彩色免疫金银染色法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究

试验首次建立了固相载体上的彩色免疫金银染色法(CIGSS)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),并获得成功。用提纯的PRRSV高免兔制备高免血清,按常规方法提取兔抗PRRSVIgG,建立了检测PRRSV抗原的彩色免疫金银染色法。经方阵试验确定最佳兔抗PRRSV IgG工作浓度为1∶400,金标羊抗兔IgG的工作浓度为1∶1 000,银染色的时间为15 min,彩染的时间为2 min。用该法对提纯的PRRSV病毒抗原的最低检出量为1.469μg/ml,其敏感性为DIGFA的5倍。以CIGSS法检测了52份疑似PRRSV感染的猪样本,阳性率为53.84%,而检测猪细小病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪巴氏杆菌以及正常的Marc-145细胞培养物,均为阴性反应。表明该法具有快速、准确、操作简便、敏感性高、易于判断、特异性强、重复性好等优点,可用于大量PRRSV抗原样本的检测。     

猪流感病毒毒株感染对猪外周血淋巴细胞炎性因子转录时相的影响

试验用猪流感病毒（Swine influenza virus,SIV）（毒株）体外感染猪外周血淋巴细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,利用real—timePCR方法对病毒感染不同时间细胞中的病毒量和炎性细胞因子mRNA表达量进行检测。结果显示,感染后1h就可检测到病毒,但病毒量相对较小;在24h时病毒开始大量增殖;在72h病毒量达到最高峰,为1h时20倍以上。IL-1βmRNA的表达量在48h增加到最高;IL-6mRNA的表达量在感染后1h内显著增加;IL-8mRNA的表达量在12h时达到最大量;IL-12P35mRNA的表达量在72h迅速上升,为对照的56．1倍;IL-12P40mRNA的表达量在1～2h表达量较高;IL-13在72h达到最大值,为对照的30．7倍;IL-17mR—NA的表达量在72h达到最大值,为对照的4．9倍;IL-18mRNA的表达量在12h达到对照的1．9倍。结果表明,SIV感染PBMC后,随着病毒的大量复制,多种炎性细胞因子表达量显著增加。     

感染PRRSV Nsp2基因部分缺失变异株的仔猪抗体变化规律

为了解PRRSV Nsp2基因缺失变异株的致病性,采用2个Nsp2基因分别连续缺失3个和89个碱基的PRRSV变异株Hn-2(GenBank:FJ237419)和Hn-4(GenBank:FJ237421)的病毒液,人工滴鼻感染断奶仔猪,同时用Marc-145健康仔猪细胞培养液滴鼻作对照,在感染后0,7,14,24,3...     

猪白细胞介素-2基因的克隆及其重组禽痘病毒载体的构建

采用RT-PCR技术自豫南黑猪脾淋巴细胞中扩增猪IL-2基因(pIL-2),RT-PCR产物进行T-A克隆并测序,获得了猪IL-2基因序列.将BamH Ⅰ酶切的猪IL-2基因非定向克隆到BamH Ⅰ酶切并去磷酸化的pSY538载体上,通过PCR、酶切和测序鉴定,筛选正向插入的重组质粒pSY538/pIL-2.NotⅠ酶...     

猪细小病毒感染PK-15细胞抗病毒相关因子转录变化的分析

为了解猪细小病毒(PPV)感染后引起干扰素及其相关细胞因子的反应,探讨宿主一病毒之间的作用关系,作者运用荧光定量PCR技术,测定和分析PPV感染PK-15细胞引起的病毒DNA量的变化和细胞因子IFN-β、IFN-γ、IFNAR-1、IFNAR 2、MHC-I、MHC一Ⅱ、MX1、iNOS、2-5AS、RNase L和IRF-3的转录水平.结果显示,PPV感染PK-15细胞12h病毒开始大量迅速增殖,48 h达到最高峰;PPV感染后可引起PK-15细胞中IFN-β、IFN-γ、IFNAR-1、IFNAR-2、MHC-I、MHC-Ⅱ、Mxl、iNOS、2-5AS、RNase I.和IRF-3的转录量显著增加,其中Mχ1基因在24 h转录量达到8 423倍.猪细小病毒感染可引起PK-15细胞抗病毒相关因子转录增加.     

猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR快速鉴定方法的建立

粪肠球菌和屎肠球菌是引起猪感染发病的优势肠球菌种,以肠球菌的16S rRNA基因设计属特异性引物,利用SodA基因多态性设计种特异性引物,同时优化反应条件,建立了能同时测定猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR方法。通过特异性和敏感性分析,该方法能扩增出肠球菌属特异性片段及粪肠球菌和屎肠球菌种特异性片段;对粪肠球菌敏感性为0...     

做好准备 迎接丰收

我国畜牧业历史悠久，它是一个民族产业，其发展空间很大。我国畜牧业的生产产值占农业的生产总值的比例还不到40％，而在发达国家这个比例已经达到了50％，有的甚至达到70％～80％，因此我国畜牧业发展潜力还很大；党和政府非常重视畜牧业发展，制定了一些利于畜牧业发展的相关政策；消费者一定得消费鸡蛋、肉和奶；因此，我们有理由相信我国畜牧业前景非常好，我们应该为我们是畜牧人而自豪！     

内毒素诱导牛乳腺炎时乳房淋巴和奶中细胞因子的变化

牛乳腺中适度的炎症反应是乳腺感染预后良好所必需的。前细胞因子，包括白介素和TNF-α等，启动乳腺组织炎症反应并诱导白细胞迁入乳房内。     

鸡新城疫与鸡霍乱联合免疫及监测研究

本文通过对鸡新城疫与鸡霍乱免疫抗体的系统检测和研究,弄清了鸡新城疫母源抗体消长规律及其对雏鸡免疫力的影响,指出在产蛋高峰前按免疫程序进行免疫接种的种鸡群,其雏鸡21日龄为鸡新城疫Ⅱ系苗接种的有利时机。并依据免疫记忆,二次免疫应答反应的原理,确定了Ⅱ系苗接种后42天为Ⅰ系苗接种的最佳时机,与此同时探索了鸡霍乱弱毒苗再次接种的有利时机和鸡新城疫与鸡霍乱的联合免疫,在此基础上试验和制定了每两年进行三次免疫接种的鸡新城疫与鸡霍乱联合免疫程序。     

肽核酸在疾病诊疗中的应用

肽核酸是一类新型信息分子,具有不带电荷的类似肽链的骨架结构并带有碱基,能与DNA和RNA特异性杂交,能调节基因的复制、转录(或逆转录)和翻译过程,在疾病的分子诊断和治疗方面有着广泛的应用前景.