鸡传染性支气管炎病毒S1和N基因遗传变异的相关性

对国内1992—2005年分离的IBV毒株的纤突蛋白(S1)和核衣壳蛋白(N)基因分别进行克隆测序,结合在GenBank中发表的IBV S1和N基因的序列,对其不同毒株的S1或N基因片段和全长、S1和N基因全长分别进行遗传变异的研究,利用统计学软件SPSS11.5进行同源性相关分析。结果表明:不同IBV毒株N或S1基因片段与其全长之间遗传变异高度相关,核苷酸r≥0.892,氨基酸0.854≤r≤0.968;但S1与N基因全长之间核苷酸的遗传变异相关性相对较低一些,而且有些毒株间S1基因同源性很低(r=0.645),但N基因同源性仍很高,显示每个基因变异的独立性。国内IBV疫苗株之间S1和N基因核苷酸高度同源(S1≥97.3%;N≥90.7%),而野毒株与疫苗株相比S1和N基因同源性均较低(S1≤84.3%;N≤87.1%),这也可能与常规疫苗对IBV野毒株不能有效保护有关。     

禽沙门菌分离鉴定方法的建立与优化

本研究旨在建立和优化禽沙门菌分离鉴定的方法。选择山东省某地方品种鸡疑似发生沙门菌病的未出壳死胚样品24份,通过4组不同的培养基组合比较沙门菌的分离情况,选择沙门菌通用引物两对和鸡白痢特异性引物一对进行分离株的PCR检测,比较其特异性,然后进行血清分型和MLST分型,确定沙门菌类型并研究其相关性。结果表明,该批样品中TTB比SC增菌效果好,XLD和XLT4选择培养基对沙门菌分离效果相同,最终通过PCR方法鉴定出沙门菌阳性率为58.3%;发现两对通用引物特异性一致,表明可任选一对引物进行PCR鉴定;用鸡白痢沙门菌特异性引物完成的PCR鉴定结果显示,14株沙门菌中有7株为鸡白痢沙门菌;血清型鉴定结果表明,14株沙门菌中有7株鸡白痢沙门菌、7株肠炎沙门菌,共两种血清型;MLST分子分型结果表明,14株沙门菌分为3个ST型,分别是7株ST11、3株ST92和4株ST2151,其中ST11为肠炎沙门菌,ST92和ST2151为鸡白痢沙门菌;本研究表明,疑似沙门菌感染样品经BPW和TTB增菌、XLD或XLT4选择培养基分离培养,最后通过PCR方法可准确完成沙门菌的分离鉴定;同时,应用该方法可完成对鸡白痢沙门菌的鉴定,并与血清分型和MLST分子分型结果一致。     

我国鸡群中禽白血病流行现状和对策

鸡白血病及鸡白血病病毒(ALV)感染对鸡群的危害巨大.通过近年来对血清中鸡白血病病毒抗体检测发现,鸡白血病病毒感染在我国非常普遍,尤其是地方品系,且绝大部分为ALV-J,少数为ALV-A.对白血病的防制,目前尚无商品化疫苗,只能依靠对种鸡群的净化.     

发酵床连续养殖对白羽肉鸡病毒感染状态影响的分析

发酵床连续养殖是环保,节能的养殖技术,但它是否对疫病控制有不良影响,则是需关注的另一方向。采集同一地区不同养殖方式的白羽肉鸡样品,采用斑点杂交技术和抗体检测技术检测,试验结果表明,两种养殖方式在马立克氏病病毒(MDV)、网状内皮细胞增生病病毒(REV)检测结果上没有差别;在禽贫血病病毒(CAV)检测上抗体差异明显:发酵床养殖阳性率为28%,普通网上养殖阳性率为86%;NDV HI抗体滴度差异极显著(P<0.01)。综合评价发酵床连续养殖可有效控制疫病的感染。     

鸡白血病防控面临的挑战

<正>1急性纤维细胞肉瘤近两年,急性纤维细胞肉瘤已开始在个别地区商品代肉杂鸡群局部流行。该病一旦传播开会给国内的肉杂鸡甚至商品肉鸡造成危害。通过试验证明,该病可以横向传播,特别是通过疫苗接种的注射针头,至少可使随后被注射的第3只鸡被     

马立克病病毒疫苗株CVI988的38kd磷蛋白基因双氨基酸突变株

利用单克隆抗体H19及间接免疫荧光抗体反应(IFA),从经马立克病病毒(MDV)强毒株Mdll的38kd磷蛋白(pp38)基因克隆质粒DNA转染的MDV疫苗毒CVl988株感染的鸡胚成纤维细胞中。筛选到一个点突变株CVI／rpp38(AA)。DNA序列测定结果表明,该点突变株pp38基因ORF的第320位和326位碱基均已从亲本CVl988株的“G”突变为“A”,导致第107和109位氨基酸分别从精氨酸和甘氨酸转变为谷氨酰胺和谷氨酸。这个双氨基酸点突变株在IFA和免疫沉淀反应中与pp38特异性单抗H19都呈现阳性反应。但与另一个pp38特异性单抗T65都完全不反应,表现出与亲本病毒完全相反的结果。本研究发现了MDV的pp38上二个特异性不同的抗原表位,并以确凿的证据证明了第107及109位的谷氨酰胺和甘氨酸分别在这二个抗原表位形成中的关键作用。     

脉冲电场凝胶电泳技术

脉冲电场凝胶电泳技术朱国强崔治中王永坤（江苏农学院动物医学系，扬州２２５００９）脉冲电场凝脉电泳（ｐｕｌｓｅｄ－ｆｉｅｌｄｇｅｌｅｌｅｃ－ｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＰＦＧＥ），又称脉冲式交变电场电泳，随着时间与电流大小的交替改变，使ＤＮＡ分子能不断地调...     

J亚群禽白血病病毒与禽网状内皮增生症病毒共感染对肉鸡生长和免疫功能的抑制作用

1日龄网鸡感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J)以及共感染禽网状内皮增生症病毒(REV)后,肉鸡生长发育明显受阻,体重增重明显下降(P＜0.05),法氏囊、胸腺明显萎缩(P＜0.05),在用新城疫疫苗免疫后,感染组血清中新城疫抗体效价显著低于对照组(P＜0.05);在ALV-J和REV共感染后,这种抑制作用更为明显(P＜0.01).ALV J单独感染后,鸡对传染性法氏囊病病毒(IBDV)弱毒疫苗免疫后的抗体反应与对照组没有明显差别,但ALV-J与REV的共感染可明显延缓鸡对IBDV弱毒疫苗免疫的抗体反应.     

我国不同品种鸡群中禽白血病的流行情况及诱发肿瘤的多样性

<正>禽白血病病毒(ALV)是能感染多种鸟类的反转录病毒群,自然感染鸡的只有A、B、C、D、E和J亚群。20世纪80年代中期,世界上主要商业化育种公司均已净化外源性A、B、C、D亚群ALV。ALV-J是90年代早期才开始在白羽肉鸡中发病和流     

马立克氏病病毒囊膜粘蛋白B基因原核细胞表达产物单克隆抗体的制备

用大肠杆菌BL21表达了马立克氏病病毒（MDV）强毒GA株的囊膜糖蛋白B（gB）基因，通过SDS－PAGE电泳分离表达蛋白条带，切下并碾碎后作为免疫原制备单克隆抗体。通过ELISA和间接免疫荧光试验（IFA），得到1株阳性单克隆抗体杂交瘤细胞株7C8。该单抗腹水的ELISA效价为1：2^12，IFA效价为1：800，与MDV不同致病型毒株CVI988、GA、RB1B、MD11、648A株感染的鸡胚成纤维细胞（CEF）均呈IFA阳性。1：100稀释时与GA株感染的CEF在斑点酶联免疫吸附试验（dot-ELISA)中呈阳性。