药一次效果好；以推广抗病 基础的综合防治措施切实行可行，防治效果显著。     

猪星状病毒nsP1a/4蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备

为了获得猪星状病毒(Porcine astrovirus, PAstV)重组蛋白nsP1a/4和多克隆抗体nsP1a/4,试验采用PCR技术扩增得到nsP1a/4基因片段,通过双酶切技术鉴定重组表达质粒nsP1a/4-pET-32a。利用大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞表达重组蛋白nsP1a/4,通过SDS-PAGE鉴定重组蛋白nsP1a/4表达情况及可溶性。利用Ni-Agarose Resin纯化重组蛋白nsP1a/4,再通过Western-bolt验证。以纯化的重组蛋白nsP1a/4免疫健康新西兰大白兔制备多克隆抗体nsP1a/4,通过Western-bolt检验多克隆抗体nsP1a/4的特异性。结果表明：试验扩增出nsP1a/4基因片段,成功构建出重组表达质粒nsP1a/4-pET-32a,重组蛋白nsP1a/4以包涵体形式在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中大量表达。经Ni-Agarose Resin纯化的重组蛋白nsP1a/4单一,Western-bolt成功鉴定到重组蛋白nsP1a/4,多克隆抗体nsP1a/4能与重组蛋白nsP1a/4发生特异性结合。说明试验成功制...     

联合收割机“南征北战”跨区跨省作业知识讲座(待续)

联合收割机“南征北战”跨区跨省作业知识讲座（待续）□戴建功王天樟一、“南征北战”机收小麦的形成与作用“南征北战”机收小麦从宏观上指是用联合收割机跨区跨省进行的小麦联合收获,即由政府职能部门把分散经营的联合收割机组织起来,统一指挥和调配,利用各区域小麦...     

猪流行性腹泻病毒特异性SIgA 间接ELISA检测方法的建立及初步应用

以乳汁中SIgA特有的成分SC蛋白为研究对象,运用基因克隆、原核表达等方法,制备兔抗猪SC多克隆抗体,使用猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV) S截短蛋白进行包被后,初步建立了一种可以检测母猪初乳中PEDV特异性SIgA抗体的ELISA方法。结果显示,PEDV特异性SIgA检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点。结果表明,该方法适用于检测临床中SIgA。该方法的成功建立为生产中评估仔猪从乳汁中获得SIgA的效率及制定更为完善的母猪免疫程序提供了有效的技术支持。     

一例猪流行性腹泻病毒与猪肠道病毒9型、猪嵴病毒混合感染的诊断与分析

2018年初崇左市某家庭式养猪场发生腹泻疫情,初生仔猪水样腹泻,呕吐,脱水,消瘦,形成僵猪,大量死亡。为调查此次疫情发生的原因,试验通过临床剖检和实验室PCR/RT-PCR检测来进行分析。结果表明:临床剖检病变主要集中在小肠部位,肠系膜淋巴结肿大、充血,肠壁变薄。实验室检测发现存在猪流行性腹泻病毒、猪肠道病毒9型和猪嵴病毒的混合感染。结合本病例的流行病学数据、剖检病变及实验室检测结果,认为此次疫情主要由猪流行性腹泻病毒感染引起,部分病猪同时还感染猪肠道病毒9型和猪嵴病毒。说明应加强生物安全和提高仔猪免疫力以预防仔猪腹泻。     

猪轮状病毒VP4、VP6蛋白原核表达及多克隆抗体的制备

猪轮状病毒(porcine rotavirus, PoRV)属于呼肠孤病毒科,轮状病毒属,是引起幼年仔猪发生腹泻的主要病原之一,常与其他病原发生混合感染。PoRV结构蛋白VP4、VP6分别组成病毒的纤突及内衣壳,在病毒侵入、复制以及维持病毒粒子形态中起到重要作用。为研究PoRV VP4和VP6蛋白相关特性,分别扩增VP4开放阅读框中抗原性较好的两部分：58～1 080 bp基因片段(1 023 bp)、1 657～2 328 bp基因片段(672 bp),以及VP6完整开放阅读框(1 191 bp),成功构建重组表达质粒pET32a-VP4-672、pET32a-VP4-1023和pET32a-VP6,经测序正确后转化BL21感受态细胞中,经IPTG诱导,重组蛋白均以包涵体形式表达,融合蛋白大小分别约为44,58,64 kDa,与预期大小相符。将纯化后的蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔源多克隆抗体,间接ELISA方法测定多抗效价均在1∶10⁶以上,免疫印迹(Western blot)和间接免疫荧光(IFA)检测结果显示多抗均可与病毒蛋白产生良好的抗原抗体反应。本研究结...     

猪繁殖与呼吸综合征病毒强弱毒株嵌合感染性克隆的构建及鉴定

查明猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)致病性大幅增高的机制,进而研制用于防治流行PRRSV变异株的高效疫苗无疑是兽医工作者的当务之急.在弱毒株APRRS的全长感染性克隆pAPRRS以及我室构建的高致病性HP PRRSV感染性克隆pJX143的基础上,构建了nsp2替换的强弱毒PRRSV嵌合感染性克隆.将构建的嵌合克隆转染MA104,4d后观察到典型的CPE.通过RT-PCR和免疫荧光证明获得了一系列强弱毒株之间的嵌合病毒.这些嵌合病毒的构建成功和相应反向遗传操作平台的建立及应用,为研发预防HP PRRSV的高效嵌合疫苗奠定了基础.该类嵌合感染性cDNA克隆也为解析目前流行的HP PRRSV毒力因子和高致病力机制奠定了基础.     

稻田赤斑黑沫蝉成虫空间分布型及抽样技术研究

采用Ｔａｙｌａｒ法和Ｉｗａｏ法测定了赤斑黑沫蝉成虫稻田空间分布型。结果表明，赤斑黑沫蝉成在稻田呈聚集分布，聚集原因是由环境因素引起的；田疃抽样以平行疆式、棋盘式两种抽样方法为佳，此外，利用分布型参数确定了理论抽样数及序贯抽样方法。