蝴蝶兰ACC合成酶基因片段的克隆及其反义表达载体的构建

［目的］克隆蝴蝶兰ACC合成酶cDNA片段,构建其反义表达载体。［方法］根据已报道的蝴蝶兰ACC合成酶的基因序列,设计并合成了1对引物,通过RTPCR以蝴蝶兰总RNA中扩增出ACC合成酶的cDNA片段,将其连接到MD19T质粒载体上进行测序。用XbaⅠ和SacⅠ对重组质粒和pBI221酶切后连接,构建蝴蝶兰ACC合成酶的反义基因表达载体。［结果］获得了蝴蝶兰ACC合成酶的cDNA片段,测序结果显示,该片段与参考的已报道序列具有98.92%和76.36%的同源性。通过引入XbaⅠ和SacⅠ酶切位点,进行载体构建,构建了蝴蝶兰ACC合成酶的反义基因表达载体。［结论］成功构建了蝴蝶兰ACC合成酶的反义基因植物表达载体,为进一步研究其对蝴蝶兰花期和生长的影响打下了基础。     

蓝狐GDF-8多态性及其血液生化指标的测定

随机选取50只蓝狐,提取基因组DNA进行聚合酶链式反应（PCR）,获得GDF-8基因第3外显子序列,测得BB和AB两个基因型。然后对两种基因型蓝狐碱性磷酸酶（ALP）、血清白蛋白（ALB）、血清总蛋白（TP）进行了测定。结果表明：、水平ALPTP在两基因型个体间差异不显著（P〉0.05）,而血清白蛋白水平差异极显著（P〈0.01）。     

蝴蝶兰2种病毒的同步检测及其CP融合反义表达载体构建

【目的】建兰花叶病毒(CyMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)是侵染蝴蝶兰最主要的2种病毒,给蝴蝶兰产业造成巨大经济损失。本文建立了快速检测这2种病毒的方法,并为培育同时抗CyMV和ORSV的蝴蝶兰新品种奠定基础。【方法】根据2种病毒CP基因序列设计了2对特异性引物,运用RT-PCR方法同时检测这2种病毒,利用反义RNA技术构建2种病毒CP基因的融合表达载体。【结果】利用设计的特异性引物检测12株蝴蝶兰样品,有25%同时检测出2种病毒,在同一PCR反应体系中,扩增出2个目的条带清晰无杂带。从感病蝴蝶兰叶片总RNA中克隆出CyMV CP基因的125 bp片段和ORSV CP基因的164 bp片段。将CyMV的CP基因片段以3’→5’方向与表达载体p CAMBIA1300连接,命名为p CAMBIA1300-CyMV,经酶切及菌落PCR鉴定可获得125 bp的小片段;再将ORSV的CP基因片段以3’→5’方向与p CAMBIA1300-CyMV连接,命名p CAMBIA1300-CyMV-ORSV,经酶切及菌落PCR鉴定可获得289 bp的片段。【结论】所设计的2对特异性引物能够在同一PCR体系中快速高效地检测出CyMV和ORSV,含2种病毒CP基因的反义融合表达载体构建成功。     

蕙兰TUB基因片段的克隆与序列分析

对蕙兰TUB基因片段进行克隆与序列分析,为蕙兰内参基因的筛选和研究其生理功能提供研究基础。根据NCBI已经公布的TUB基因的同源核苷酸保守序列,进行简并引物设计,利用RT-PCR的方法,以蕙兰花蕾期的花葶为材料,克隆了5条TUB基因片段。序列分析结果表明,5条TUB基因片段长度均为1055bp,编码351个氨基酸,具有2个TUB基因标记位点：Tubulin-betamRNAautoregulationsignal：MREI和Tubulinsubunitsalpha,beta,andgammasignature(GGGTGSG)特征信号序列。各片段之间同源性高达91.72%,经BLAST分析,与小麦的TUB1同源性可达85%。利用DNAMAN等生物软件推断的氨基酸,与毛果杨、蓖麻、葡萄同源性达97%。研究中得到的5个基因序列是TUB基因的同源片段,分别命名为CfTUB1、CfTUB2、CfTUB3、CfTUB4和CfTUB5,并在GenBank注册,登录号分为JN177713、JN177714、JN177715、JN177716和JN177717。     

环保型保鲜液在家庭瓶插百合保鲜中的应用

以百合"黄天霸"为试材,以蔗糖、葡萄糖、酒精、NaCl、阿司匹林及维生素C等家庭常用原料配置不同保鲜液,研究不同保鲜液组合对百合"黄天霸"切花瓶插效果的影响。结果表明:各保鲜液处理均可不同程度地延长切花瓶插寿命,提高观赏价值,其中以P7处理(水+葡萄糖20g/L+维生素C 100mg/L)保鲜效果最好;维生素C可明显推迟开花,且使花苞增大,叶片保持绿色时间较长;NaCl可以适当延长百合切花的盛花期,进而延长瓶插寿命;添加0.5%的酒精能够使花径增大;添加阿司匹林能使花期提前,且明显延长盛花期。     

�༹��EF1α����Ƭ�εĿ�¡�����з���

为探明萼脊兰EF1α基因在生长发育过程中的生理功能和作为内参基因的稳定性及适用性,根据NCBI中植物翻译延长因子同源核苷酸保守序列设计简并引物,以萼脊兰叶片为试验材料,采用RNAprep多糖多酚植物总RNA提取试剂盒提取RNA,利用RT-PCR技术克隆翻译延伸因子EF1α,并进行生物信息学分析.结果表明:EF1α基因长620 bp,编码206个氨基酸,编码的蛋白为亲水性蛋白,相对分子质量为23.16 KD,等电点为8.50;经二级结构分析,α-螺旋占29.61％,延伸链占31.55％,无规则卷曲占38.83％;亚细胞定位在细胞质;EF1α基因与朵丽蝶兰杂交品种翻译延伸因子蛋白的一致性较高,进化距离最近.在GenBank登录号为KT223116.     

左卡尼汀对高脂血症大鼠血脂代谢的影响及抗氧化作用

为了观察左卡尼汀( L-carnitine,LC)对高脂血症大鼠血脂代谢的影响及抗氧化作用,将50只健康SD大鼠随机分成5组,分别接受标准饲料、高脂饲料、高脂饲料加低、中、高剂量[(0.25、0.50、1.00g/(kg·d)]LC灌胃处理.连续灌服给药28 d后,测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量及血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果表明,与高脂模型组相比,给予LC可显著降低血清TC、TG、LDL-C含量,增加HDL-C含量;血清和肝脏中SOD活性提高、MDA含量降低(P＜0.05).表明LC对高脂血症大鼠有明显的降血脂和改善体内抗氧化能力的作用.     

河岸带不同植被下土壤酶特征及其去污效果

通过测定河岸带常见植被类型下的土壤酶活性,比较其去污效果,分析土壤酶活性与TN、TP、NH4＋-N、COD等农业面源污染物去除率的相关性。结果表明,不同植被类型表层土壤酶活性存在显著差异（P〈0.05）,灌草、草本酶活性较大,乔灌草次之,乔草最小,而不同植被河岸带对农业面源污染物的去除率也表现出基本相同的规律,因此对农业面源污染去除效果最好的河岸带植被类型配置应为灌草或草本（芦苇）;不同植被深层土壤酶活性基本不存在显著差异。由相关性分析可知,TN、NH4＋-N去除率与表层土壤脲酶活性呈显著相关关系,而COD去除率与土壤脲酶的相关性不显著;TP、COD去除率与土壤磷酸酶活性的相关性显著。研究结果为利用土壤酶活性强度作为评价河岸带净化效果的指标提供了理论依据。     

蛋氨酸螯合铬与甜菜碱对肥育猪体蛋白质沉积的影响

本文旨在研究不同水平的蛋氨酸螯合铬与甜菜碱时肥育猪体蛋白质沉积的影响,并初步探讨两者的互作效应.选用81头平均初始体重52 kg左右的三江白猪肥育猪为试验材料,随机分成9组,每组3个重复,每个重复3头猪.采用2因子(蛋氨酸螯舍铬X甜菜碱)3水平有重复试验设计.试验组日粮为在玉米-豆粕型基础日粮上添加不同水平的蛋氨酸螯合铬(以铬计0、200、400 μg/kg)与甜菜at(0、1000、1250 mg/kg),对照组饲喂基础日粮.试验结果表明:(1)时第7肋背膘厚和眼肌面积存在交互作用,与对照组相比差异显著(P<0.05).(2)对总蛋白质、尿素和葡萄糖存在交互作用,与对照组相比差异显著(P<0.05).(3)生长激素、胰岛素样生长因子-Ⅰ、胰岛素含量与对照组相比差异显著(P<0.05),存在交互作用.结果表明复合添加优于单独添加.     

毛刺槐低位嫁接繁育技术

<正>毛刺槐(Robinia hispida L.)为豆科刺槐属落叶灌木,原产北美,外观优美,茎、枝、叶柄及花序上均密生红色长刺毛,奇数羽状复叶。5～8月开花,总状花序,蝶形花冠玫瑰红或淡紫色。毛刺槐花枝招展,艳丽夺目,已成为良好的园林绿化观赏树种。笔者从美国引进种子,播种育苗的效果较差,不但成活率低,而且苗木长势较弱。据资料介绍毛刺槐为三倍体植物,种子很少结实,且发芽率较低,这也