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为建立一种可以同时扩增大肠杆菌(E.coli)F4、F5、F6、F41和F18菌毛基因保守序列的多重PCR检测方法,本研究设计合成5对分别针对F4、F5、F6、F41和F18菌毛基因的特异性引物,以具有相应菌毛基因的E.coli参考菌株DNA为模板,通过对多重PCR反应条件的优化,建立了检测F4、F5、F6、F41和F18菌毛基因的多重PCR方法。所建立的多重PCR方法能够特异性扩增F4、F5、F6、F41、F18菌毛基因的目的片段,大小分别为770 bp、533 bp、422 bp、643 bp和1140 bp,该方法对沙门氏菌、猪丹毒杆菌、巴氏杆菌以及无菌毛基因的E.coli等参考菌株均无特异性扩增片段,检出F4、F5、F6、F41和F18菌毛基因的最低活菌浓度分别为5.3×10^5cfu/mL、3.7×10^6cfu/mL、3.1×10^5cfu/mL、3.7×10^7cfu/mL、6.9×10^5cfu/mL。用不同批次的引物和试剂进行3次多重PCR检测均能扩增出目的条带,表明建立的多重PCR方法有很好的批内和批间重复性。对90株大肠杆菌临床分离菌株菌毛基因进行检测,F4阳性率为3.33%,F5阳性率为2.22%,未检测到F6、F41和F18阳性菌株,其检测结果与常规单一PCR的检测结果一致。研究表明:建立的E.coli菌毛基因多重PCR分型方法具有很好的特异性、敏感性和重复性,可用于E.coli分离菌株菌毛基因型的快速鉴定,同时提高了检测效率。 相似文献
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旋毛虫各隔离种雌虫生殖能力的实验研究 总被引:4,自引:0,他引:4
本试验对旋毛虫各隔离种雌虫体外产新生幼虫能力进行了研究。结果显示,猪旋毛虫和旋毛形线虫(Trichinella
spiralis)雌虫体外培养24h平均产新生幼虫数分别为66.00±7.34和76.20±7.57,而犬旋毛虫和本地毛形线虫(Trichinella
nativa)分别是28.80±4.30和22.00±3.22,前者在雌虫体外产幼虫能力上明显高于后者。研究结果表明,黑龙江猪旋毛虫相当于旋毛虫形线虫,犬旋毛虫相当于本地毛形线虫。 相似文献
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有机磷农药(organophosphatepesticides,OPPs)是国内生产和使用较多的一类农药,生产量占全国农药总产量的一半以上。据报道,1997年,我国农业用农药总产量35.7万吨,其中有机磷农药20万吨左右,约占整个农药产量的57%。南于其杀虫范围广,毒性较小等特点,在农业病虫害防治上被广泛使用,但也对环境造成了严重的污染。 相似文献
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将昆明鼠随机分为A、B两组,分别肌肉注射含有猪轮状病毒(RV)JL94株VP7基因的重组真核表达质粒pcDNA-VP7和真核表达载体pcDNA3.1(+),每只鼠100μg·(100μL)-1,共免疫3次,每次间隔2周。首次免疫第0,14,21,28,35,39,47,54天采血分离血清用ELISA法检测抗体动态变化。A组小鼠血清在首免后第14天即可检出阳性抗体(P/N≥2.0)。 相似文献
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轮状病毒(Ro-tavirus,RV)属呼肠孤病毒科的成员,是引起婴幼儿和多种幼龄动物急性腹泻的非菌性腹泻的主要病原体。1973年Bishop等在澳大利亚从腹泻患儿十二指肠粘膜及粪便中发现了一种新的病毒粒子。不论在发展中国家或是发达国家,因严重腹泻住院的3岁以下病儿中有20%~70%是轮状病毒感染性腹泻,平均为33%。世界卫生组织报告,每年有70万或者说每天有2000婴幼儿死于轮状病毒腹泻,其中发展中国家占全部腹泻死亡数的25%。Woode等在1974年首次从猪分离出轮状病毒,我国阙玲玲1982年首先在台湾发现猪轮状病毒(Porcine Rotavirus,PRV),以后江苏… 相似文献
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