不同生长势梨种质矮化预选指标的比较研究

[目的]为育种选择、选配亲本及性状的早期鉴定提供理论依据。[方法]以S2×山梨（乔化）、S2×山梨（矮化）、S2、山梨、极矮化种质为材料，从叶片气孔密度、枝皮率、叶片厚度、栅栏组织厚度、栅海比、导管密度等指标来判断各种质的矮化性状。[结果]5种梨种质中生长势强的山梨枝皮率、叶片厚度、栅栏组织厚度及栅海比最小，而气孔密度和导管密度最大。生长势弱的梨极矮化种质枝皮率、叶片厚度、栅栏组织厚度、栅海比最大，而气孔密度和导管密度最小。各种质在气孔密度、枝皮率、叶片厚度、栅栏组织厚度、栅海比、导管密度之间存在差异。[结论]气孔密度、枝皮率、叶片厚度、栅栏组织厚度、栅海比以及导管密度可作为梨树体生长势早期鉴定的指标。     

不同生长势梨种质矮化预选指标的比较研究（摘要）

[目的]为梨育种选择、选配亲本及性状的早期鉴定提供理论依据。[方法]以S2×山梨（乔化）、S2×山梨（矮化）、S2、山梨、极矮化种质为材料,从叶片气孔密度、枝皮率、叶片厚度、栅栏组织厚度、栅海比、导管密度等指标来判断各种质的矮化性状。气孔密度的测定：选择实生苗主干中部、向阳面成熟叶片,10：00～10：30采叶。观察气孔时用指甲油涂抹叶背主脉中间两侧,干燥几分钟后,用镊子将指甲油层揭下,放在载玻片上,盖上盖玻片,利用Olympus显微图像分析仪分析,选择气孔密度中等的视野,观察气孔密度和大小。枝皮率的测定：选取一年生枝条10个,利用游标卡尺按十字交叉法分别测量除皮前后的枝条直径,以（1-ab/AB）×100%计算枝皮率（A、B为枝纵横径,a、b为去皮后枝纵横径）,取平均值。叶片厚度、栅栏组织厚度、栅海比及导管密度的研究：采用石蜡切片法测定。材料用FAA液固定,利用切片机切片,在DMB5、Moticam 1300显微影像系统摄影,Motic Image Advanced 3.2捕捉图像并进行显微测量。[结果]5种梨种质中生长势强的山梨枝皮率（27.4%）、叶片厚度（200.5μm）、栅栏组织厚度（93.8μm）及栅海比（0.75）最小,而气孔密度（396.00个/mm~2）和导管密度（377.7个/μm~2）最大。生长势弱的梨极矮化种质枝皮率（45.0%）、叶片厚度（248.3μm）、栅栏组织厚度（140.4μm）、栅海比（1.59）最大,而气孔密度（235.75个/mm~2）和导管密度（287.0个/μm）最小。各种质在气孔密度、枝皮率、叶片厚度、栅栏组织厚度、栅海比、导管密度之间存在显著差异（P〈0.05）。[结论]气孔密度、枝皮率、叶片厚度、栅栏组织厚度、栅海比以及导管密度可作为梨树体生长势早期鉴定的指标。     

山葡萄SRAP技术体系的建立及其在品种鉴定中的应用

以6个不同的山葡萄品种为材料,对山葡萄SRAP分子标记技术体系进行优化,探讨SRAP标记在山葡萄品种鉴定中的可行性.结果表明:SRAP扩增程序为94℃预变性5min;前5个循环,94℃变性45s,35℃退火45s,72℃延伸90s;后35个循环,94℃变性45 s,50℃退火45s,72℃延伸90s;最后72℃延伸7min.反应体系:25μL总反应体系中含模板DNA 20 ng,dNTP 1.0 μL,上下游引物各1μL,rTaq酶0.2μL,10倍Buffer1.0μL,其余用灭菌的ddH2O补充.应用筛选出的16对引物对6个山葡萄品种进行扩增,共扩增出96条条带,其中多态性带占67.71％.每个品种都能找出其特有条带,最少用2对引物就可鉴别6个山葡萄品种.     

桃花粉可育基因连锁的RAPD 标记与SCAR标记的转化

 桃品种以重阳红(花粉不育) ×大久保(花粉可育) 的52株F₁代群体为试材, 应用RAPD技术, 结合集群分组分析法(Bulked Segregate Analysis, BSA) 构建花粉可育/不育基因池, 利用180个随机引物, 筛选在花粉可育基因池中稳定扩增的一个RAPD标记OPW03-900。经过重复性验证和群体单株验证, 该标记仅在花粉可育个体(重组型除去) 中出现, 与桃花粉可育/不育位点的连锁距离为5.80cM。将该特异性片段回收、克隆、测序, 并设计一对特异SCAR引物, 再对F1代个体进行PCR扩增, 发现该特异带的位点及重组型个体的数目与RAPD扩增结果一致, 片段大小为906 bp, 命名为SCW03-906,表明RAPD标记已成功转化为与桃花粉可育基因连锁的SCAR标记。该序列已被GenBank收录, 登录号为DQ659676。     

苹果梨果实皮孔陷斑病发病原因的探讨——与钙素营养的关系

通过对苹果梨果实皮孔陷斑病的发生及其与钙素营养的关系研究，结果表明苹果梨果实皮孔陷斑病的发生与果实钙含量低、N／Ca比、K／Ca比高有关。     

新疆雪莲的离体培养及其快速繁殖

以新鲜幼嫩的新疆雪莲无菌叶片作外植体，接种于含有不同激素水平的MS培养基上，经15d后，愈伤组织形成，并分化出很多丛生芽．在诱导愈伤组织过程中，产生3种类型的愈伤组织，其中呈紫红色的胚性愈伤组织芽分化最多．适宜愈伤组织诱导的培养基为：MS 6-BA2mg／L IBA0．2mg／L，诱导率可达90．48％；适宜芽分化和继代增殖的培养基为MS 6-BA0．4mg／L NAA0．05mg／L，继代培养40d，平均增殖倍数11．72倍；适宜生根的培养基为1／2MS IAA0．2mg／L 活性炭O．5％；过渡移栽基质为腐殖土：河沙=2：1，试管苗根长约1cm时移栽，保湿，成活率高达72％．     

苹果梨授粉花粉的萌发以及花粉管的行为

本试验采用以鸭梨为主的混合花粉、谢花甜花粉、鸭梨花粉和苹果梨树为试材，观察了花粉在苹果梨柱头上的萌发以及花粉管在花柱内的生长情况。结果表明：混合花粉在苹果梨柱头上大约2h开始萌发，谢花甜花粉和鸭梨花粉在苹果梨柱头上大约4h才开始萌发；10h花粉管开始伸入柱头，24h大部分花粉管进入到花柱上部；36h时大部分花粉管已进入花柱中部；56h开始有部分花粉管到达子房；72－96h大部分花粉管穿过子房，完成受精。     

桃AFLP技术反应体系的优化

以"珲春桃"与"正满早生"杂交获得的32株F_1代群体为材料,对影响桃AFLP技术分析体系的因素作了详细的探讨,优化出一套稳定、可靠的桃AFLP反应体系。经优化,得出最适宜的结果:酶切时间为6h、Mg- Cl_2浓度为1.75 mmol/L、预扩增产物稀释倍数为10倍。利用优化后的桃AFLP分析体系对该技术的重复性进行了验证,重复率可达90%。     

葡萄LEAFY基因启动子的克隆与序列分析

为探明葡萄LEAFY基因的表达调控规律,应用PCR技术从藤稔葡萄中克隆了1个长1 833 bp的DNA片段,该序列含有2个内含子区域,编码402个氨基酸,与葡萄LEAFY同源基因VFL有99%的同源性.应用基因组步移法克隆了LEAFY基因的5′侧翼序列925 bp,拼接后的LEAFY基因及启动子序列共2 692 bp(GenBank登录号EF222286).用PLACE、PlantCARE在线启动子预测工具分析表明:该序列含有启动子的特定结构,如TATA-box,CAAT-box等,另外含有一些顺式作用元件如MYB结合位点、ABA响应元件、光响应元件和一些其他的调控序列,说明葡萄LEAFY基因的表达可能受MYB、ABA和光等的调控.用FootPrinter在线工具对葡萄与拟南芥等其他4种植物的LEAFY同源基因启动子进行比较,发现不同植物的启动子既有保守性,又有多样性,转录因子结合位点的分布相似,但也有区别,暗示了LEAFY基因表达调控的精确性或多样性.     

山葡萄"双优"品种组培苗脱毒方法的研究

以山葡萄“双优”品种组培苗为材料，采用热处理与茎尖培养相结合的方法，比较不同处理时间、不同茎尖长度对组培苗脱毒茎尖成活率的影响，同时筛选茎尖脱毒培养的最适合培养基．结果表明：在葡萄茎尖脱毒培养中，最适培养基为：MS＋6-BA2mg／L＋NAA0．05mg／L＋蔗糖30girl＋琼脂9g/L．采用热处理20～30d的茎尖成活率较单纯茎尖培养（0．2mm）成活率也有增加，且热处理时间20～30d，茎尖大小在0．4mm左右时的组培苗长势好，死亡率几乎为零，茎尖成活率比较理想．